2. Experimental sectionDaunorubicin

2. Experimental section
Daunorubicinwas purchased from Aldrich. TiO2 nanoparticles
(P25) with a diameter of about 30 nm were purchased from
Degussa.
Poly(lactic acid) nanofibers were fabricated by
electrospinning. First, the polylactic acid (Mn = 340 000)
was dissolved in the solvent of chloroform (10%, wt) and
stirred for 2 h. Next, it was loaded into a syringe connected
with anodal voltage. Aluminum foil as a collecting substrate
was connected with cathodal voltage. Electrospinning was
performed at room temperature with a gap between the
substrate electrode and the tip of the capillary of 10 cm at
driving voltages of 10 kV.
During our experiments, the solution of daunorubicin
(3.3 × 10−4 M) and other aqueous solutions (pH 7.0)
were prepared with ultrapure water, which was prepared
by distillation and then purified with a Milli-Q purification
system (Millipore Trading Co., Ltd) to a specific resistance of
>18 M
cm−1 at 25 ◦C. PLA nanofibers and TiO2
nanoparticles were suspended in ultrapure water, and then
stored in the dark at 4 ◦C.
In relevant AFM studies, to prepare the samples for
the new nanocomposites, the blending solution of TiO2
(4.0 × 10−3 g L−1) and PLA suspension (4.0 × 10−3 g L−1)
was added to the respective solutions including daunorubicin
(3.3 × 10−4 M). 5 μl of the blending solution (5 min after
preparation) is deposited onto freshly cleaved mica (already
glued on a steel disc) and incubated for 5 min. After the
sample dried under a nitrogen stream, imaging was performed
in tapping mode, by using a Nanoscope IIIa Multimode AFM
(Digital Instruments, Santa Barbara, CA, USA) operating in
air at room temperature.
For cell culture, leukemia K562 cells were cultured in a
flask in an RPMI 1640 medium (GIBCO) supplemented with
10% fetal calf serum (FCS, Sigma), penicillin (100 mU mL−1)
and streptomycin (100 mU mL−1) at 37 ◦C in a humidified
atmosphere containing 5% CO2. Afterwards, daunorubicin
and the blending solution of TiO2 and PLA suspension
were injected into cell culture for incubation in which the
final concentration of daunorubicin was 4.8 × 10−6 M and
that of TiO2 and PLA suspension was 4.0 × 10−3 g L−1.
The culture was detected on a laser scanning confocal
fluorescence microscope (LSCM) (Leica TCS SP2, Germany)
after incubating the cells for 10 min at room temperature
(20 ± 2 ◦C). In the control experiments, only daunorubicin
was injected. The freshly prepared cell culture was dropped
on a strictly cleaned glass plate immediately before the
measurement. The excitation wavelength of fluorescence was
480 n

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2 การส่วนที่ทดลองDaunorubicinwas ซื้อจาก Aldrich เก็บกัก TiO2(P25) มีเส้นผ่าศูนย์กลางประมาณ 30 นาโนเมตรซื้อจากกโพNanofibers กแอ) ได้หลังสร้างโดยเส้นใยนาโน แรก กรดเกิดสารประกอบเชิงซ้อน (Mn = 340 000)ถูกละลายในตัวทำละลายของคลอโรฟอร์ม (10%, wt) และกวนสำหรับ 2 h ถัดไป มันถูกโหลดลงในเข็มเชื่อมต่อกับแรงดันไฟฟ้า anodal อลูมิเนียมฟอยล์เป็นพื้นผิวที่เก็บรวบรวมถูกเชื่อมต่อกับแรงดันไฟฟ้า cathodal เส้นใยนาโนได้อุณหภูมิห้องมีช่องว่างระหว่างการพื้นผิวอิเล็กโทรดและแรงของ 10 ซ.ม.ที่ปลายขับแรงดัน 10 kVในระหว่างการทดลองของเรา การแก้ปัญหาของ daunorubicin(3.3 × 10−4 M) และโซลูชั่นอื่น ๆ อควี (pH 7.0)ได้เตรียมน้ำ ultrapure ซึ่งได้เตรียมไว้ด้วยการกลั่น และบริสุทธิ์แล้ว ด้วยการฟอก Qระบบ (มาก Trading Co., Ltd) ความต้านทานจำเพาะของ> cm−1 18 M ที่ 25 ◦C ปลา nanofibers และ TiO2เก็บกักได้ชั่วคราวในน้ำ ultrapure แล้วเก็บในมืดที่ 4 ◦Cในการศึกษา AFM ที่เกี่ยวข้อง การเตรียมตัวอย่างสำหรับสิทใหม่ โซลูชั่นผสมของ TiO2(4.0 × 10−3 g L−1) และปลาระงับ (4.0 × 10−3 g L−1)เพิ่มเพื่อแก้ปัญหาเกี่ยวข้องรวมทั้ง daunorubicin(3.3 × 10−4 เมตร) Μl 5 โซลูชันผสม (5 นาทีหลังจากเตรียม) จะฝากลงสดแหวกแก้วแล้วติดกาวบนแผ่นเหล็ก) และ incubated สำหรับ 5 นาที หลังจากตัวอย่างที่อบแห้งภายใต้กระแสไนโตรเจน ทำภาพในแท็บโหมด โดยใช้การ Nanoscope IIIa Multimode AFM(เครื่องมือดิจิตอล ซานตาบาร์บาร่า CA, USA) ในอากาศที่อุณหภูมิห้องการเพาะเลี้ยงเซลล์ เซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาว K562 มีอ่างในตัวหนาวในตัวกลาง RPMI 1640 (GIBCO) เสริมด้วยลูกครรภ์ 10% ซีรั่ม (FCS ซิก), ยาเพนนิซิลลิน (หมู่ 100 mL−1)และ streptomycin (หมู่ 100 mL−1) ที่ ◦C 37 ในการ humidifiedบรรยากาศที่ประกอบด้วย 5% CO2 ภายหลัง daunorubicinและโซลูชั่นผสมการระงับ TiO2 และปลาถูกฉีดเข้าไปในวัฒนธรรมเซลล์สำหรับบ่มซึ่งจะ4.8 × 10−6 M เป็นความเข้มข้นสุดท้ายของ daunorubicin และที่ระงับ TiO2 และปลาได้ 4.0 × 10−3 g L−1วัฒนธรรมพบ confocal สแกนเลเซอร์fluorescence กล้องจุลทรรศน์ (LSCM) (ไล TCS SP2 เยอรมนี)หลังจาก incubating เซลล์ใน 10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง(20 ± 2 ◦C) ในการทดลองควบคุม daunorubicin เท่านั้นถูกฉีด วัฒนธรรมเซลล์ลิ้มถูกตัดทิ้งในการทำความสะอาดอย่างเคร่งครัดแก้วจานทันทีก่อนวัด มีความยาวคลื่นในการกระตุ้นของ fluorescence480 n

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. ส่วนการทดลอง
Daunorubicinwas ซื้อมาจากดิช อนุภาคนาโน TiO2
(P25) มีเส้นผ่าศูนย์กลางประมาณ 30 นาโนเมตรที่ซื้อมาจาก
Degussa.
midi (กรดแลคติก) nanofibers ถูกประดิษฐ์โดย
ไฟฟ้าสถิต ครั้งแรกที่ polylactic กรด (Mn = 340 000)
ได้รับการละลายในตัวทำละลายของคลอโรฟอร์ม (10% โดยน้ำหนัก) และ
ขยับเป็นเวลา 2 ชั่วโมง ถัดไปก็ถูกโหลดลงในกระบอกฉีดยาที่เชื่อมต่อ
กับแรงดันไฟฟ้า Anodal ฟอยล์อลูมิเนียมเป็นสารตั้งต้นในการเก็บรวบรวม
ได้รับการเชื่อมต่อกับแรงดันไฟฟ้า cathodal ไฟฟ้าสถิตได้รับการ
ดำเนินการที่อุณหภูมิห้องที่มีช่องว่างระหว่าง
ขั้วพื้นผิวและปลายของเส้นเลือดฝอย 10 เซนติเมตรที่
แรงดันไฟฟ้าที่ขับรถ 10 กิโลโวลต์.
ในระหว่างการทดลองของเรา, การแก้ปัญหาของ daunorubicin
(3.3 × 10-4 M) และสารละลายอื่น ๆ ( ค่า pH 7.0)
ได้ถูกจัดทำขึ้นด้วยน้ำบริสุทธิ์ซึ่งได้รับการจัดทำขึ้น
โดยการกลั่นและการทำให้บริสุทธิ์แล้วด้วยการทำให้บริสุทธิ์พัน-Q
ระบบ (คเทรดดิ้ง จำกัด ) ที่จะต้านทานที่เฉพาะเจาะจงของ
> 18 M? CM-1 ที่ 25 ◦C ปลา nanofibers และ TiO2
อนุภาคนาโนถูกแขวนลอยในน้ำบริสุทธิ์แล้ว
เก็บไว้ในที่มืดที่ 4 ◦C.
ในการศึกษา AFM ที่เกี่ยวข้องเพื่อเตรียมความพร้อมตัวอย่างสำหรับ
nanocomposites ใหม่, การแก้ปัญหาการผสมของ TiO2
(4.0 × 10-3 กรัม L- 1) และระงับ PLA (4.0 × 10-3 กรัม L-1)
ถูกบันทึกอยู่ในการแก้ปัญหาที่เกี่ยวข้องรวมทั้ง daunorubicin
(3.3 × 10-4 M) 5 ไมโครลิตรของการแก้ปัญหาการผสม (5 นาทีหลังจากที่
การเตรียมความพร้อม) จะฝากไปยังไมกาตัดสด (แล้ว
ติดกาวบนแผ่นดิสก์เหล็ก) และบ่มเป็นเวลา 5 นาที หลังจากที่
ตัวอย่างแห้งภายใต้กระแสไนโตรเจน, การถ่ายภาพที่ได้ดำเนินการ
ในโหมดแตะโดยใช้ Nanoscope IIIa มัลติ AFM
(เครื่องมือดิจิตอล, Santa Barbara, CA, USA) การดำเนินงานใน
อากาศที่อุณหภูมิห้อง.
สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวเซลล์ K562 มาเพาะเลี้ยง ใน
ขวดใน RPMI 1640 กลาง (Gibco) เสริมด้วย
10% ซีรั่มลูกวัวของทารกในครรภ์ (FCS ซิก), ยาปฏิชีวนะ (100 mU ML-1)
และ streptomycin (100 mU ML-1) ที่อุณหภูมิ 37 ◦Cในความชื้น
ที่มีบรรยากาศ CO2 5% หลังจากนั้น daunorubicin
และการแก้ไขปัญหาการผสมของ TiO2 และปลาระงับ
ถูกฉีดเข้าไปในเซลล์เพาะเลี้ยงสำหรับบ่มที่
ความเข้มข้นสุดท้ายของ daunorubicin เป็น 4.8 × 10-6 M และ
ของ TiO2 และระงับ PLA เป็น 4.0 × 10-3 กรัม L-1 .
วัฒนธรรมได้รับการตรวจพบในการสแกนเลเซอร์ confocal
กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง (LSCM) (Leica TCS SP2, เยอรมนี)
หลังจากบ่มเซลล์เป็นเวลา 10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง
(20 ± 2 ◦C) ในการทดลองการควบคุมเพียง daunorubicin
ถูกฉีด การเพาะเลี้ยงเซลล์ที่ปรุงสดใหม่ถูกทิ้ง
บนแผ่นกระจกทำความสะอาดอย่างเคร่งครัดทันทีก่อนที่จะ
วัด ความยาวคลื่นกระตุ้นของการเรืองแสงเป็น
480 n

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . daunorubicinwas ส่วน
ทดลองซื้อมาจาก อัลดริช อนุภาคนาโน TiO2
( p25 ) ที่มีเส้นผ่านศูนย์กลางประมาณ 30 nm ซื้อมาจากเดกัสซ่า
.
พอลิติก ) เส้นใยเป็นเส้นใยประดิษฐ์โดย
. แรก , polylactic กรด ( MN = 340 , 000 )
ละลายในตัวทำละลายคลอโรฟอร์ม ( 10 % โดยน้ำหนัก ) และ
กวนเป็นเวลา 2 ชั่วโมง ต่อไปก็ถูกโหลดเข้าไปในเข็มเชื่อม
กับ anodal แรงดันไฟฟ้าอลูมิเนียมฟอยล์เป็นวัสดุเก็บ
ถูกเชื่อมต่อกับ cathodal แรงดันไฟฟ้า ทะเบียนการค้าคือ
แสดงอุณหภูมิห้องกับช่องว่างระหว่างแผ่นขั้วไฟฟ้า
และปลายหลอดเลือดฝอย 10 ซม. ที่
ขับแรงดัน 10 kV .
ในระหว่างการทดลองของเรา โซลูชั่นของดัวโนรูบิซิน
( 3 × 10 − 4 M ) โซลูชั่นอื่น ๆและน้ำ ( pH 7.0 )
) เตรียมน้ำบริสุทธิ์มาก ,ซึ่งได้เตรียมไว้แล้ว โดยการกลั่นให้บริสุทธิ์ด้วย

เป็นระบบบำบัด milli-q ( มิลลิ Trading Co . , Ltd ) เฉพาะความต้านทานของ
> 18 M
cm − 1 ใน 25 ◦ซี. ปลาเส้นใยและ TiO2
นาโนถูกแขวนลอยในน้ำบริสุทธิ์มาก และเก็บไว้ในที่มืดแล้ว

ใน 4 ◦ C การศึกษา AFM ที่เกี่ยวข้องเพื่อเตรียมตัวอย่าง
นาโนคอมโพสิตใหม่ ผสมแก้ไข )
( 40 × 10 − 3 G L − 1 ) และปลาระงับ ( 4.0 × 10 − 3 G L − 1 )
ที่ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละโซลูชั่นรวมทั้งเดาโนรูบิซิน
( 3 × 10 − 4 M ) 5 μลิตรผสมสารละลาย ( 5 นาทีหลังจากที่
เตรียม ) เป็นเงินสดของบนแก้ว ( แล้ว
ติดกาวบนแผ่นดิสก์เหล็ก ) และบ่ม 5 นาทีหลังจาก
ตัวอย่างแห้งภายใต้ไนโตรเจนสตรีม , ภาพแสดง
อย่างโหมดโดยใช้นาโนสโคปสามารถมัลติโหมด AFM
( เครื่องดิจิตอล ซานตา บาร์บารา แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา ) ในอากาศที่อุณหภูมิในห้องปฏิบัติการ
.
วัฒนธรรมเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาว k562 เซลล์เพาะเลี้ยงในขวดใน RPMI 1640 ปานกลาง

( gibco ) เสริมด้วยเซรั่มของลูกวัว ( 10% FCS , Sigma ) , อาการ ( 100 หมู่ มล − 1 )
( 100 มล. และ streptomycin มู− 1 ) ที่อุณหภูมิ 37 ◦ C ใน humidified
บรรยากาศที่มีคาร์บอนไดออกไซด์ 5% หลังจากนั้นเดาโนรูบิซิน
และผสมสารละลายของ TiO2 และ PLA ระงับ
ถูกส่งเข้าไปในเซลล์ที่บ่มที่
ความเข้มข้นสุดท้ายเดาโนรูบิซินคือ 4.8 × 10 − 6 m
) และปลาที่ถูกระงับ 4.0 × 10 − 3 G L − 1 .
วัฒนธรรมถูกตรวจพบในเลเซอร์สแกนกล้องจุลทรรศน์ด้วย
( lscm ) ( Leica TCS SP2 , เยอรมนี )
หลังจากเพาะเซลล์สำหรับ 10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง ( 2
20 ±◦ C ) ในการทดลองควบคุมเพียงเดาโนรูบิซิน
ถูกฉีดเข้าไป การเพาะเลี้ยงเซลล์เตรียมสดลงในจานแก้วสะอาดอย่างเคร่งครัด

ทันทีก่อนการวัด ไทเทเนียมแสงเรืองเป็น n
480