Purification of xylanase was effecte

Purification of xylanase was effected by ammonium sulfate fractionation and by carboxymethyl sephadex (CM-Sephadex) chromatography. Ammonium sulfate precipitated protein was dissolved in small quantity of buffer and subjected to dialysis against same buffer. The dialyzed preparation was applied to carboxymethyl sephadex column (20 cm  1 cm), which was preequilibrated with phosphate buffer (50 mM, pH 8). The unbound run through was collected, and after washing the column with phosphate buffer (50 mM, pH 8), elution was carried out using 0–0.5 M continuous sodium chloride gradient and fractions of 5.0 ml each, were collected. Protein suspected to be still bound was eluted using 1 M NaCl (25 ml). Fractions collected were tested for xylanase activity and protein content.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Puri ไอออนไฟของไซลาเนสได้รับผลกระทบจากการแยกแอมโมเนียมซัลเฟตและคาร์บอกซี sephadex (CM-Sephadex) โค แอมโมเนียมซัลเฟตตกตะกอนโปรตีนถูกละลายในปริมาณขนาดเล็กของบัฟเฟอร์และอยู่ภายใต้การฟอกไตกับบัฟเฟอร์เดียวกัน ในการจัดทำ dialyzed ถูกนำไปใช้คาร์บอกซีคอลัมน์ sephadex (20 ซม 1 ซม.) ซึ่งได้รับการ preequilibrated กับฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (50 มิลลิค่า pH 8) วิ่งผ่านไม่ได้ผูกไว้ถูกเก็บรวบรวมและหลังจากล้างคอลัมน์ที่มีบัฟเฟอร์ฟอสเฟต (50 มิลลิค่า pH 8), ชะได้รับการดำเนินการโดยใช้ 0-0.5 M โซเดียมคลอไรด์ไล่ระดับสีอย่างต่อเนื่องและเศษของ 5.0 มล. แต่ละที่ถูกเก็บรวบรวม โปรตีนที่ต้องสงสัยว่าจะผูกพันยังคงได้รับการชะใช้ 1 M โซเดียมคลอไรด์ (25 มล.) เศษส่วนที่เก็บรวบรวมได้มีการทดสอบว่าเป็นกิจกรรมที่ไซลาเนสและโปรตีน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ปูริ จึงมีผลต่อการของเอนไซม์ด้วยแอมโมเนียม ซัลเฟต ( และคาร์บอกซีเมทธิล ( ซม. สามารถแยก ) โครมาโตกราฟี แอมโมเนียม ซัลเฟตตกตะกอนโปรตีนละลายได้ในปริมาณขนาดเล็กของบัฟเฟอร์ และต้องล้างไต กับ แบบบัฟเฟอร์ ที่ผ่านการเตรียมการประยุกต์ใช้คาร์บอกซีเมทธิลแยกคอลัมน์ ( 20 ซม. Â 1 ซม. )ซึ่ง preequilibrated ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( 50 มม. , pH 8 ) การหลุดวิ่งผ่าน รวบรวมข้อมูล และหลังจากล้างคอลัมน์ด้วยฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( 50 มม. , pH 8 ) ได้มาโดยใช้ 0 – 0.5 M โซเดียมคลอไรด์และต่อเนื่องไล่ระดับเศษส่วนของ 5.0 ml แต่ละ , รวบรวม โปรตีนที่สงสัยว่าจะยังคงผูกพันคือตัวอย่างการใช้ 1 M NaCl ( 25 ml . )เศษส่วนเก็บ ทดสอบกิจกรรมเอนไซม์และโปรตีน .