2. Materials and methods2.1. Plasom

2. Materials and methods
2.1. Plasom preparation
The original formula of Plasomconsists of 1 kg fi sh(Oreochromis
niloticus), 10 0 g table salt and 20 0 g sugar. The mixtures were
transferred to a bucket and covered with polyethylene fi lm. The
containers were incubated at room temperature (30 2

C) for 8
days ( Fig.1). During fermentation, each bucket was taken for LAB
isolation every two days. Prior to isolation the selected sample was
blended and used as a composite sample.
Plasom production processing
Raw material
Fish
Size selected and Cut
Washed
Fish+Ingredients
Fermentation
Mixed with roasted rice
Packed
Distribution
Ingredients
(Salt + Sugar and Roasted rice)
Fig. 1. Plasomproduction processing. Hwanhlem et al.


2.2. Isolation of L AB
Twenty- five grams of the sample were added to 225 ml of sterile
0.05 M potassium phosphate buffer pH 7.2 containing 1% NaCl (PBS)
and shaken for 5 min. Appropriate decimal dilutions were prepared
in PBS buffer and poured into a sterile petri dish on de Man Rogosa
and Sharpe (MRS, Labscan Asia Co., Ltd., Thailand) agar containing
0.3% (w/v) CaCO
3
(Maragkoudakis et al., 20 0 6). This was subjected
to incubation at 37

C for 24 h. Bacterial colonies that exhibited
clear zone on the plates were individually picked and streaked on
MRS agar containing 0.3% (w/v) CaCO3
. This procedure was
repeated in order to purify the isolates. Each of the isolates was fi rst
tested for catalase by placing a drop of 3% hydrogen peroxide
solution on the cells. Immediate formation of bubbles indicated the
presence of catalase in the cells. Only those isolates which were
catalase negative were Gram-stained, and only those which were
Gram-positive were maintained in MRS broth containing 25%
glycerol at  20

C. For routine analysis, strains were subcultured
twice in MRS broth for 24 h at 37

C. Selected LAB were identifi ed
by 16S rDNA analysis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. Plasom เตรียมสูตรเดิมของ Plasomconsists ของเน็ต 1 กก. sh (ปลาniloticus), 20 0 กรัมน้ำตาลและเกลือ 10 กรัม 0 มีส่วนผสมโอนย้ายไปยังถัง และคลุม ด้วยพลาสติกหา lm การได้รับการกกภาชนะที่อุณหภูมิห้อง (30 2C) สำหรับ 8วัน (Fig.1) ระหว่างการหมัก แต่ละถังถูกสำหรับห้องปฏิบัติการแยกทุกสองวัน ก่อนที่จะแยก ตัวเลือกถูกผสม และใช้เป็นตัวอย่างประกอบประมวลผลการผลิต Plasomวัตถุดิบปลาขนาดเลือก และตัดล้างปลา + ส่วนผสมหมักผสมกับข้าวคั่วบรรจุการแจกจ่ายส่วนผสม(เกลือ + น้ำตาล และข้าวคั่ว)รูปที่ 1 การประมวลผล Plasomproduction Hwanhlem et al2.2. แยกของ L ABยี่สิบห้ากรัมของตัวอย่างเพิ่ม 225 มล.ผ่านการฆ่าเชื้อโพแทสเซียม 0.05 M ค่าฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.2 ประกอบด้วย 1% NaCl (PBS)และเขย่าสำหรับ 5 นาทีเหมาะสม dilutions ทศนิยมมีเตรียมใน PBS บัฟเฟอร์ และเทลงในจานเพาะเชื้อเป็นหมันในเด Rogosa คนมีอาหารของ Sharpe (MRS, Labscan Asia Co., Ltd. ประเทศไทย)0.3% (w/v) CaCO3(Maragkoudakis et al. 20 0 6) นี้ภายใต้การบ่มที่ 37C สำหรับอาณานิคมแบคทีเรีย 24 h. ที่จัดแสดงโซนล้างบนแผ่นละเบิก และริ้วบนอาหาร MRS ที่ประกอบด้วย 0.3% (w/v) CaCO3. กระบวนการนี้ได้ทำซ้ำเพื่อทำความสะอาดการแยก แต่ละตัวแยกได้ก่อนผ่านทดสอบ catalase โดยหยด 3% ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์การแก้ไขปัญหาเกี่ยวกับเซลล์ ระบุการก่อตัวของฟองอากาศทันทีสถานะการออนไลน์ของ catalase ในเซลล์ เฉพาะที่แยกซึ่งcatalase ลบถูกย้อม สีกรัม และเฉพาะผู้ที่แบคทีเรียแกรมบวกยังคงไว้ในซุป MRS ที่ประกอบด้วย 25%กลีเซอรอล 20C. สำหรับวิเคราะห์ประจำ สายพันธุ์ถูก subculturedในน้ำซุป MRS สำหรับ 24 ชั่วโมงที่ 37C. เลือกปฏิบัติเป็น identifi edโดยการวิเคราะห์ 16S rDNA

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 เตรียม Plasom
สูตรเดิมของ Plasomconsists 1 กิโลกรัม Fi SH (Oreochromis
niloticus), 10 0 กรัมเกลือ 20 กรัมน้ำตาล 0 ผสมถูก
โอนไปยังถังและปกคลุมด้วยพลาสติกชนิด Fi LM
ภาชนะบรรจุที่ถูกบ่มที่อุณหภูมิห้อง (30? 2
?
C) เป็นเวลา 8
วัน (รูปที่ 1) ระหว่างการหมักแต่ละถังถูกนำสำหรับห้องปฏิบัติการ
แยกทุกสองวัน ก่อนที่จะมีการแยกกลุ่มตัวอย่างที่เลือกได้รับการ
ผสมและใช้เป็นตัวอย่างคอมโพสิต.
Plasom การประมวลผลการผลิต
วัตถุดิบ
ปลา
ขนาดที่เลือกและตัด
ล้าง
ปลา + ส่วนผสม
หมัก
ผสมกับคั่วข้าว
บรรจุ
การจัดจำหน่าย
ส่วนผสม
(เกลือ + น้ำตาลและข้าวคั่ว)
รูป 1. การประมวลผล Plasomproduction Hwanhlem et al. 2.2 แยก L AB ยี่สิบห้ากรัมของกลุ่มตัวอย่างถูกเพิ่มเข้าไปใน 225 มิลลิลิตรหมัน0.05 M โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ค่า pH 7.2 ที่มี 1% โซเดียมคลอไรด์ (PBS) และเขย่าเป็นเวลา 5 นาที ที่เหมาะสมเจือจางทศนิยมได้จัดทำในพีบีเอส buffer และเทลงในจานเลี้ยงเชื้อผ่านการฆ่าเชื้อบนผู้ชาย Rogosa และชาร์ป (นาง Labscan Asia Co. , Ltd. ประเทศไทย) วุ้นที่มี0.3% (w / v) CaCO 3 (Maragkoudakis et al, 20 0 6) นี้ได้ภายใต้การบ่มที่อุณหภูมิ 37 ? C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง แบคทีเรียที่ได้มีโซนที่ชัดเจนเกี่ยวกับแผ่นเปลือกโลกถูกเลือกเป็นรายบุคคลและลายบนอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS ที่มี 0.3% (w / v) CaCO3 ขั้นตอนนี้จะถูกทำซ้ำเพื่อการชำระล้างเชื้อ แต่ละสายพันธุ์ก็แรกทดสอบการ catalase โดยการวางลดลง 3% ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์แก้ปัญหาในเซลล์ การก่อตัวของฟองทันทีที่ระบุการปรากฏตัวของ catalase ในเซลล์ เฉพาะสายพันธุ์เหล่านั้นซึ่งเป็นcatalase เชิงลบแกรมสีและเฉพาะผู้ซึ่งเป็นแบคทีเรียแกรมบวกที่ถูกเก็บรักษาไว้ในน้ำซุป MRS ที่มี 25% กลีเซอรอลที่? 20 ? C. สำหรับการวิเคราะห์ประจำสายพันธุ์ที่ถูกเลี้ยงครั้งที่สองใน MRS น้ำซุปเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 ? C. LAB ที่เลือกถูก identifi ed โดยการวิเคราะห์ 16S rDNA

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ2.1 . เตรียมปลาส้มสูตรดั้งเดิมของ plasomconsists ของ SH Fi 1 กิโลกรัม ( สกุลปลานิลniloticus ) , 10 0 กรัมเกลือและ 20 0 กรัมน้ำตาล ส่วนผสมคือย้ายไปยังถังและครอบคลุมกับพลาสติก fi LM . ที่ภาชนะบรรจุที่ถูกบ่มที่อุณหภูมิห้อง ( 30 28 C )วัน ( ” ) ในระหว่างกระบวนการหมักแต่ละถังถ่ายสำหรับแลปแยกทุก 2 วัน ก่อนที่จะแยกจำนวนผสมและใช้เป็นตัวอย่างประกอบกรรมวิธีการผลิตปลาส้มวัตถุดิบปลาเลือกขนาดและตัดล้างปลา + ส่วนผสมการหมักผสมกับข้าวคั่วบรรจุการกระจายส่วนผสม( เกลือ + น้ำตาล และข้าวคั่ว )รูปที่ 1 การประมวลผล plasomproduction . hwanhlem et al .2.2 . การแยกของชั้น .ยี่สิบ - ห้ากรัมจำนวนเพิ่ม 225 มิลลิลิตร ปลอดเชื้อ0.05 M โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.2 มี 1 % NaCl ( PBS )และหวั่นไหว 5 นาทีที่เหมาะสม วิธีการเตรียม ทศนิยมใน PBS buffer และเทลงในจาน Petri เป็นหมันในผู้ชาย rogosa เดอชาร์ป ( และคุณ labscan Asia Co . , Ltd . , Thailand ) วุ้นที่มี0.3% ( w / v ) CaCO3 .( maragkoudakis et al . , 20 0 6 ) นี้คือภายใต้เพื่อบ่มที่ 37C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง แบคทีเรียโคโลนีที่แสดงโซนชัดเจนบนแผ่นเป็นแบบเลือกลายบนนางวุ้นที่มี 0.3% ( w / v ) แคลเซียมคาร์บอเนต. ขั้นตอนนี้คือซ้ำเพื่อให้บริสุทธิ์ของเชื้อ ของแต่ละไอโซเลทคือ RST fiทดสอบสามารถวางหยด 3% ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์สารละลายในเซลล์ การก่อตัวของฟองแสดงทันทีการปรากฏตัวของคะตะเลสในเซลล์ เฉพาะสายพันธุ์ซึ่งเป็นสามารถลบคราบกรัม และเฉพาะผู้ซึ่งเป็นแกรมบวกถูกเก็บรักษาไว้ใน MRS broth ที่มี 25%กลีเซอรอลที่ 20C . สำหรับการวิเคราะห์ตามปกติ subcultured สายพันธุ์สองครั้งใน MRS broth เป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37C . เลือก Lab เป็น identifi เอ็ดโดยการวิเคราะห์ 16S rDNA .