Thawed samples were separated on 4%

Thawed samples were separated on 4% to
15% gradient gels with rabbit-polyclonal antibodies against
phospho-(Ser473)Akt (1:1000; Cell Signaling) and total-Akt, followed
by IRdye-conjugated anti-rabbit antibody (LI-COR). Bands were
normalized to the ratio of phospho-/total Akt for baseline-starved cells
on an Odyssey/LI-COR infrared system. Replicate assays on
independent cell populations were tested to obtain robust data for
mean ± SD for Western signal in mutant versus wild-type cells.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตัวอย่างละลายถูกแยกออกเมื่อวันที่ 4% เป็น
15% เจลไล่ระดับสีที่มีแอนติบอดีกระต่ายโพลีกับ
phospho- (Ser473) สิ้นคิด (1: 1000 มือถือส่งสัญญาณ) และรวม-สิ้นคิดตาม
โดย IRdye-ผันป้องกันกระต่ายแอนติบอดี (LI-COR ) วงดนตรีที่ได้รับ
ปกติอัตราส่วนของ phospho- / รวมสิ้นคิดสำหรับเซลล์พื้นฐาน-หิวโหย
ใน Odyssey / ระบบอินฟราเรด LI-COR ทำซ้ำชุดตรวจใน
ประชากรเซลล์อิสระได้รับการทดสอบเพื่อให้ได้ข้อมูลที่มีประสิทธิภาพสำหรับ
ค่าเฉลี่ย± SD สัญญาณตะวันตกกลายพันธุ์เมื่อเทียบกับเซลล์ชนิดป่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ละลายตัวอย่างแยก 4 )15 % ลาดเจลกับกระต่ายใช้แอนติบอดีต่อphospho - ( ser473 akt ( 000 ) ; การส่งสัญญาณของเซลล์ ) และ akt ทั้งหมด ตามโดย irdye conjugated แอนติบอดีต่อต้านกระต่าย ( li-cor ) วงดนตรี )ปกติกับอัตราส่วนของ phospho - รวม / akt สำหรับพื้นฐานอดอาหารเซลล์ในรายการ / li-cor ระบบอินฟราเรด . เลียนแบบวิธีบนประชากรเซลล์อิสระ ทำการทดสอบเพื่อให้ได้ข้อมูลที่แข็งแกร่งสำหรับหมายถึง± SD การกลายพันธุ์ของตะวันตกเมื่อเทียบกับเซลล์