coherence source, interference filters, collector lens and beamsplitter,
which splits the beam into two separated nearly identical optical
arms — reference and object arms. Both arms contain matching
condensers, objectives and tube lenses. The reference arm includes
diffraction grating, which spatially separates light of different wavelengths.
Only the + 1st order beam is separated and interferes with
the object beam in the output plane, while creating interference
structure — hologram. The hologram is recorded by the CCD camera
(XIMEA MR4021MC-VELETA). The imaging characteristics of CCHM
are described in detail in [39].
The numerical reconstruction of the hologram is performed using
the house-built software based on fast Fourier transform methods [40,
41] and phase unwrapping [42,43]. The reconstructed quantitative
phase images acquired by CCHM contain values of phase delays induced
by the specimen expressed in radians/pixel.
2.3.3. Evaluation of cell behaviour
Several features (parameters) describing the cell morphology were
extracted from the microscopic images for comparison of the cell behaviour
on different surfaces. The quantitative phase imaging by CCHM enables
to extract cell features that are based on the phase distribution in
the cell region and, therefore, provide information about the dry mass
density distribution within the cells (see Supporting Information).
The example of quantitative phase image used for further analysis is
shown in Fig. 3. The cells in the image were firstly segmented by
marker-controlled watershed segmentation approach [44]and identi-
fied as separate regions by the automatic procedure performed in
MATLAB (MathWorks, Inc.). Afterwards, the cell features were extracted
from each detected cell region. The set of obtained features was further
statistically analysed in STATISTICA (StatSoft, Inc.). The significance
ในแหล่งที่มา , ตัวกรองสัญญาณรบกวน , เลนส์สะสมและ beamsplitter
, ซึ่งแยกคานเป็นสองแยกเกือบเหมือนแสง
แขน - แขนและการอ้างอิงวัตถุ แขนทั้งสองข้างมีการจับคู่
คอนเดนเซอร์ วัตถุประสงค์ และเลนส์หลอด อ้างอิงจากแขนรวมถึง
ตะแกรงซึ่งความแตกต่างแยกแสงความยาวคลื่นแตกต่างกัน .
เพียง 1 ลำเพื่อแยกและรบกวน
ลำแสงในการส่งออกเครื่อง ในขณะที่การสร้างสัญญาณรบกวน
โครงสร้าง - โฮโลแกรม โฮโลแกรมจะถูกบันทึกด้วยกล้อง CCD
( ximea mr4021mc-veleta ) ภาพลักษณะของ cchm
จะอธิบายในรายละเอียดใน [ 39 ] .
การฟื้นฟูเชิงตัวเลขของโฮโลแกรมจะดําเนินการโดยใช้
บ้านที่สร้างขึ้นบนพื้นฐานของวิธีการแปลงฟูเรียร์อย่างรวดเร็วซอฟต์แวร์ [ 40 ] 1
42,43 unwrapping [ 41 ] การสร้างปริมาณ
เฟสภาพได้มา cchm ประกอบด้วยค่าเฟสความล่าช้าชักนำ
โดยตัวอย่างที่แสดงในเรเดียน / พิกเซล
2.3.3 . การประเมินพฤติกรรม
คุณสมบัติหลายเซลล์ ( พารามิเตอร์ ) อธิบายรูปร่างของเซลล์เป็น
สารสกัดจากภาพด้วยกล้องจุลทรรศน์เพื่อเปรียบเทียบเซลล์พฤติกรรม
บนพื้นผิวที่แตกต่างกัน ขั้นตอนการถ่ายภาพเชิงปริมาณโดย cchm ช่วย
สกัดเซลล์คุณสมบัติที่ขึ้นอยู่กับระยะการกระจายในเซลล์
ภูมิภาค และให้ข้อมูลเกี่ยวกับการกระจายความหนาแน่นของมวลแห้ง
ภายในเซลล์ ( ดูข้อมูลประกอบ ) .
ตัวอย่างของภาพที่ใช้สำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณเฟสต่อไป
แสดงในรูปที่ 3 . เซลล์ในรูป 2 . แบ่งตามสันปันน้ำแบ่ง
เครื่องหมายควบคุมวิธีการ [ 44 ] และ identi -
fied แยกภูมิภาค โดยอัตโนมัติกระบวนการดำเนินการใน
MATLAB ( แมธเวิร์คส์ , อิงค์ ) หลังจากนั้น มีเซลล์ที่สกัดจากเซลล์
ที่วัดแต่ละภูมิภาคชุดได้รับคุณสมบัติเพิ่มเติม
วิเคราะห์ใน statistica ( StatSoft , Inc . ) ความสำคัญ
การแปล กรุณารอสักครู่..
