The entomopathogenic fungi Paecilom

The entomopathogenic fungi Paecilomyces fumosoroseus and P. lilacinus have been transformed to resistance to the fungicide benomyl by a polyethylene glycol (PEG)-mediated procedure using a mutant b-tubulin gene from Neurospora crassa carried on plasmid pBT6. Benomyl-resistant transformants of P. lilacinus were obtained that could tolerate greater than 30 µg/ml benomyl and P. fumosoroseus transformants were obtained that could tolerate 20 µg/ml benomyl. Following 5 serial passages of transformants on benomyl-containing media and 5 serial passages on non-selective media, 100% of P. lilacinus transformants were found to be mitotically stable by a conidial germination test. In contrast, only 4 out of 9 transformants of P. fumosoroseus were mitotically stable. Southern blot analysis of genomic DNA from both species suggested that the mechanism of transformation in all transformants was by gene replacement of the b-tubulin allele. Non-homologous vector sequences were not detectable in the genomes of transformants.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Entomopathogenic เชื้อ Paecilomyces fumosoroseus และ P. lilacinus มีการเปลี่ยนแปลงเพื่อความต้านทานต่อสารเคมี benomyl เป็นเอทิลีนไกลคอล (PEG) -ดำเนินการกระบวนสื่อโดยใช้ยีนกลายพันธุ์ b-tubulin จาก Neurospora crassa plasmid pBT6 Transformants ทน Benomyl ของ P. lilacinus ได้รับที่สามารถทนมากกว่า 30 µg/ml benomyl และ P. fumosoroseus transformants ได้รับที่จะยอม benomyl 20 µg/ml 5 ทางเดินประจำของ transformants บนสื่อที่ประกอบด้วย benomyl และ 5 อนุกรมทางเลือกสื่อ 100% ของ P. lilacinus transformants พบ mitotically คงสภาพ โดยการทดสอบการงอก conidial ตรงกันข้าม เพียง 4 จาก 9 transformants ของ P. fumosoroseus มีเสถียร mitotically น้าภาคใต้วิเคราะห์ดีเอ็นเอออกจากทั้งสองสายพันธุ์แนะนำว่า เป็นกลไกของการเปลี่ยนแปลงใน transformants ทั้งหมด โดยการแทนที่ยีนของอัล b tubulin เวกเตอร์ไม่ใช่เซทจะมีลำดับไม่ได้ตรวจพบใน genomes ของ transformants

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แมลงเชื้อรา Paecilomyces fumosoroseus พี lilacinus ได้รับการเปลี่ยนเป็นต้านทานสารกำจัดเชื้อรา benomyl โดย polyethylene glycol (PEG) ขั้นตอนการใช้ -mediated ยีน B-tubulin กลายพันธุ์จาก Neurospora crassa ดำเนินการเกี่ยวกับพลาสมิด pBT6 transformants benomyl ทนพี lilacinus ที่ได้รับว่าสามารถทนมากขึ้นกว่า 30 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร benomyl พี transformants fumosoroseus ที่ได้รับว่าสามารถทน 20 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร benomyl ต่อไปนี้ 5 ทางอนุกรมของ transformants บนสื่อ benomyl ที่มีทางเดินและ 5 อนุกรมบนสื่อไม่ได้รับเลือก 100% ของ P. lilacinus transformants พบว่ามีเสถียรภาพ mitotically โดยการทดสอบการงอกของเชื้อรา ในทางตรงกันข้ามเพียง 4 จาก 9 transformants พี fumosoroseus มีเสถียรภาพ mitotically วิเคราะห์ blot ทางตอนใต้ของดีเอ็นเอจากทั้งสองสายพันธุ์ที่ชี้ให้เห็นว่ากลไกของการเปลี่ยนแปลงใน transformants ทั้งหมดโดยการเปลี่ยนยีนของอัลลีล B-tubulin Non-คล้ายคลึงลำดับเวกเตอร์ไม่ได้ตรวจพบในจีโนมของ transformants

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ส่วนแมลงที่ตายและเชื้อรา Paecilomyces fumosoroseus P . lilacinus ได้ถูกเปลี่ยนเพื่อความต้านทานต่อสารเคมีเบโนมิลด้วย polyethylene glycol ( PEG ) - ผ่านขั้นตอนการ b-tubulin ยีนกลายพันธุ์จากบอด crassa อยู่บนพลาสมิด pbt6 . ทนสารเคมีเบโนมิลพลาสมิดของ P . lilacinus สามารถทนได้มากกว่า 30 µ g / ml และสารเคมีเบโนมิลหน้า fumosoroseus transformants ที่ได้รับที่สามารถทนต่อสารเคมีเบโนมิล 20 µ g / ml . ตามทางเดินของพลาสมิด 5 อนุกรมในเบโนมิลที่มีสื่อและไม่ใช้สื่อข้อความ 5 อนุกรม , 100% ของ P . lilacinus พลาสมิดพบเป็น mitotically มั่นคงโดยการทดสอบความงอกของโคนิเดียของ . ในทางตรงกันข้าม เพียง 4 จาก 9 หน้า fumosoroseus เป็นพลาสมิดของ mitotically มั่นคง การทำ Southern blot analysis ของ genomic DNA จากทั้งสองชนิดพบว่ากลไกของการเปลี่ยนแปลงในพลาสมิดโดยยีนทดแทนของ b-tubulin อัลลีล . ไม่ฟังก์ชันเวกเตอร์ลำดับไม่พบในจีโนมของพลาสมิด .