2.7. Determination of tocols and γ-

2.7. Determination of tocols and γ-oryzanol by RP-HPLC–PDA system
Reverse-phase HPLC was used to determine α-tocopherol, δ-
tocopherol, γ-tocopherol, γ-tocotrienol and γ-oryzanol in bran
colourant by following the method of Gimeno, Castellote, Lamuela-
Ravento, de la Torre-Boronat, and López-Sabater (2001) withmodifications.
A 0.5 g of the colourant sample was dissolved in 5.0 ml of
methanol and mixed with vortex mixer (VELP Scientifica, Europe).
Then the mixture was extracted with a sonicator (50% amplitude,
130 W, 20 kHz Vibra cell) for 5 min. The supernatant was collected
and filtered through a 0.45 μm nylon syringe filter (Whatman, USA)
and then stored in a screwtop vial in a freezer (−25 °C) before analysis.
The HPLC apparatus used was a Shimadzu CL-10 with a 20 μl sample
loop injector and photo diode array (PDA) detector. The sample was
injected through a security guard column (Phenomenex 4 μm, C18,
50 × 4.6 mm) and separated on the C18 column (Phenomenex 4 μm,
C18, 150 × 4.6 mm) at 45 °C. The gradient elution was applied. The mobile
phase solvent used was methanol:water:1-butanol (92:4:4 (%v/v))
at a flow rate of 1.0ml/min for 12 min. After that, themobile phasewas
changed tomethanol:water:1-butanol (92:3:5, (%v/v)) with a flow rate
of 1.5ml/minwithin 25min. The total gradient run timewas 25min, before
returning to the initial condition. The eluent band was monitored
using a UV absorbance detector set at 292 nm for (±)-α-tocopherol,
(+)-δ-tocopherol, (+)-γ-tocopherol and (+)-γ-tocotrienol and at
325 nm for γ-oryzanol (Chen & Bergman, 2005). The results were
expressed as the amount of concentration in a microgram (μg) per
gram (g) of the colourant powder using the standard curve compared
with the retention time of external standards.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.7 การกำหนด tocols และγ-oryzanol ระบบ RP-HPLC-PDAกลับเฟส HPLC ที่ใช้ในการกำหนดด้วยกองทัพ-tocopherol δ-tocopherol γ-tocopherol γ tocotrienol และγ-oryzanol ในรำcolourant ตามวิธีการของ Gimeno, Castellote, Lamuela-Ravento เดอลาทอร์เรคา-Boronat และ López Sabater (2001) withmodificationsG 0.5 ของอย่าง colourant ถูกละลายใน 5.0 ml ของเมทานอล และแบบผสม ด้วยเครื่องผสม vortex (VELP Scientifica ยุโรป)แล้ว ส่วนผสมถูกสกัด ด้วย sonicator (คลื่น 50%130 W เซลล์ Vibra 20 kHz) สำหรับ 5 นาที Supernatant รวบรวมไว้และกรองผ่านตัว 0.45 μm ไนล่อนเข็มกรอง (Whatman สหรัฐอเมริกา)แล้ว เก็บไว้ในคอนแทค screwtop ในตู้เย็น (−25 ° C) ก่อนที่จะวิเคราะห์ใช้เครื่อง HPLC มี CL-สิบ Shimadzu ด้วยตัวอย่าง 20 μlวนรอบหัวฉีดและตรวจจับภาพไดโอดอาร์เรย์ (PDA) ตัวอย่างฉีดผ่านคอลัมน์ยามรักษาความปลอดภัย (Phenomenex 4 μm, C1850 × 4.6 mm) และแยกคอลัมน์ C18 (Phenomenex 4 μmC18, 150 × 4.6 mm) ที่ 45 องศาเซลเซียส Elution ไล่โทนสีถูกนำไปใช้ มือถือขั้นตอนตัวทำละลายที่ใช้คือ เมทานอล: น้ำ: 1-บิวทานอ (92:4:4 (%v/v))ที่อัตราการไหลของ 1.0 ml/min ใน 12 นาที หลังจากนั้น phasewas themobiletomethanol:water:1 การเปลี่ยนแปลง-โนบิวทานอ (92:3:5 (%v/v)) กับอัตราการไหลของ 1.5 ml/minwithin 25 min ไล่ระดับสีทั้งหมดที่เรียกใช้ timewas นาที 25 ก่อนพบเงื่อนไขเริ่มต้น วง eluent ถูกตรวจสอบใช้แบบ UV absorbance จับตั้ง 292 nm สำหรับ (±) -ด้วยกองทัพ-tocopherol(+) -Δ-tocopherol (+) -γ-tocopherol และ (+) -γ-tocotrienol และที่325 nm สำหรับγ-oryzanol (Chen & Bergman, 2005) ผลลัพธ์ได้แสดงเป็นยอดของความเข้มข้นใน microgram (μg) ต่อกรัม (g) ของผง colourant ที่ใช้เส้นโค้งมาตรฐานเปรียบเทียบมีเวลาเก็บข้อมูลภายนอก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.7 . การหาปริมาณแกมมา - โอไรซานอลและโทคอลγโดยๆ–ระบบ
PDA กลับเฟส HPLC ศึกษาแอลฟาโทโคเฟอรอล δ , -
รอล γรอล และโทโคไตรอีนγγ - แกมมา - โอไรซานอลในน้ำมันรำข้าว
คัลเลอร์แรนท์ ตามวิธีของ gimeno castellote lamuela -
, , ravento de la Torre boronat , และ โลเปซ sabater ( 2001 ) withmodifications .
0.5 กรัมของตัวอย่างคัลเลอร์แรนท์ ละลายใน 5.0 มิลลิลิตร
เมทานอลผสมผสมกับ Vortex ( velp scientifica ยุโรป ) .
แล้วผสมส่วนผสมที่สกัดด้วยเครื่องเขย่าแบบเสียง ( 50% ขนาด 130 W ,
20 kHz vibra เซลล์ ) 5 นาทีนำรวบรวม
และกรองผ่านตัวกรองไนลอน 0.45 μมเข็ม ( whatman , USA )
แล้วเก็บไว้ใน เป็น screwtop ขวดในตู้เย็น ( − 25 ° C )
ก่อนการวิเคราะห์พบเครื่องมือที่ใช้เป็น cl-10 Shimadzu มี 20 μ l ตัวอย่าง
วงฉีดและเรย์ไดโอดภาพถ่าย ( PDA ) เครื่องตรวจจับ ตัวอย่าง
ฉีดผ่านยามรักษาความปลอดภัยคอลัมน์ ( phenomenex 4 μ M , c18
, 50 × 4.6 มม. ) และแยกในคอลัมน์ C18 phenomenex 4 μ M ,
c18 150 × 4.6 มิลลิเมตร ) 45 ° C ( คือการใช้ โทรศัพท์มือถือ
เฟสตัวทำละลายเมทานอล : น้ำ : ใช้บิวทานอล ( 92:4 :4 ( % v / v )
ที่อัตราการไหลของ 1.0ml/min 12 นาที หลังจากนั้น themobile phasewas
เปลี่ยน tomethanol : น้ำ : บิวทานอล ( 92:3:5 ( % v / v ) ด้วยอัตราการไหลของ 1.5ml/minwithin
25min ทั้งหมด ไล่ระดับ วิ่ง timewas 25min ก่อนที่
กลับไปเงื่อนไขเริ่มต้น วงนี้ถูกตรวจสอบโดยใช้เครื่อง UV ค่า
ตั้ง 292 nm ( ± ) - แอลฟาโทโคเฟอรอล ( -
) , δรอล( ) - ( ) - γรอล และโทโคไทรอีน และที่γ -
325 nm สำหรับγแกมมา - โอไรซานอล ( เฉิน& เบิร์กแมน , 2005 ) ผลการวิจัยพบว่า เมื่อปริมาณความเข้มข้น
ในไมโครกรัม ( μกรัม ) ต่อ
กรัม ( g ) ของแป้ง คัลเลอร์แรนท์ ใช้เส้นโค้งมาตรฐานเมื่อเทียบกับการเก็บเวลา
มาตรฐานภายนอก