MATERIALS AND METHODS
Raw material and sauce formulations: Sardines (Sardina pilchardus) caught from Aegean Sea in Turkey. Fish samples were transported to the laboratory with ice packs within 2 h after landing. They were gutted, sorted, prepared as a fillet and washed with fresh water. Approximately 45 kg of sardines were used for this study and shared in 6 groups for different formulations of sauces. Each group was about 5 kg. Laboratory fish sauce production all sardines fillets were cut in to pieces about 1 cm long. On the other hand, at the same time formulations of additives were prepared. The mixture of group A was 10 g NaCl and 100 g fish for each bottle of this group. The formulation of group B was 10 g NaCl + 1 g red pepper + 1 g garlic powder + 100 g fish samples. Group C performed with 10 g NaCl + 5 g glucose + 100 g fish sample. Group D was 10 g NaCl + 5 g glucose + 1 g red pepper + 1 g garlic powder + 100 g fish sample. In group E 10 g NaCl + 10 g glucose + 100 g fish were used. And for the last formulation, group F was prepared with 10 g NaCl + 10 g glucose + 1 g red pepper + 1 g garlic powder + 100 g sardine samples. The ratios were calculated according to these formulas and used in each 5 kg samples pools. For each group 70 and totally 420 bottles were used in the study. Each bottle was filled with mixtures by hand, using plastic gloves. The capacity of the glass bottle was 200 mL, the color was dark brown. The tips of the bottles were plastic and no air could enter when they were closed. When all bottles were filled and closed they were incubated at 37°C in an incubator for 57 days. In the last day of fermentation, 6 bottles were taken for amino acid determination analysis and for determining fatty acid composition.
FAME analysis: Lipid extraction was done according to the Bligh and Dyer method. Methyl esters were prepared by transmethylation, using 2 M KOH in methanol and n-hexane, according to the method described by Ichihara et al. (1996). About 10 mg of extracted oil was dissolved in 2 mL hexane, followed by 4 mL of 2 M methanolic KOH. The tube was then vortexed for 2 min at room temperature. The heating process was run at 100°C for 7 min to hidrolize all the fatty acids. On completion of the process, they were cooled. After centrifugation at 4000 rpm for 10 min, the solution formed in two phases. The lower phase, containing the fatty methyl esters was transferred to a clean, 10 mL bottle and dried. Then the hexane layer was taken for GC analysis.
Gas chromatographic conditions: The fatty acid composition was analyzed by a GC IUPAC II D19, equipped with a flame ionization detector and a fused silica capillary SGE column (30 m, 0.32 mm, ID 0.25 lm BP20, 0.25 UM, USA). The oven temperature was initially set at 140°C, held for 5 min, raised to 200°C at the rate of 4°C min-1, held again at 220°C and then held for a further 10 min, while the injector and the detector temperatures were set at 220 and 280°C, respectively. The sample size was 1 ll and the carrier gas was controlled at 16 ps. The split used was 1:100. Fatty acids were identified by comparing the retention times of FAME with the standard 37 component FAME mixture (Supelco, Poole, Dorset). Two replicate GC analyses were performed and the results were expressed in GC area (%) as mean±SD.
Amino acid composition: Crude protein content was calculated by converting the nitrogen content, determined by Kjeldahl’s method (AOAC, 1995). For amino acid analysis, samples were hydrolyzed in 6 N HCl at 110°C for 24 h (AOAC, 1984) in an evacuated sealed ampoule. Excess acid from the hydrolysate was removed by flash evaporation under reduced pressure. The analysis was carried out using an Eppendorf Biotronic LC 3000 Amino acid Analyzer (Eppendorf- Biotronic, Hamburg, Germany), according to standard procedures. The results are given as means of triplicate values.
Statistical analysis: The (SPSS, version 9.0. Chicago, IL, USA) program was used to search for significant differences between mean values of the different results. Differences between means were analyzed by one-way Analysis of Variance (ANOVA) followed by Tukey and Duncan tests. The results are presented as means±SD. When a significant difference was detected between the group (p
วัสดุและวิธีการวัตถุดิบและสูตรซอส: ปลาซาร์ดีน (กล้อง pilchardus) ที่จับได้จากทะเลอีเจียนในตุรกี ตัวอย่างปลาถูกส่งไปห้องปฏิบัติการด้วยชุดน้ำแข็งภายใน 2 ชม.หลังจากบิน พวกเขาเสียใจ เรียง เตรียมไว้เป็นเนื้อความ และล้าง ด้วยน้ำสะอาด ประมาณ 45 กก.ปลาซาร์ดีนถูกใช้สำหรับการศึกษานี้ และใช้ร่วมใน 6 กลุ่มสำหรับสูตรอื่นของซอส แต่ละกลุ่มมีประมาณ 5 กก. ห้องปฏิบัติการปลาผลิตแล่ปลาซาร์ดีนทั้งหมดถูกตัดเป็นชิ้นยาวประมาณ 1 ซม. บนมืออื่น ๆ ในเวลาเดียวกัน สูตรของสารเตรียมไว้ ส่วนผสมของกลุ่ม A มี NaCl 10 กรัมและ 100 กรัมปลาแต่ละขวดของกลุ่มนี้ กำหนดกลุ่ม B มี 10 g NaCl + 1 กรัมพริกแดง + กระเทียมผง 1 กรัม + 100 กรัมปลาตัว กลุ่ม C ทำ NaCl 10 กรัม + กลูโคส 5 กรัม + 100 กรัมปลาอย่าง กลุ่ม D เป็น 10 g NaCl + 5 กรัมกลูโคส + 1 กรัมพริกแดง + กระเทียมผง 1 กรัม + 100 กรัมปลาอย่าง ในกลุ่ม E 10 g NaCl + กลูโคส 10 กรัม + 100 กรัม ปลาใช้ และสำหรับสูตรครั้งสุดท้าย กลุ่ม F เตรียม NaCl 10 กรัม + กลูโคส 10 กรัม + พริกแดง 1 กรัม + 1 กรัมกระเทียมผง +ตัวอย่างปลาซาร์ดีน 100 กรัม อัตราคำนวณตามสูตรเหล่านี้ และใช้ในการสระแต่ละตัวอย่าง 5 กิโลกรัม สำหรับแต่ละกลุ่ม 70 และทั้งหมด 420 ขวดถูกนำมาใช้ในการศึกษา ขวดละเต็มไป ด้วยส่วนผสมของด้วยมือ ใช้ถุงมือพลาสติก ความจุของขวดแก้วขนาด 200 มล. สีน้ำตาลเข้มถูก เคล็ดลับของขวดพลาสติก และอากาศไม่สามารถป้อนเมื่อพวกเขาถูกปิดกัน เมื่อขวดทั้งหมดถูกปิด จะได้มบ่มเลี้ยงที่อุณหภูมิ 37° C ในตู้อบที่ 57 วัน ในวันสุดท้ายของการหมัก 6 ขวดที่ถ่าย สำหรับกรดอะมิโนการกำหนดวิเคราะห์ และกำหนดองค์ประกอบของกรดไขมันวิเคราะห์ชื่อเสียง: ดูดไขมันเสร็จตามวิธีการ Bligh และทันการ Methyl esters จัดทำ โดย transmethylation ใช้ M 2 เกาะในเมทานอลและเอ็นเฮกเซน ตามวิธีการอธิบายไว้โดย Ichihara et al. (1996) ประมาณ 10 มิลลิกรัมสกัดน้ำมันที่ละลายในเฮกเซน 2 มล. ตาม ด้วย 4 mL ของเกาะ methanolic M 2 หลอดได้แล้ว vortexed สำหรับ 2 นาทีที่อุณหภูมิห้อง กระบวนการทำความร้อนทำที่ 100° C เป็นเวลา 7 นาทีเพื่อ hidrolize กรดไขมันทั้งหมด ในความสมบูรณ์ของกระบวนการ จะได้เย็น หลังจากหมุนเหวี่ยงที่ 4000 rpm 10 นาที การแก้ไขปัญหาที่เกิดขึ้นในระยะที่สอง ประกอบด้วยไขมัน methyl esters โอน 10 มล.ขวดสะอาด ขั้นต่ำ และแห้ง แล้ว ชั้นโพลีถูกวิเคราะห์ GCก๊าซโครมาเงื่อนไข: องค์ประกอบกรดไขมันถูกวิเคราะห์ โดยเครื่อง GC ยิ่ง ๆ II D19 เครื่องตรวจจับเปลวไฟไอออไนซ์และครอบฟันด้วยซิฝอยขนานคอลัมน์ (30 m, 0.32 มม. ID 0.25 lm BP20, 0.25 UM สหรัฐอเมริกา อุณหภูมิเตาอบเริ่มตั้ง 140° c จัดขึ้น 5 นาที ถึง 200° C ในอัตรา 1 นาที 4° C จัดขึ้นอีกครั้งใน 220° C และจากนั้น จัดขึ้นในอีก 10 นาที ขณะที่หัวฉีดและเครื่องตรวจจับอุณหภูมิตั้งไว้ที่ 220 และ 280° C ตามลำดับ ขนาดตัวอย่างคือ 1 ll และก๊าซผู้ควบคุมที่อิเกียพีเอส 16 การแยกใช้เป็น 1: 100 กรดไขมันที่พบ โดยการเปรียบเทียบเวลาเก็บรักษาเกียรติยศ ด้วยการผสมผสานชื่อเสียงมาตรฐาน 37 ประกอบ (Supelco, Poole, Dorset) ดำเนินการวิเคราะห์ GC replicate สอง และผลลัพธ์ถูกแสดงในพื้นที่ GC (%) mean±SDกรดอะมิโนองค์ประกอบ: โปรตีนเนื้อหาถูกคำนวณ โดยการแปลงเนื้อหาไนโตรเจน กำหนด โดยวิธีเจลดาห์ลเมื่อต้องของ (aoac หรือ 1995) สำหรับการวิเคราะห์กรดอะมิโน ตัวอย่างถูก hydrolyzed ใน 6 N HCl ที่ 110° C ใน 24 h (aoac หรือ 1984) ในหลอดเข็มฉีดยาปิดสนิทการเจาะ กรดส่วนเกินจากการฉีดถูกเอาออก โดยการระเหยแฟลชภายใต้แรงดันลดลง ดำเนินการวิเคราะห์ว่าใช้กรด Eppendorf Biotronic LC 3000 อะมิโนวิเคราะห์ (Eppendorf - Biotronic ฮัมบูร์ก เยอรมนี), ตามวิธีการมาตรฐาน ผลลัพธ์ที่ได้เป็นค่าที่เพิ่มขึ้นสามเท่าวิเคราะห์เชิงสถิติ: การ (SPSS รุ่น 9.0 Chicago, IL ประเทศสหรัฐอเมริกาใช้โปรแกรมเพื่อค้นหาความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างค่าเฉลี่ยของผลต่าง ความแตกต่างระหว่างวิธีถูกวิเคราะห์โดยทางเดียวการวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) ตาม ด้วย Tukey และทดสอบดันแคน ผลลัพธ์จะแสดงเป็น means±SD เมื่อพบความแตกต่างที่สำคัญระหว่างกลุ่ม (p < 0.05), Tukey หรือดันแคนหลายการทดสอบเปรียบเทียบกับลำดับที่บางซับซ้อนแตกต่างใช้การเปรียบเทียบหลาย
การแปล กรุณารอสักครู่..

วัสดุและวิธีการวัตถุดิบและซอสสูตร: ปลาซาร์ดีน (Sardina pilchardus) จับจากทะเลอีเจียนในตุรกี ตัวอย่างปลาถูกส่งไปยังห้องปฏิบัติการที่มีแพ็คน้ำแข็งภายใน 2 ชั่วโมงหลังจากเชื่อมโยงไปถึง พวกเขากำลังเสียใจมากเรียงลำดับเตรียมเป็นเนื้อและล้างด้วยน้ำสะอาด ประมาณ 45 กิโลกรัมของปลาซาร์ดีนถูกนำมาใช้ในการศึกษานี้และใช้ร่วมกันใน 6 กลุ่มสำหรับสูตรที่แตกต่างของซอส แต่ละกลุ่มก็ประมาณ 5 กก. ห้องปฏิบัติการการผลิตน้ำปลาทุกเนื้อปลาซาร์ดีนที่ถูกตัดเป็นชิ้นยาวประมาณ 1 ซม. บนมืออื่น ๆ ที่ในเวลาเดียวกันสูตรของสารเติมแต่งได้จัดทำ ส่วนผสมของกลุ่มเป็น 10 กรัมโซเดียมคลอไรด์และ 100 กรัมปลาสำหรับขวดของกลุ่มนี้ในแต่ละ สูตรของกลุ่ม B เป็น 10 กรัมโซเดียมคลอไรด์ + 1 กรัมพริกแดง + 1 กรัมผงกระเทียม + 100 กรัมตัวอย่างปลา กลุ่ม C ดำเนินการกับ 10 กรัมโซเดียมคลอไรด์ + 5 กรัมตัวอย่างปลากลูโคส + 100 กรัม กลุ่ม D เป็น 10 กรัมโซเดียมคลอไรด์ + 5 กรัมกลูโคส + 1 กรัมพริกแดง + 1 กรัมกระเทียมตัวอย่างปลาผง + 100 กรัม ในกลุ่ม E 10 กรัมโซเดียมคลอไรด์ + 10 กรัมกลูโคส + 100 กรัมปลาถูกนำมาใช้ และสำหรับสูตรที่ผ่านมากลุ่มเอฟได้รับการจัดทำขึ้นด้วย 10 กรัมเกลือ 10 กรัม + ตัวอย่างกลูโคส + 1 กรัมพริกแดง + 1 กรัมผงกระเทียม + 100 กรัมปลาซาร์ดีน อัตราส่วนนี้จะถูกคำนวณตามสูตรเหล่านี้และนำมาใช้ในแต่ละตัวอย่าง 5 สระกก. สำหรับแต่ละกลุ่ม 70 และทั้งหมด 420 ขวดถูกนำมาใช้ในการศึกษา แต่ละขวดก็เต็มไปด้วยสารผสมด้วยมือโดยใช้ถุงมือพลาสติก ความจุของขวดแก้ว 200 มลสีเป็นสีน้ำตาลเข้ม เคล็ดลับของขวดที่ถูกพลาสติกและไม่มีอากาศสามารถป้อนเมื่อพวกเขาถูกปิด เมื่อทุกขวดที่เต็มไปและปิดพวกเขาถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสในศูนย์บ่มเพาะ 57 วัน ในวันสุดท้ายของการหมัก 6 ขวดถูกนำสำหรับการวิเคราะห์ความมุ่งมั่นและกรดอะมิโนสำหรับการกำหนดองค์ประกอบของกรดไขมัน. วิเคราะห์ FAME: การสกัดไขมันได้ทำตามที่ไบลห์และย้อมวิธี เมทิลเอสเตอร์ที่ถูกจัดทำขึ้นโดย transmethylation ใช้ 2 M KOH ในเมทานอลและ N-เฮกเซนตามวิธีการอธิบายโดย Ichihara, et al (1996) เกี่ยวกับ 10 มิลลิกรัมของน้ำมันสกัดถูกละลายใน 2 มลเฮกเซนตามด้วย 4 มิลลิลิตร 2 เมตรเมทานอลเกาะ หลอดถูกหมุนวนแล้วเป็นเวลา 2 นาทีที่อุณหภูมิห้อง กระบวนการให้ความร้อนที่ได้รับการทำงานที่อุณหภูมิ 100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 7 นาทีถึง hidrolize กรดไขมันทั้งหมด เมื่อเสร็จสิ้นการที่พวกเขาได้รับการระบายความร้อน หลังจากการหมุนเหวี่ยงที่ 4000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาที, การแก้ปัญหาที่เกิดขึ้นในสองขั้นตอน ระยะที่ต่ำกว่าที่มีไขมันเมทิลเอสเตอร์ที่ถูกย้ายไปทำความสะอาดขวดมิลลิลิตร 10 และแห้ง แล้วชั้นเฮกเซนถูกนำสำหรับการวิเคราะห์ GC. แก๊สเงื่อนไขโครมา: องค์ประกอบของกรดไขมันที่ได้มาวิเคราะห์โดย D19 GC IUPAC ครั้งที่สองพร้อมกับตรวจจับเปลวไฟไอออนไนซ์และคอลัมน์ซิลิกาหลอมเส้นเลือดฝอย SGE (30 เมตร, 0.32 มม ID 0.25 LM BP20, 0.25 UM, สหรัฐอเมริกา) อุณหภูมิเตาอบได้รับการตั้งค่าเริ่มต้นที่ 140 ° C ซึ่งจัดขึ้นเป็นเวลา 5 นาทีขึ้นถึง 200 ° C ที่อัตรา 4 ° C นาที-1 ซึ่งจัดขึ้นอีกครั้งที่ 220 องศาเซลเซียสและจัดขึ้นจากนั้นอีก 10 นาทีในขณะที่หัวฉีด และอุณหภูมิเครื่องตรวจจับที่ตั้งอยู่ที่ 220 และ 280 ° C ตามลำดับ ขนาดของกลุ่มตัวอย่างคือ 1 LL และก๊าซขนส่งถูกควบคุมที่ 16 PS แยกที่ใช้เท่ากับ 1: 100 กรดไขมันที่ถูกระบุโดยการเปรียบเทียบเวลาการเก็บรักษาเกียรติยศกับมาตรฐาน 37 ส่วนผสม FAME ส่วนประกอบ (Supelco พูลดอร์เซ็) สองการวิเคราะห์ GC ซ้ำได้ดำเนินการและผลลัพธ์ที่ได้แสดงในพื้นที่ GC (%) ค่าเฉลี่ย± SD. อะมิโนกรด: โปรตีนที่คำนวณได้จากการแปลงปริมาณไนโตรเจนที่กำหนดโดยวิธี Kjeldahl ของ (AOAC, 1995) สำหรับการวิเคราะห์กรดอะมิโน, ตัวอย่างที่ถูกไฮโดรไลซ์ใน 6 N HCl ที่ 110 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง (AOAC, 1984) ในหลอดปิดผนึกอพยพ กรดส่วนเกินออกจากไฮโดรไลจะถูกลบออกจากแฟลชระเหยภายใต้ความกดดันลดลง การวิเคราะห์ได้ดำเนินการโดยใช้ Eppendorf BIOTRONIC LC 3000 กรดอะมิโนวิเคราะห์ (Eppendorf- BIOTRONIC, ฮัมบูร์ก, เยอรมนี) ตามขั้นตอนมาตรฐาน ผลที่จะได้รับเป็นความหมายของค่าเพิ่มขึ้นสามเท่า. การวิเคราะห์ทางสถิติที่: (SPSS, รุ่น 9.0 Chicago, IL, USA.) โปรแกรมถูกใช้ในการค้นหาความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างค่าเฉลี่ยของผลที่แตกต่างกัน ความแตกต่างระหว่างวิธีการวิเคราะห์ทางเดียววิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) ตามด้วย Tukey และดันแคนทดสอบ ผลที่จะได้นำเสนอเป็นหมายถึง± SD เมื่อความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญที่ตรวจพบระหว่างกลุ่ม (p <0.05) ทั้งการทดสอบ Tukey หรือดันแคนเปรียบเทียบหลาย ๆ ถูกนำมาใช้เพื่อให้แตกต่างบางอย่างอนุรักษ์นิยมมากขึ้นโดยใช้การเปรียบเทียบหลาย
การแปล กรุณารอสักครู่..
