In one รูปลักษณะ of the การประดิษฐ์

In one รูปลักษณะ of the การประดิษฐ์นี้, such mutations are in one or more of positions
selected from 239, 332 and 330 (IgG1), or the equivalent positions in other IgG ไอโซไทป์s. Examples of suitable mutations are S239D and I332E and A330L. In one รูปลักษณะ, the โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน of the การประดิษฐ์ herein described is mutated at positions 239 and 332, for example S239D
and I332E or in a further รูปลักษณะ it is mutated at three or more positions selected from 239 35 and 332 and 330, for example S239D and I332E and A330L. (EU index numbering).
In one รูปลักษณะ of the การประดิษฐ์นี้, there is provided an โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน ซึ่ง ประกอบรวมด้วย a chimeric สายหนัก บิบิคงที่ for example an antigen binding protein

ซึ่ง ประกอบรวมด้วย a chimeric สายหนัก บิบิคงที่ with at least one CH2 domain from IgG3 such that the โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน has enhanced เอฟเฟคเตอร์ function, for example โดยที่ it has enhanced ADCC or enhanced CDC, or enhanced ADCC and CDC functions. In one such รูปลักษณะ, the โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน may ประกอบรวมด้วย one CH2 domain from IgG3 or both CH2 domains may be
5 from IgG3.
Also provided is a method of producing an โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน according to the การประดิษฐ์ ซึ่ง ประกอบรวมด้วย the steps of:
a) culturing a เซลล์ โฮสต์ ชนิดรีคอมบิแนนต์ ซึ่ง ประกอบรวมด้วย an เวกเตอร์ การแสดงออก ซึ่ง ประกอบรวมด้วย an isolated
nucleic acid as described herein โดยที่ the เวกเตอร์ การแสดงออก ประกอบรวมด้วยs a nucleic acid sequence 10 encoding a Fc region containing domains derived from human germline IgG1 and IgG3 sequences;
and
b) recovering the โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน.
Such methods for the production of โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน can be performed, for example,
using the COMPLEGENT" technology system available from BioWa, Inc. (La Jolla, CA, USA) and 15 Kyowa Hakko Kogyo (now, Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd.) Co., Ltd. in which a เซลล์ โฮสต์ ชนิดรีคอมบิแนนต์
ซึ่ง ประกอบรวมด้วย an เวกเตอร์ การแสดงออก in which a nucleic acid sequence encoding a Fc region containing
domains derived from human germline IgG1 and IgG3 sequences is expressed to produce an
โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน having enhanced complement dependent cytotoxicity (CDC) activity that is
increased relative to an otherwise identical โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน lacking such a chimeric Fc 20 domain. Aspects of the COMPLEGENTTm technology system are described in W02007011041 and
US20070148165 each of which are incorporated herein by reference. In an alternative รูปลักษณะ
CDC activity may be increased by introducing sequence specific mutations into the Fc region of an
IgG chain. Those of ordinary skill in the art will also recognize other appropriate systems.
In an alternative รูปลักษณะ of the การประดิษฐ์นี้, there is provided an antigen binding 25 protein ซึ่ง ประกอบรวมด้วย a สายหนัก บิบิคงที่ with an altered ไกลโคซิเลชัน profile such that the
โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน has enhanced เอฟเฟคเตอร์ function. For example, โดยที่ the antigen binding
protein has enhanced ADCC or enhanced CDC or โดยที่ it has both enhanced ADCC and CDC
เอฟเฟคเตอร์ function. Examples of suitable methodologies to produce โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน with an
altered ไกลโคซิเลชัน profile are described in W02003011878, W02006014679 and EP1229125, all of 30 which can be applied to the โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน of the การประดิษฐ์นี้.
The การประดิษฐ์นี้ also provides a method for the production of an โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน according to the การประดิษฐ์ ซึ่ง ประกอบรวมด้วย the steps of:
a) culturing a เซลล์ โฮสต์ ชนิดรีคอมบิแนนต์ ซึ่ง ประกอบรวมด้วย an เวกเตอร์ การแสดงออก ซึ่ง ประกอบรวมด้วย the isolated
nucleic acid as described herein under conditions suitable to express the โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน, 35 โดยที่ the FUT8 gene encoding alpha-1,6-ฟิวโคซิล ทรานสเฟอเรส has been inactivated in the
เซลล์ โฮสต์ ชนิดรีคอมบิแนนต์; and
b) isolating the โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน produced by the เซลล์ โฮสต์ ชนิดรีคอมบิแนนต์.


The การประดิษฐ์นี้ also provides a method for the production of an โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน according to the การประดิษฐ์ ซึ่ง ประกอบรวมด้วย the steps of:
a) expressing an โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน according to the การประดิษฐ์ in a เซลล์ โฮสต์ ชนิดรีคอมบิแนนต์, โดยที่ the FUT8 gene encoding alpha-1,6-ฟิวโคซิล ทรานสเฟอเรส is been inactivated in the
5 เซลล์ โฮสต์ ชนิดรีคอมบิแนนต์; and
b) isolating the โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน produced by the เซลล์ โฮสต์ ชนิดรีคอมบิแนนต์.
Such methods for the production of โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน can be performed, for example,
using the POTELLIGENTTm technology system available from BioWa, Inc. (La Jolla, CA, USA) in which
CHOK1SV cells lacking a functional copy of the FUT8 gene produce โมโนโคลนอล antibodies having 10 enhanced antibody dependent cell mediated cytotoxicity (ADCC) activity that is increased relative to
an identical โมโนโคลนอล antibody produced in a cell with a functional FUT8 gene. Aspects of the
POTELLIGENTTM technology system are described in US7214775, US6946292, W00061739 and
W00231240 all of which are incorporated herein by reference. Those of ordinary skill in the art will
also recognize other appropriate systems.
15 ในลักษณะ ต่อไป, the การประดิษฐ์นี้ provides non-fucosylated antibodies. References
herein to "non-fucosylated" or "afucosylated" antibodies refer to antibodies that harbour a tri-
mannosyl core structure of complex-type N-glycans of Fc without fucose เรซิดิว. Non-fucosylated or afucosylated antibodies of the การประดิษฐ์นี้ do not ประกอบรวมด้วย fucose on the core carbohydrate
structure attached to Asn297. These glycoengineered antibodies that lack core fucose เรซิดิว from 20 the Fc N-glycans may exhibit stronger ADCC than fucosylated equivalents due to enhancement of
FcyRIIIa binding capacity.
It will be apparent to those skilled in the art that such modifications may not only be used
alone but may be used in combination with each other in order to further enhance เอฟเฟคเตอร์ function.
In one such รูปลักษณะ of the การประดิษฐ์นี้ there is provided an antigen binding 25 protein ซึ่ง ประกอบรวมด้วย a สายหนัก บิบิคงที่ ซึ่ง ประกอบรวมด้วย a mutated and chimeric heavy
chain บิบิคงที่. For example, โดยที่ an โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน ซึ่ง ประกอบรวมด้วย at least one CH2 domain from human IgG3 and one CH2 domain from human IgG1, โดยที่ the IgG1 CH2 domain has one or more mutations at positions selected from 239 and 332 and 330 (for example
the mutations may be selected from S239D and I332E and A330L) such that the antigen binding 30 protein has enhanced เอฟเฟคเตอร์ function. In this context, enhanced เอฟเฟคเตอร์ function may equate to,
for example, having enhanced ADCC or enhanced CDC, for example โดยที่ it has enhanced ADCC
and enhanced CDC. In one รูปลักษณะ the IgG1 CH2 domain has the mutations S239D and 1332E.
In an alternative รูปลักษณะ of the การประดิษฐ์นี้ there is provided an antigen binding
protein ซึ่ง ประกอบรวมด้วย a chimeric สายหนัก บิบิคงที่ and which has an altered ไกลโคซิเลชัน 35 profile. In one such รูปลักษณะ the สายหนัก บิบิคงที่ ประกอบรวมด้วยs at least one CH2
domain from IgG3 and one CH2 domain from IgG1 and has an altered ไกลโคซิเลชัน profile such that
the ratio of fucose to mannose is 0.8:3 or less, for example โดยที่ the โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน is defucosylated so that said โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน has an enhanced เอฟเฟคเตอร์ function in comparison with an equivalent โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน with an อิมมูโนโกลบูลิน สายหนัก บิบิคงที่ lacking said mutations and altered ไกลโคซิเลชัน profile, for example โดยที่ it has one or more of the following functions, enhanced ADCC or enhanced CDC, for example โดยที่ it has enhanced
5 ADCC and enhanced CDC.
In an alternative รูปลักษณะ the โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน has at least one human IgG3 CH2 domain and at least one สายหนัก constant domain from human IgG1 โดยที่ both IgG CH2 domains are mutated in accordance with the limitations described herein.
In one aspect of the การประดิษฐ์ there is provided a method of producing an antigen binding 10 protein according to the การประดิษฐ์ described herein ซึ่ง ประกอบรวมด้วย the steps of:
a) culturing a เซลล์ โฮสต์ ชนิด

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในรูปลักษณะหนึ่งของการการประดิษฐ์นี้ กลายพันธุ์ดังกล่าวอยู่ในตำแหน่งอย่างน้อยหนึ่งเลือกจาก 239, 332 และ 330 (IgG1), หรือตำแหน่งเทียบเท่าใน IgG ไอโซไทป์s อื่น ๆ ตัวอย่างของการกลายพันธุ์ที่เหมาะสมคือ S239D และ I332E และ A330L ในรูปลักษณะหนึ่ง แอนติเจนยึดเกาะโปรตีนของการประดิษฐ์อธิบายไว้นี้จะกลายที่ตำแหน่ง 239 และ 332, S239D เช่นและ I332E หรือในรูปลักษณะต่อไป มันจะกลายที่สาม หรือมากกว่าตำแหน่งเลือก 239 35 332 และ 330 เช่น S239D และ I332E และ A330L (EU ดัชนีเลข)ในรูปลักษณะหนึ่งของการการประดิษฐ์นี้ มีให้เป็นโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนซึ่งประกอบรวมด้วยบิบิคงที่ chimeric สายหนักเช่นการตรวจหารวมโปรตีน ซึ่งประกอบรวมด้วยบิบิคงที่ chimeric สายหนักที่ มีโดเมน CH2 น้อยจาก IgG3 เช่นที่โปรตีนยึดเกาะแอนติเจนได้เพิ่มฟังก์ชันเอฟเฟคเตอร์ เช่นโดยที่จะมีเพิ่ม ADCC เพิ่ม CDC หรือเพิ่มฟังก์ชัน ADCC และ CDC ในรูปลักษณะเช่นหนึ่ง โปรตีนยึดเกาะแอนติเจนอาจประกอบรวมด้วยหนึ่ง CH2 โดเมนจาก IgG3 หรืออาจจะทั้งสองโด CH25 จาก IgG3ให้เป็นวิธีการผลิตแอนติเจนยึดเกาะมีโปรตีนตามการประดิษฐ์ซึ่งประกอบรวมด้วยขั้นตอนของ:) culturing เป็นเซลล์โฮสต์ชนิดรีคอมบิแนนต์ซึ่งประกอบรวมด้วยเป็นเวกเตอร์การแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วยการแยก กรดนิวคลีอิกตามนี้โดยที่ ประกอบรวมด้วยs การแสดงออกเวกเตอร์ที่ลำดับกรดนิวคลีอิก 10 รหัสภูมิภาค Fc ที่ประกอบด้วยโดเมนมาจากมนุษย์ germline IgG1 และลำดับ IgG3 และขกู้โปรตีนยึดเกาะแอนติเจนวิธีดังกล่าวสำหรับการผลิตโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนสามารถดำเนินการได้ เช่น COMPLEGENT ที่ใช้"ระบบเทคโนโลยีจาก BioWa, Inc. (La Jolla, CA, USA) และ 15 Kyowa โคเกียวบริษัทฮากโก้ (ตอนนี้ Kyowa บริษัทฮากโก้ลาน Co., Ltd.) Co., Ltd. ซึ่งเป็นเซลล์โฮสต์ชนิดรีคอมบิแนนต์ ประกอบรวมด้วยซึ่งการแสดงออกเป็นเวกเตอร์ซึ่งลำดับกรดนิวคลีอิกเข้าเป็น Fc ภูมิภาคประกอบด้วย แสดงโดเมนที่มาจากมนุษย์ germline IgG1 และ IgG3 ลำดับการผลิตการ โปรตีนแอนติเจนยึดเกาะที่มีเพิ่มกิจกรรมขึ้น cytotoxicity (CDC) ส่วนเติมเต็มที่ เพิ่มขึ้นเมื่อเทียบกับแอนติเจนยึดเกาะโปรตีนเหมือนกันหรือการขาดเช่น chimeric Fc 20 โดเมน อธิบายลักษณะของระบบเทคโนโลยี COMPLEGENTTm ใน W02007011041 และ US20070148165 แต่ละแห่งจะรวมนี้ โดยอ้างอิง ในการรูปลักษณะอื่น ติดต่อกิจกรรมอาจเพิ่มขึ้นตามลำดับกลายพันธุ์เฉพาะในภูมิภาค Fc ของแนะนำตัว IgG โซ่ ของทักษะศิลปะธรรมดาจะรู้จักระบบอื่นที่เหมาะสมในรูปลักษณะการสำรองของการการประดิษฐ์นี้ มีไว้ตรวจหาการผูกประกอบรวมด้วยซึ่งโปรตีน 25 บิบิคงที่สายหนักกับโพรไฟล์ไกลโคซิเลชันเปลี่ยนแปลงเช่นว่านี้ โปรตีนยึดเกาะแอนติเจนได้เพิ่มฟังก์ชันเอฟเฟคเตอร์ ตัวอย่างเช่น โดยที่รวมตรวจหา โปรตีนเพิ่ม ADCC หรือเพิ่ม CDC หรือโดยที่มีเพิ่ม ADCC และ CDC เอฟเฟคเตอร์ฟังก์ชัน ตัวอย่างของวิธีที่เหมาะในการผลิตโปรตีนแอนติเจนยึดเกาะกับการ ไกลโคซิเลชันเปลี่ยนแปลงส่วนกำหนดค่าไว้ใน W02003011878, W02006014679 และ EP1229125 ทั้งหมด 30 ซึ่งสามารถใช้กับแอนติเจนยึดเกาะโปรตีนของการประดิษฐ์นี้ยังการประดิษฐ์นี้มีวิธีการในการผลิตแอนติเจนยึดเกาะมีโปรตีนตามการประดิษฐ์ซึ่งประกอบรวมด้วยขั้นตอนของ:) culturing เป็นเซลล์โฮสต์ชนิดรีคอมบิแนนต์ซึ่งประกอบรวมด้วยเป็นเวกเตอร์การแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วยที่แยก กรดนิวคลีอิกดังที่นี้ภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสมเพื่อแสดงโปรตีนยึดเกาะแอนติเจน ยีนโดยที่ FUT8 35 ที่เข้ารหัสอักษร 1,6 ฟิวโคซิลทรานสเฟอเรสได้ถูกยกเลิกในการ เซลล์โฮสต์ชนิดรีคอมบิแนนต์ และขแยกโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนผลิต โดยเซลล์โฮสต์ชนิดรีคอมบิแนนต์ ยังการประดิษฐ์นี้มีวิธีการในการผลิตแอนติเจนยึดเกาะมีโปรตีนตามการประดิษฐ์ซึ่งประกอบรวมด้วยขั้นตอนของ:a) แสดงเป็นแอนติเจนยึดเกาะโปรตีนตามการประดิษฐ์ในชนิดรีคอมบิแนนต์เป็นเซลล์โฮสต์ โดยที่ยีน FUT8 ทรานสเฟอเรสอัลฟา-1,6-ฟิวโคซิลการเข้ารหัสจะถูกยกเลิกในการ5 เซลล์ โฮสต์ ชนิดรีคอมบิแนนต์; andb) isolating the โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน produced by the เซลล์ โฮสต์ ชนิดรีคอมบิแนนต์.Such methods for the production of โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน can be performed, for example, using the POTELLIGENTTm technology system available from BioWa, Inc. (La Jolla, CA, USA) in which CHOK1SV cells lacking a functional copy of the FUT8 gene produce โมโนโคลนอล antibodies having 10 enhanced antibody dependent cell mediated cytotoxicity (ADCC) activity that is increased relative to an identical โมโนโคลนอล antibody produced in a cell with a functional FUT8 gene. Aspects of the POTELLIGENTTM technology system are described in US7214775, US6946292, W00061739 and W00231240 all of which are incorporated herein by reference. Those of ordinary skill in the art will also recognize other appropriate systems.15 ในลักษณะ ต่อไป, the การประดิษฐ์นี้ provides non-fucosylated antibodies. Referencesherein to "non-fucosylated" or "afucosylated" antibodies refer to antibodies that harbour a tri-mannosyl core structure of complex-type N-glycans of Fc without fucose เรซิดิว. Non-fucosylated or afucosylated antibodies of the การประดิษฐ์นี้ do not ประกอบรวมด้วย fucose on the core carbohydratestructure attached to Asn297. These glycoengineered antibodies that lack core fucose เรซิดิว from 20 the Fc N-glycans may exhibit stronger ADCC than fucosylated equivalents due to enhancement of FcyRIIIa binding capacity.It will be apparent to those skilled in the art that such modifications may not only be used alone but may be used in combination with each other in order to further enhance เอฟเฟคเตอร์ function. In one such รูปลักษณะ of the การประดิษฐ์นี้ there is provided an antigen binding 25 protein ซึ่ง ประกอบรวมด้วย a สายหนัก บิบิคงที่ ซึ่ง ประกอบรวมด้วย a mutated and chimeric heavychain บิบิคงที่. For example, โดยที่ an โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน ซึ่ง ประกอบรวมด้วย at least one CH2 domain from human IgG3 and one CH2 domain from human IgG1, โดยที่ the IgG1 CH2 domain has one or more mutations at positions selected from 239 and 332 and 330 (for examplethe mutations may be selected from S239D and I332E and A330L) such that the antigen binding 30 protein has enhanced เอฟเฟคเตอร์ function. In this context, enhanced เอฟเฟคเตอร์ function may equate to, for example, having enhanced ADCC or enhanced CDC, for example โดยที่ it has enhanced ADCC and enhanced CDC. In one รูปลักษณะ the IgG1 CH2 domain has the mutations S239D and 1332E.In an alternative รูปลักษณะ of the การประดิษฐ์นี้ there is provided an antigen binding protein ซึ่ง ประกอบรวมด้วย a chimeric สายหนัก บิบิคงที่ and which has an altered ไกลโคซิเลชัน 35 profile. In one such รูปลักษณะ the สายหนัก บิบิคงที่ ประกอบรวมด้วยs at least one CH2 domain from IgG3 and one CH2 domain from IgG1 and has an altered ไกลโคซิเลชัน profile such that the ratio of fucose to mannose is 0.8:3 or less, for example โดยที่ the โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน is defucosylated so that said โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน has an enhanced เอฟเฟคเตอร์ function in comparison with an equivalent โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน with an อิมมูโนโกลบูลิน สายหนัก บิบิคงที่ lacking said mutations and altered ไกลโคซิเลชัน profile, for example โดยที่ it has one or more of the following functions, enhanced ADCC or enhanced CDC, for example โดยที่ it has enhanced5 ADCC and enhanced CDC.
In an alternative รูปลักษณะ the โปรตีน ยึดเกาะ แอนติเจน has at least one human IgG3 CH2 domain and at least one สายหนัก constant domain from human IgG1 โดยที่ both IgG CH2 domains are mutated in accordance with the limitations described herein.
In one aspect of the การประดิษฐ์ there is provided a method of producing an antigen binding 10 protein according to the การประดิษฐ์ described herein ซึ่ง ประกอบรวมด้วย the steps of:
a) culturing a เซลล์ โฮสต์ ชนิด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หนึ่งในรูปลักษณะของการประดิษฐ์นี้กลายพันธุ์ดังกล่าวในหนึ่งหรือมากกว่าของตำแหน่งการคัดเลือกจาก 239, 332 และ 330 (IgG1) หรือตำแหน่งเทียบเท่า IgG อื่น ๆ ไอโซไทป์ s
ตัวอย่างของการกลายพันธุ์ที่เหมาะสมและมี S239D I332E และ A330L หนึ่งในรูปลักษณะที่โปรตีนยึดเกาะแอนติเจนของการประดิษฐ์ที่อธิบายไว้ในที่นี้คือการกลายพันธุ์ที่ตำแหน่ง 239 และ 332 เช่น S239D
และ I332E หรือในอีกรูปลักษณะที่มันจะกลายพันธุ์ที่สามหรือมากกว่าตำแหน่งที่คัดเลือกจาก 239 35 และ 332 และ 330 เช่น S239D และ I332E และ A330L (เลขดัชนีอียู). หนึ่งในรูปลักษณะของการประดิษฐ์นี้มีการให้โปรตีนยึดเกาะแอนติเจนซึ่งประกอบรวมด้วยลูกผสมสายหนักบิบิคงที่เช่นแอนติเจนโปรตีนซึ่งประกอบรวมด้วยลูกผสมสายหนักบิบิคงที่อย่างน้อยหนึ่งโดเมน CH2 จาก IgG3 เช่นที่โปรตีนยึดเกาะแอนติเจนได้เพิ่มเอฟเฟคเตอร์ฟังก์ชั่นเช่นโดยที่จะมีการเพิ่มขึ้นหรือเพิ่มขึ้น ADCC CDC หรือเพิ่ม ADCC และฟังก์ชัน CDC ในหนึ่งเช่นรูปลักษณะที่โปรตีนยึดเกาะแอนติเจนอาจประกอบรวมด้วยหนึ่งโดเมน CH2 จาก IgG3 หรือทั้งสองโดเมน CH2 อาจจะ5 จาก IgG3. นอกจากนี้ยังเป็นวิธีการของการผลิตโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนตามการประดิษฐ์ซึ่งประกอบรวม ด้วยขั้นตอนดังนี้ก) การเพาะเลี้ยงเซลล์โฮสต์ชนิดรีคอมบิแนนต์ซึ่งประกอบรวมด้วยเวกเตอร์การแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วยแยกกรดนิวคลีอิกตามที่อธิบายไว้ในเอกสารฉบับนี้โดยที่เวกเตอร์การแสดงออกประกอบรวมด้วยสานิวคลีอิกลำดับกรด 10 เข้ารหัสภูมิภาค Fc ที่มีโดเมนที่ได้มาจาก IgG1 germline มนุษย์และลำดับ IgG3; และข) การกู้คืนโปรตีนยึดเกาะแอนติเจน. วิธีการดังกล่าวในการผลิตโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนสามารถดำเนินการเช่นการใช้ COMPLEGENT "เทคโนโลยี ระบบที่มีอยู่จากไบโอว่าอิงค์ (La Jolla, CA, USA) และ 15 Kyowa Hakko Kogyo (ตอนนี้ Kyowa Hakko Kirin จำกัด ) Co. , Ltd. ซึ่งเป็นโฮสต์ชนิดเซลล์รีคอมบิแนนต์ซึ่งประกอบรวมด้วยเวกเตอร์การแสดงออกซึ่งในลำดับกรดนิวคลีอิกเข้ารหัสภูมิภาค Fc ที่มีโดเมนที่ได้มาจากIgG1 germline มนุษย์และลำดับ IgG3 จะแสดงในการผลิตโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนที่มีการเพิ่มขึ้นสมบูรณ์ขึ้นอยู่กับความเป็นพิษ(CDC) กิจกรรมที่เพิ่มขึ้นเมื่อเทียบไปที่อื่นเหมือนกันโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนขาดเช่นลูกผสมโดเมน Fc 20 ลักษณะของระบบเทคโนโลยี COMPLEGENTTm มีการอธิบายไว้ใน W02007011041 และUS20070148165 แต่ละที่มีการรวบรวมไว้ในที่นี้โดยการอ้างอิง ในทางเลือกรูปลักษณะกิจกรรม CDC อาจจะเพิ่มขึ้นโดยการแนะนำการกลายพันธุ์เฉพาะลำดับที่เข้ามาในภูมิภาค Fc ของห่วงโซ่IgG ผู้ที่มีทักษะสามัญในศิลปะยังจะรับรู้ระบบอื่น ๆ ที่เหมาะสม. ในทางเลือกรูปลักษณะของการประดิษฐ์นี้มีการให้สารที่มีผลผูกพัน 25 โปรตีนซึ่งประกอบรวมด้วยสายหนักบิบิคงที่ที่มีการเปลี่ยนแปลงไกลโคซิ เลชันรายละเอียดดังกล่าวว่าโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนได้เพิ่มเอฟเฟคเตอร์ฟังก์ชั่น ตัวอย่างเช่นโดยที่แอนติเจนผูกพันโปรตีนได้เพิ่ม ADCC หรือ CDC หรือเพิ่มขึ้นโดยที่จะได้ ADCC ทั้งเพิ่มขึ้นและ CDC เอฟเฟคเตอร์ฟังก์ชั่น ตัวอย่างของวิธีการที่เหมาะสมในการผลิตโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนที่มีการเปลี่ยนแปลงไกลโคซิเลชันรายละเอียดอธิบายไว้ใน W02003011878, W02006014679 และ EP1229125 ทั้งหมด 30 ซึ่งสามารถนำไปใช้กับโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนของการประดิษฐ์นี้. การประดิษฐ์ นี้ยังมีวิธีการในการผลิตของโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนตามการประดิษฐ์ซึ่งประกอบรวมด้วยขั้นตอนดังนี้ก) การเพาะเลี้ยงเซลล์โฮสต์ชนิดรีคอมบิแนนต์ซึ่งประกอบรวมด้วยเวกเตอร์การแสดงออกซึ่ง ประกอบรวมด้วยโดดเดี่ยวกรดนิวคลีอิกตามที่อธิบายไว้ในเอกสารฉบับนี้ภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสมในการแสดงความโปรตีนยึดเกาะแอนติเจน35 โดยที่การเข้ารหัสยีน FUT8 อัลฟา 1,6- ฟิวโคซิลทรานสเฟอเรสได้รับการใช้งานในเซลล์โฮสต์ชนิดรีคอมบิแนนต์; และข) การแยกโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนที่ผลิตโดยเซลล์โฮสต์ชนิดรีคอมบิแนนต์. การประดิษฐ์นี้นอกจากนี้ยังมีวิธีการในการผลิตของโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนตามการประดิษฐ์ซึ่งประกอบรวมด้วยขั้นตอนที่ ของ: ก) แสดงความโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนตามการประดิษฐ์ในเซลล์โฮสต์ชนิดรีคอมบิแนนต์, โดยที่การเข้ารหัสยีน FUT8 อัลฟา 1,6- ฟิวโคซิลทรานสเฟอเร สจะถูกยกเลิกใน5 เซลล์โฮสต์ชนิดรีคอมบิแนนต์; และข) การแยกโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนที่ผลิตโดยเซลล์โฮสต์ชนิดรีคอมบิแนนต์. วิธีการดังกล่าวสำหรับการผลิตโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนสามารถดำเนินการยกตัวอย่างเช่นการใช้ระบบเทคโนโลยี POTELLIGENTTm ได้จากไบโอว่า, Inc (La Jolla, CA, USA) ซึ่งเซลล์CHOK1SV ขาดสำเนาการทำงานของแอนติบอดีโมโนผลิตยีน FUT8 โคลนอลที่มีแอนติบอดี้ที่เพิ่มขึ้น 10 เซลล์ขึ้นอยู่กับพิษพึ่ง (ADCC) กิจกรรมที่จะเพิ่มขึ้นเมื่อเทียบกับเหมือนโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่ผลิตในเซลล์ที่มียีนที่ทำงาน FUT8 ด้านของระบบเทคโนโลยี POTELLIGENTTM อธิบายไว้ใน US7214775, US6946292, W00061739 และ W00231240 ซึ่งทั้งหมดนี้จะนำมารวมไว้โดยอ้างอิง ผู้ที่มีทักษะสามัญในศิลปะจะยังตระหนักระบบอื่น ๆ ที่เหมาะสม. 15 ในลักษณะต่อไปนี้การประดิษฐ์นี้มีแอนติบอดี้ที่ไม่ fucosylated อ้างอิงในเอกสารฉบับนี้เป็น "ที่ไม่ fucosylated" หรือ "afucosylated" หมายถึงแอนติบอดีแอนติบอดีที่ท่าเรือไตรโครงสร้างหลักmannosyl ซับซ้อนชนิด N-glycans ของ Fc โดยไม่ต้อง fucose เรซิดิว แอนติบอดี้ที่ไม่ใช่ fucosylated หรือ afucosylated ของการประดิษฐ์นี้ทำไม่ได้ประกอบรวมด้วย fucose ในคาร์โบไฮเดรตหลักโครงสร้างที่แนบมากับAsn297 แอนติบอดีเหล่านี้ glycoengineered ที่ขาด fucose หลักเรซิดิวจาก 20 Fc N-glycans อาจแสดง ADCC แข็งแกร่งกว่าเทียบเท่า fucosylated เนื่องจากการเพิ่มประสิทธิภาพของกำลังการผลิตที่มีผลผูกพันFcyRIIIa. มันจะเป็นที่ชัดเจนให้กับผู้ที่มีฝีมือในงานศิลปะที่มีการปรับเปลี่ยนดังกล่าวอาจไม่เพียง แต่จะ ใช้เพียงอย่างเดียวแต่อาจจะถูกใช้ในการรวมกันกับแต่ละอื่น ๆ เพื่อส่งเสริมเอฟเฟคเตอร์ฟังก์ชั่น. หนึ่งในเช่นรูปลักษณะของการประดิษฐ์นี้มีให้แอนติเจนผูกพัน 25 โปรตีนซึ่งประกอบรวมด้วยสายหนักบิบิ คงที่ซึ่งประกอบรวมด้วยหนักกลายพันธุ์และลูกผสมห่วงโซ่บิบิคงที่ ตัวอย่างเช่นโดยที่โปรตีนยึดเกาะแอนติเจนซึ่งประกอบรวมด้วยอย่างน้อยหนึ่งโดเมน CH2 จาก IgG3 มนุษย์และเป็นหนึ่งในโดเมน CH2 จาก IgG1 มนุษย์โดยที่โดเมน IgG1 CH2 มีหนึ่งหรือมากกว่าการกลายพันธุ์ที่ตำแหน่งการคัดเลือกจาก 239 และ 332 และ 330 (ตัวอย่างเช่นการกลายพันธุ์อาจจะเลือกจากS239D และ I332E และ A330L) เช่นว่าแอนติเจนผูกพัน 30 โปรตีนได้เพิ่มเอฟเฟคเตอร์ฟังก์ชั่น ในบริบทนี้เพิ่มเอฟเฟคเตอร์ฟังก์ชั่นอาจจะถือเอาการ, ตัวอย่างเช่นมีการเพิ่มขึ้นหรือเพิ่มขึ้น ADCC CDC เช่นโดยที่มันได้เพิ่ม ADCC และ CDC เพิ่มขึ้น หนึ่งในรูปลักษณะโดเมน IgG1 CH2 มีการกลายพันธุ์ S239D และ 1332E. ในทางเลือกรูปลักษณะของการประดิษฐ์นี้มีการให้สารที่มีผลผูกพันโปรตีนซึ่งประกอบรวมด้วยลูกผสมสายหนักบิบิคงที่และซึ่งมีการเปลี่ยนแปลงไกลโคซิเลชัน 35 รายละเอียด ในหนึ่งเช่นรูปลักษณะสายหนักบิบิคงที่ประกอบรวมด้วย s อย่างน้อยหนึ่ง CH2 โดเมนจากโดเมน IgG3 และ CH2 จาก IgG1 และมีการเปลี่ยนแปลงไกลโคซิเลชันรายละเอียดดังกล่าวว่าอัตราส่วนของfucose เพื่อ mannose คือ 0.8: 3 หรือน้อยกว่าตัวอย่างเช่นโดยที่โปรตีนยึดเกาะแอนติเจนมี defucosylated เพื่อให้กล่าวว่าโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนมีเพิ่มเอฟเฟคเตอร์ฟังก์ชั่นในการเปรียบเทียบกับเทียบเท่าโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนที่มีอิมมูโนโกลบูลิ นสายหนักบิบิคงที่ขาดการกลายพันธุ์กล่าวและเปลี่ยนแปลงไกลโคซิเลชันรายละเอียดเช่นโดยที่จะมีหนึ่งหรือมากกว่าของฟังก์ชั่นต่อไปนี้ ADCC ที่เพิ่มขึ้นหรือเพิ่ม CDC เช่นโดยที่จะได้เพิ่มขึ้น5 ADCC และที่เพิ่มขึ้น CDC. ในทางเลือกรูปลักษณะโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนมีอย่างน้อยหนึ่งของมนุษย์โดเมน IgG3 CH2 และอย่างน้อยหนึ่งสายหนักโดเมนคงที่จาก IgG1 มนุษย์โดยที่ทั้งสองโดเมน IgG CH2 จะกลายพันธุ์ไปตามข้อ จำกัด ที่อธิบายไว้ในเอกสารฉบับนี้. ในแง่มุมหนึ่ง ของการประดิษฐ์ที่มีการจัดให้มีวิธีการในการผลิตสารที่มีผลผูกพัน 10 โปรตีนตามการประดิษฐ์บรรยายในที่นี้ซึ่งประกอบรวมด้วยขั้นตอนดังนี้ก) เลี้ยงเซลล์โฮสต์ชนิด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในหนึ่งรูปลักษณะของการประดิษฐ์นี้ , การกลายพันธุ์ เช่นในหนึ่งหรือมากกว่าของตำแหน่ง
เลือกจาก 239 , และ 330 ( ( ) หรือเทียบเท่าในตำแหน่งอื่น ๆไอโซไทป์ . ตัวอย่างของการกลายพันธุ์กลุ่มเหมาะสมและมี s239d i332e a330l รูปลักษณะและในหนึ่ง ,การโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนของการประดิษฐ์ในที่นี้อธิบายเป็นกลายพันธุ์ที่ตำแหน่งและ 332 , ตัวอย่างเช่นและ s239d
i332e หรือในรูปลักษณะเพิ่มเติมมันกลายพันธุ์ที่สามหรือมากกว่าตำแหน่งที่เลือกจาก 239 35 และ 330 , s239d และตัวอย่างและ i332e a330l ( EU )
เลข )ในหนึ่งรูปลักษณะของการประดิษฐ์นี้ มีให้โปรตีนยึดเกาะแอนติเจนซึ่งประกอบรวมด้วยเป็นบิบิคงที่สายหนักที่ตัวอย่างเช่นโปรตีนแอนติเจน

ซึ่งประกอบรวมด้วยเป็นบิบิคงที่สายหนักที่อย่างน้อยหนึ่งโดเมน C จาก igg3 เช่นที่โปรตีนยึดเกาะแอนติเจนได้เพิ่มฟังก์ชันเอฟเฟคเตอร์ตัวอย่างเช่นโดยที่มันมีการปรับปรุงหรือเพิ่ม adcc CDC หรือปรับปรุง adcc และฟังก์ชันที่ CDC ในหนึ่งรูปลักษณะเช่นการโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนอาจประกอบรวมด้วยโดเมนหนึ่ง C จาก igg3 หรือทั้ง C โดเมนอาจ
5 จาก igg3 .
ให้ยังเป็นวิธีการผลิต โปรตีนยึดเกาะแอนติเจนตามการการประดิษฐ์ซึ่งประกอบรวมด้วยขั้นตอน :
) การเพาะเลี้ยงเป็นเซลล์โฮสต์ชนิดรีคอมบิแนนต์ซึ่งประกอบรวมด้วยเป็นเวกเตอร์การแสดงออกซึ่ง
ประกอบรวมด้วยโดดเดี่ยวกรดนิวคลีอิกตามที่อธิบายไว้ในที่นี้โดยที่ที่เวกเตอร์การแสดงออกประกอบรวมด้วยเป็นลำดับกรดนิวคลีอิกการเข้ารหัส เอฟซี 10 เขตที่มีโดเมนมาจากเยอร์มไลน์ ( มนุษย์และ igg3 ลำดับ ;

b ) และการกู้คืนโปรตีนยึดเกาะ
แอนติเจน .วิธีการสำหรับผลิตโปรตีนยึดเกาะแอนติเจนสามารถดําเนินการ เช่น การใช้ complegent
" เทคโนโลยีระบบพร้อมใช้งานจากลูกค้า , Inc ( La Jolla , CA , USA ) และ 15 เคียววา คโค โคเกียว ( ตอนนี้เคียววา คโค คิริน จำกัด ( มหาชน ) จำกัด ซึ่งเป็นเซลล์โฮสต์ชนิดรีคอมบิแนนต์