Figure 6. Simultaneous binding of m

Figure 6. Simultaneous binding of mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibodies clone 12113 or clone 20E5 with ฮิวเมน OX4OL on PHA-M-stimulated ฮิวเมน CD134
10 expressing T ลิมโฟไซต์.
Figure 7. Time course effect of exposure to แอนติ-ฮิวเมน CD3/แอนติ-ฮิวเมน CD28
antibody stimulator beads on surface ฮิวเมน CD134 expression of human เอฟเฟคเตอร์ T ลิมโฟไซต์ (Teffs) and of regulatory T ลิมโฟไซต์ (Tregs).
Figure 8. Dose effect of exposure to mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibodies clone 15 12113 or clone 20E5, or to ฮิวเมน OX4OL on proliferation of PHA-M-stimulated
ฮิวเมน CD134 expressing T ลิมโฟไซต์.
Figure 9. Effect of combining mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibodies clone 12113
with ฮิวเมน OX4OL, or mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibodies clone 20E5 with
ฮิวเมน OX4OL on proliferation of PHA-M-stimulated ฮิวเมน CD134 expressing T
20 ลิมโฟไซต์.
Figure 10. Effect of exposure to mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibodies clone 12113 or clone 20E5, or to ฮิวเมน OX4OL on proliferation of แอนติ-ฮิวเมน CD3/แอนติ-ฮิวเมน CD28 antibody stimulator beads-stimulated ฮิวเมน CD134 expressing human
เอฟเฟคเตอร์ T ลิมโฟไซต์.
25 Figure 11. Effect of exposure to mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibodies clone 12113 or
clone 20E5, or to ฮิวเมน OX4OL on proliferation of แอนติ-ฮิวเมน CD3/แอนติ-ฮิวเมน CD28 antibody stimulator beads-stimulated ฮิวเมน CD134 expressing human regulatory T ลิมโฟไซต์.
Figure 12. Effect of mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibody clone 12113 on human 30 OX4OL mediated proliferation of แอนติ-ฮิวเมน CD3/แอนติ-ฮิวเมน CD28 antibody
stimulator beads-stimulated ฮิวเมน CD134 expressing human เอฟเฟคเตอร์ (A) and
regulatory (B) T ลิมโฟไซต์.







6
Figure 13. Effect of exposure to mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibodies clone 12113 or clone 20E5, or to ฮิวเมน OX4OL on ฮิวเมน CD134 expressing human regulatory T ลิมโฟไซต์-mediated suppression of ฮิวเมน CD134 expressing human เอฟเฟคเตอร์ T ลิมโฟไซต์ proliferation.
5 Figure 14. Binding of chimeric human IgG4x แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibody clone
20E5 on (minus and plus IL-2) CD3/CD28 beads-stimulated ฮิวเมน CD134 expressing CD4 T ลิมโฟไซต์ and CD8 T ลิมโฟไซต์.
Figure 15. Effect of chimeric human IgG4K แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibody clone 20E5 or ฮิวเมน OX4OL on proliferation of PHA-M-stimulated ฮิวเมน CD134 expressing
10 T ลิมโฟไซต์.
Figure 16. Dose effect of exposure to chimeric human IgG4x แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibody clone 20E5 or to ฮิวเมน OX4OL on proliferation of PHA-M-stimulated ฮิวเมน CD134 expressing T ลิมโฟไซต์
Figure 17. Effect of combining chimeric human IgG4K แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibody 15 clone 20E5 with ฮิวเมน OX4OL on proliferation of PHA-M-stimulated human
CD134 expressing T ลิมโฟไซต์.
Figure 18. Effect of chimeric human IgG4K แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibody clone 20E5 or ฮิวเมน OX4OL on proliferation of (minus and plus IL-2) CD3/CD28 beads-
stimulated ฮิวเมน CD134 expressing T ลิมโฟไซต์.
20 Figure 19. Binding of mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibodies clones 12113 and 20E5
with non-reduced and reduced recombinant ฮิวเมน CD134:human Fcy fusion protein. (A) Examined non-reducing (a, b) and reducing (c, d) conditions. (B) Electrophoretic migration patterns of recombinant ฮิวเมน CD134:human Fcy
fusion protein (rhuCD134) under non-reducing (a, b) and reducing (c, d) conditions 25 using Coomassie brilliant blue staining. (C) Western blot of non-reducing (a ,b) and
reducing (c, d) recombinant ฮิวเมน CD134:human Fcy fusion protein exposed to
mouse IgG1x isotype control antibody (mIgG1) or to mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134
antibodies clones 12113 and 20E5 (m12113 and m20E5, respectively).
Figure 20. Schematic representation of cysteine-rich domains (CRD) in full-length 30 ฮิวเมน CD134 (denoted as `CRD1') and in various truncated ฮิวเมน CD134 forms
(denoted as `CRD2', `CRD3', `CRD4', and 'truncated (tc) CRD4').
Figure 21. Binding of mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibodies clones 12113 and 20E5 on 293-F cell line transiently transfected with full-length ฮิวเมน CD134 construct







7
(denoted `CRD1') or with various truncated ฮิวเมน CD134 constructs (denoted `CRD2', `CRD3', `CRD4', and 'truncated (tc) CRD4').
Figure 22. Binding of chimeric human IgG4x and/or IgG1x แอนติ-ฮิวเมน CD134
antibodies clones 12113 and 20E5 on 293-F cell line transiently transfected with 5 full-length ฮิวเมน CD134 construct (denoted `CRD1') or with various truncated
ฮิวเมน CD134 constructs (denoted `CRD2', `CRD3', `CRD4', and 'truncated (tc)
CRD4').
Figure 23. Binding of mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibody clone 12113 (A) and
chimeric human IgG4x แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibody clone 12H3 (B) with human 10 CD134-derived peptide, which corresponds to amino acid sequence of truncated
CRD3 A1-module-CRD4 subdomain Al-module (according to definition of Latza et
al. Eur J Immunol 1994; 24: 677 683).
Figure 24. Variable regions of monoclonal antibody 20E5.
Murine variable regions (m20E5VH and m20E5VL); ฮิวเมไนซ์ 20E5 variable 15 heavy chains (hu20E5_hl, hu20E5_h2 and hu20E5 h3) and ฮิวเมไนซ์ 20E5
variable light chains (hu20E5_11 and hu20E5_12). m20E5VH: SEQ ID NO: 4;
m20E5VL: SEQ ID NO 5.
Figure 25. Variable regions of monoclonal antibody 12113.
Murine variable regions (m12H3VH and m12H3VL); ฮิวเมไนซ์ 12H3 variable 20 heavy chains (hul2H3_hl, hul2H3_h2 and hu12H3_h3) and ฮิวเมไนซ์ 12113
variable light chains (hul2H3_ll and hu12113_12). m12H3VH: SEQ ID NO: 12;
m12H3VL: SEQ ID NO: 13.
Figure 26. ฮิวเมไนซ์ 20E5 variable regions. Figure 27. ฮิวเมไนซ์ 12113 variable regions.
25 Figure 28. Binding characteristics of ฮิวเมไนซ์ human IgG4K แอนติ-ฮิวเมน CD134
antibody clone 20E5 versions VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) and VL2H1, VL2VH2, VL2VH3 (B) against plate-bound recombinant ฮิวเมน CD134.
Figure 29. Binding characteristics of ฮิวเมไนซ์ human IgG4K แอนติ-ฮิวเมน CD134
antibody clone 12113 versions VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) and VL2H1, VL2VH2, 30 VL2VH3 (B) against plate-bound recombinant ฮิวเมน CD134.
Figure 30. Binding characteristic of biotinylated parental mouse anti-human
CD134 antibody clone 12113 against plate-bound recombinant ฮิวเมน CD134.






8
Figure 31. Competition characteristics of ฮิวเมไนซ์ human IgG4ic แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibody clone 12113 versions VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) and VL2H1, VL2VH2, VL2VH3 (B) with biotinylated parental mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134
antibody clone 12113 (at an EC50 of 20 ng/mL) for binding to plate-bound
5 recombinant ฮิวเมน CD134.
Figure 32. Expression levels of human full-length CD134 on stably transfected 293-
F cell line clone no. 5 (A) and on clone no. 23 (B).
Figure 33. Binding characteristics of ฮิวเมไนซ์ human IgG4ic แอนติ-ฮิวเมน CD134
antibody clone 20E5 versions VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) and VL2H1, VL2VH2, 10 VL2VH3 (B) against surface ฮิวเมน CD134 on stably transfected 293-F cell line
clone no. 5.
Figure 34. Binding characteristics of ฮิวเมไนซ์ human IgG4K แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibody clone 12113 versions VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) and VL2H1, VL2VH2, VL2VH3 (B) against surface ฮิวเมน CD134 on stably transfected 293-F cell line
15 clone no. 5.
Figure 35. Binding characteristics of ฮิวเมไนซ์ human IgG4K แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibody clone 12113 versions VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) and VL2H1, VL2VH2, VL2VH3 (B) against surface ฮิวเมน CD134 on stably transfected 293-F cell line clone no. 23.
20 Figure 36. Binding of ฮิวเมไนซ์ human IgG4ic แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibody clone
12113 versions VL1H1, VL1VH2, VL1VH3, VL2H1, VL2VH2, VL2VH3 on 293-F
cell line transiently transfected with full-length ฮิวเมน CD134 construct (denoted `CRD1') or with various truncated ฮิวเมน CD134 constructs (denoted `CRD3' and `CRD4').
25 Figure 37. Binding of ฮิวเมไนซ์ human IgG4K แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibody clone
20E5 version VL1H1 on 293-F cell line transiently transfected with full-length
ฮิวเมน CD134 construct (denoted `CRD1') or with various truncated ฮิวเมน CD134 constructs (denoted `CRD3' and `CRD4').
Figure 38. Binding characteristic of biotinylated parental mouse anti-human
30 CD134 antibody clone 12113 against surface ฮิวเมน CD134 on stably transfected
293-F cell line clone no. 5.







9
Figure 39. Competition characteristics of ฮิวเมไนซ์ human IgG4K แอนติ-ฮิวเมน CD134 antibody clone 12113 versions VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) and VL2H1, VL2VH2, VL2VH3 (B) with biotinylated parental mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134
antibody clone 12H3 (at an EC50 of 700 ng/mL) for binding to surface human 5 CD134 on stably transfected 293-F cell line clone no. 5.
Figure 40. Downregulation of FOXP3 expression in expanded Tregs (CD4+ CD25+ CD127 dim!-) by soluble OX4OL and soluble mouse แอนติ-ฮิวเมน CD134 12113 IgG1 antibody at indicated concentrations. Y axis shows FOXP3 geometric mean
fluorescence intensity (GeoMFI) detected using anti-FOX3P antibody coupled to 10 PE. m12H3= mouse 12113 IgG1. The data represent a triplicate sample from one
donor.
Figure 41. Histogram of FACS analyses showing dampened inhibitory effect of
Tregs on Teff proliferation by plate bound ฮิวเมไนซ์ แอนติ-ฮิวเมน CD134 12113

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

รูปที่ 6 ผูกพร้อมเมาส์แอนติฮิวเมน CD134 แอนตี้โคลน 12113 หรือโคลน 20E5 กับฮิวเมน OX4OL ในฮิวเมนผา-M-ถูกกระตุ้น CD13410 แสดง T ลิมโฟไซต์รูปที่ 7 ลักษณะหลักสูตรเวลาของการสัมผัสกับแอนติ-ฮิวเมน CD3 แอนติ-ฮิวเมน CD28ลูกปัดเครื่องกระตุ้นแอนติบอดีในนิพจน์ CD134 ฮิวเมนพื้นผิว ของมนุษย์เอฟเฟคเตอร์ T ลิมโฟไซต์ (Teffs) และ การกำกับดูแล T ลิมโฟไซต์ (Tregs)รูปที่ 8 ผล ของการสัมผัสกับเมาส์แอนติฮิวเมน CD134 แอนตี้โคลน 15 12113 หรือโคลน 20E5 หรือฮิวเมนยา OX4OL บนของผา-M-ถูกกระตุ้น ฮิวเมน CD134 แสดง T ลิมโฟไซต์รูปที่ 9 ผลของการรวมแอนตี้ CD134 แอนติ-ฮิวเมนเมาส์โคลน 12113มีฮิวเมน OX4OL หรือแอนตี้ CD134 แอนติ-ฮิวเมนเมาส์โคลน 20E5 ด้วยฮิวเมน OX4OL ในการแพร่หลายของฮิวเมนผา-M-ถูกกระตุ้น CD134 T20 ลิมโฟไซต์รูปที่ 10 ผลของการสัมผัสเมาส์แอนติฮิวเมน CD134 แอนตี้โคลน 12113 หรือโคลน 20E5 หรือฮิวเมน OX4OL ในการงอกของแอนติ-ฮิวเมน CD28 CD3 แอนติ-ฮิวเมนแอนติบอดีเครื่องกระตุ้นฮิวเมนถูกกระตุ้นประคำ CD134 มนุษย์ เอฟเฟคเตอร์ T ลิมโฟไซต์25 รูป 11 ผลของการสัมผัสกับแอนตี้ CD134 แอนติ-ฮิวเมนเมาส์โคลน 12113 หรือ20E5 โคลน หรือการฮิวเมน OX4OL ในการแพร่หลายของเครื่องกระตุ้นแอนติบอดี CD28 CD3 แอนติ-ฮิวเมนแอนติ-ฮิวเมนลูกปัดถูกกระตุ้นฮิวเมน CD134 แสดงมนุษย์บังคับ T ลิมโฟไซต์รูปที่ 12 ผลของเมาส์แอนติฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 12113 ในมนุษย์ 30 OX4OL mediated ของแอนติบอดีแอนติ-ฮิวเมน CD28 CD3 แอนติ-ฮิวเมน เครื่องกระตุ้นฮิวเมนถูกกระตุ้นประคำ CD134 แสดงมนุษย์เอฟเฟคเตอร์ (A) และ ข้อบังคับ (ข) T ลิมโฟไซต์ 6รูปที่ 13 ผลของการสัมผัสเมาส์แอนติฮิวเมน CD134 แอนตี้โคลน 12113 หรือโคลน 20E5 หรือฮิวเมน OX4OL ในฮิวเมน CD134 แสดงมนุษย์บังคับ T ลิมโฟไซต์ mediated ปราบปรามฮิวเมน CD134 แสดงมนุษย์เอฟเฟคเตอร์ T ลิมโฟไซต์แพร่หลาย5 รูป 14 ผูกของ chimeric มนุษย์ IgG4x แอนติฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน20E5 บน (ลบ และบวก IL-2) CD3/CD28 ถูกกระตุ้นประคำฮิวเมน CD134 แสดง CD4 T ลิมโฟไซต์และ CD8 T ลิมโฟไซต์รูปที่ 15 ผลของ chimeric มนุษย์ IgG4K แอนติฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 20E5 หรือฮิวเมน OX4OL ในการแพร่หลายของฮิวเมนผา-M-ถูกกระตุ้น CD13410 T ลิมโฟไซต์รูปที่ 16 ยาผลของแสง chimeric มนุษย์ IgG4x แอนติฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 20E5 หรือฮิวเมน OX4OL บนของฮิวเมนผา-M-ถูกกระตุ้น CD134 แสดง T ลิมโฟไซต์รูปที่ 17 ผลของการรวม chimeric มนุษย์ IgG4K แอนติฮิวเมน CD134 แอนติบอดี 15 โคลน 20E5 กับฮิวเมน OX4OL ในการแพร่หลายของผา-M-ถูกกระตุ้น CD134 แสดง T ลิมโฟไซต์รูปที่ 18 ผลของ chimeric มนุษย์ IgG4K แอนติฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 20E5 หรือฮิวเมน OX4OL บนของ (ลบ และบวก IL-2) ประคำ CD3/CD28 -ถูกกระตุ้นฮิวเมน CD134 แสดง T ลิมโฟไซต์20 รูป 19 รวมแอนตี้ CD134 แอนติ-ฮิวเมนเมาส์ clones 12113 และ 20E5กับไม่ลดลง และลดฮิวเมน recombinant CD134:human Fcy อาหารโปรตีน (ก) Examined ไม่ลดลง (a, b) และการลดเงื่อนไข (c, d) (ข) ด้วยการย้ายรูปแบบของ recombinant ฮิวเมน CD134:human Fcyอาหารโปรตีน (rhuCD134) ไม่ลดลง (a, b) และ (c, d) ลดเงื่อนไข 25 ใช้ Coomassie brilliant สีย้อมสี คืนในตา (C) เวสเทิร์นไม่ลด (a, b) และ ลด (c, d) ฮิวเมน recombinant โปรตีนฟิวชั่น CD134:human Fcy ตาก แอนติบอดีควบคุม isotype เมาส์ IgG1x (mIgG1) หรือเมาส์ CD134 แอนติ-ฮิวเมน แอนตี้ clones 12113 และ 20E5 (m12113 และ m20E5 ตามลำดับ) รูปที่ 20 แสดงแผนผังตัวอย่างโดเมน cysteine ริช (CRD) ในฮิวเมนปราศจาก 30 CD134 (สามารถบุเป็น 'CRD1') และทางตัดฟอร์มฮิวเมน CD134 (ตาม 'CRD2', 'CRD3', 'CRD4' และ ' ตัด (tc) CRD4')รูปที่ 21 รวมแอนตี้ CD134 แอนติ-ฮิวเมนเมาส์ clones 12113 และ 20E5 บรรทัด 293 F เซลล์ transiently transfected กับฮิวเมนจัดสร้าง CD134 7(สามารถบุ 'CRD1') หรือกับต่าง ๆ ตัดโครงสร้าง CD134 ฮิวเมน (สามารถบุ 'CRD2', 'CRD3', 'CRD4' และ ' ตัด (tc) CRD4')รูปที่ 22 รวม IgG4x chimeric มนุษย์และ/หรือ IgG1x แอนติฮิวเมน CD134 แอนตี้ clones 12113 และ 20E5 บรรทัด 293 F เซลล์ transiently transfected 5 ฮิวเมนปราศจาก CD134 โครงสร้าง (สามารถบุ ' CRD1') หรือต่าง ๆ ตัด ฮิวเมน CD134 สร้าง (สามารถบุ 'CRD2', 'CRD3', 'CRD4' และ ' ตัด (tc) CRD4')รูปที่ 23 ผูกของแอนติบอดี CD134 แอนติ-ฮิวเมนเมาส์โคลน 12113 (A) และchimeric มนุษย์ IgG4x แอนติฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 12H 3 (B) กับมนุษย์ 10 มา CD134 เพปไทด์ ซึ่งตรงกับลำดับของกรดอะมิโนของตัด CRD3 โดเมนย่อย A1-โม-CRD4 อัล-โมดูล (ตามคำนิยามของ Latza ร้อยเอ็ด al. Immunol Eur J 1994 24:677 683)รูปที่ 24 ขอบเขตตัวแปรของ monoclonal แอนติบอดี 20E5ขอบเขตตัวแปร murine (m20E5VH และ m20E5VL); ฮิวเมไนซ์ 20E5 แปร 15 หนักโซ่ (h3 hu20E5_hl, hu20E5_h2 และ hu20E5) และฮิวเมไนซ์ 20E5 ตัวแปรแสงโซ่ (hu20E5_11 และ hu20E5_12) m20E5VH: ไม่มีรหัสลำดับ: 4 m20E5VL: รหัสลำดับ 5 ไม่รูปที่ 25 ขอบเขตตัวแปรของแอนติบอดี monoclonal 12113ขอบเขตตัวแปร murine (m12H3VH และ m12H3VL); ฮิวเมไนซ์ 12H ตัวแปร 3 20 หนักโซ่ (hul2H3_hl, hul2H3_h2 และ hu12H3_h3) และฮิวเมไนซ์ 12113 ตัวแปรแสงโซ่ (hul2H3_ll และ hu12113_12) m12H3VH: ไม่มีรหัสลำดับ: 12 m12H3VL: ไม่มีรหัสลำดับ: 13รูปที่ 26 ฮิวเมไนซ์ 20E5 ตัวแปรภูมิภาค รูปที่ 27 ฮิวเมไนซ์ 12113 แปรขอบเขตการ25 รูป 28 ลักษณะของฮิวเมไนซ์ผูก CD134 แอนติฮิวเมน IgG4K มนุษย์แอนติบอดีโคลน 20E5 รุ่น VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) และ VL2H1, VL2VH2, VL2VH3 (B) กับฮิวเมน recombinant ผูกแผ่น CD134รูปที่ 29 ลักษณะของฮิวเมไนซ์ผูก CD134 แอนติฮิวเมน IgG4K มนุษย์ แอนติบอดีโคลน 12113 รุ่น VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) และ VL2H1, VL2VH2, VL2VH3 30 (B) กับฮิวเมน recombinant ผูกแผ่น CD134 รูปที่ 30 ลักษณะรวมของบุคคลต่อต้านผู้ปกครองเมาส์ biotinylated CD134 แอนติบอดีโคลน 12113 กับฮิวเมน recombinant ผูกแผ่น CD134 8รูปที่ 31 ลักษณะการแข่งขันของฮิวเมไนซ์มนุษย์ IgG4ic แอนติฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 12113 รุ่น VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) และ VL2H1, VL2VH2, VL2VH3 (B) กับผู้ปกครอง biotinylated เมาส์ CD134 แอนติ-ฮิวเมน แอนติบอดีโคลน 12113 (ที่ EC50 ของ 20 ng/mL) สำหรับผูกไปผูกกับแผ่น5 recombinant ฮิวเมน CD134รูปที่ 32 ระดับนิพจน์ CD134 ปราศจากมนุษย์บน 293 stably transfected-บรรทัด F เซลล์โคลนหมายเลข 5 (A) และในโคลนหมายเลข 23 (B)รูป 33 ลักษณะของฮิวเมไนซ์ผูก CD134 แอนติฮิวเมน IgG4ic มนุษย์ แอนติบอดีโคลน 20E5 รุ่น VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) และ VL2H1, VL2VH2, VL2VH3 10 (B) กับผิวฮิวเมน CD134 บรรทัดเซลล์ 293-F stably transfected โคลนหมายเลข 5รูปที่ 34 ลักษณะรวมของฮิวเมไนซ์มนุษย์ IgG4K แอนติฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 12113 รุ่น VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) และ VL2H1, VL2VH2, VL2VH3 (B) กับผิวฮิวเมน CD134 บรรทัดเซลล์ 293-F stably transfected15 โคลนหมายเลข 5รูปที่ 35 ลักษณะรวมของฮิวเมไนซ์มนุษย์ IgG4K แอนติฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 12113 รุ่น VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) และ VL2H1, VL2VH2, VL2VH3 (B) กับผิวฮิวเมน CD134 บรรทัด 293-F stably transfected เซลล์โคลนหมายเลข 2320 รูป 36 รวมฮิวเมไนซ์คน IgG4ic แอนติฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน12113 รุ่น VL1H1, VL1VH2, VL1VH3, VL2H1, VL2VH2, VL2VH3 ใน 293-Fรายการเซลล์ transiently transfected ฮิวเมนปราศจาก CD134 สร้าง (สามารถบุ ' CRD1') หรือฮิวเมนต่าง ๆ ตัด CD134 โครงสร้าง (สามารถบุ 'CRD3' และ 'CRD4')25 รูป 37 รวมฮิวเมไนซ์คน IgG4K แอนติฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลนTransiently transfected 20E5 รุ่น VL1H1 บรรทัด 293 F เซลล์ ด้วยปราศจากสร้าง CD134 ฮิวเมน (สามารถบุ ' CRD1') หรือกับต่าง ๆ ตัดฮิวเมน CD134 โครงสร้าง (สามารถบุ 'CRD3' และ 'CRD4')รูป 38 ลักษณะรวมของบุคคลต่อต้านผู้ปกครองเมาส์ biotinylated30 CD134 แอนติบอดีโคลน 12113 กับผิวฮิวเมน CD134 บน stably transfectedบรรทัด 293 F เซลล์โคลนหมายเลข 5 9รูป 39 ลักษณะการแข่งขันของฮิวเมไนซ์มนุษย์ IgG4K แอนติฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 12113 รุ่น VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) และ VL2H1, VL2VH2, VL2VH3 (B) กับผู้ปกครอง biotinylated เมาส์ CD134 แอนติ-ฮิวเมนแอนติบอดีโคลน 12H 3 (ที่ EC50 ของ 700 ng/mL) สำหรับผูกกับผิวมนุษย์ 5 CD134 บนโคลนรายการเซลล์ 293-F stably transfected เลขที่ 5รูปที่ 40 Downregulation FOXP3 Tregs ขยายนิพจน์ (ติ่มซำ CD4 + CD25 + CD127 ! -) โดยละลาย OX4OL และแอนติบอดี CD134 12113 IgG1 แอนติ-ฮิวเมนเมาส์ละลายที่ความเข้มข้นที่ระบุ แกน Y แสดง FOXP3 เรขาคณิตความเข้ม fluorescence (GeoMFI) ที่ตรวจพบแอนติบอดีต่อต้าน-FOX3P โดยใช้ควบคู่กับ 10 PE m12H3 = 12113 IgG1 เมาส์ ข้อมูลแสดงถึงตัวอย่าง triplicate จาก ผู้บริจาครูปที่ 41 ลิปกลอสไขผลของชุบฮิสโตแกรมของ FACS วิเคราะห์แสดง Tregs บน Teff การงอกโดยแผ่นผูกฮิวเมไนซ์แอนติ-ฮิวเมน CD134 12113

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

รูปที่ 6 พร้อมกันผูกพันเมาส์แอนติ - ฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 12113 หรือโคลน 20E5 กับฮิวเมน OX4OL ใน PHA-M-กระตุ้นฮิวเมน
CD134. 10
การแสดงทีลิมโฟไซต์รูปที่7 ผลแน่นอนเวลา จากการสัมผัสกับแอนติ - ฮิวเมน CD3 / แอนติ - ฮิวเมน CD28
ลูกปัดกระตุ้นแอนติบอดีบนพื้นผิวฮิวเมนแสดงออก CD134 ของมนุษย์เอฟเฟคเตอร์ทีลิมโฟไซต์ (Teffs) และ T กฎระเบียบลิ . มโฟไซต์ (Tregs)
รูปที่ 8 ผลปริมาณของการสัมผัสกับเมาส์แอนติ - ฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 15 12113 หรือโคลน 20E5 หรือฮิวเมน OX4OL ในการแพร่กระจายของ
PHA-M-กระตุ้นฮิวเมนCD134 .
แสดงทีลิมโฟไซต์รูปที่9 ผลของการรวมเมาส์แอนติ - ฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 12,113
กับฮิวเมน OX4OL หรือเมาส์แอนติ - ฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 20E5
กับฮิวเมนOX4OL บน การแพร่กระจายของ PHA-M-กระตุ้นฮิวเมน CD134 แสดง T
20 ลิมโฟไซต์.
รูปที่ 10 ผลของการสัมผัสกับเมาส์แอนติ - ฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 12113 หรือโคลน 20E5 หรือฮิวเมน OX4OL ในการแพร่กระจาย ของแอนติ - ฮิวเมน CD3 / แอนติ - ฮิวเมน CD28 กระตุ้นแอนติบอดีลูกปัดกระตุ้นฮิวเมน CD134
แสดงมนุษย์เอฟเฟคเตอร์ทีลิมโฟไซต์.
25 รูปที่ 11 ผลของการสัมผัสกับแอเมาส์ นติ - ฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 12113
หรือโคลน20E5 หรือฮิวเมน OX4OL ในการขยายตัวของแอนติ - ฮิวเมน CD3 / แอนติ - ฮิวเมน CD28 กระตุ้นแอนติบอดีลูกปัดกระตุ้นฮิวเมน CD134 แสดง การกำกับดูแลของมนุษย์ทีลิมโฟไซต์.
รูปที่ 12 ผลของเมาส์แอนติ - ฮิวเมนแอนติบอดีโคลน CD134 12,113 มนุษย์ 30 OX4OL การขยายสื่อกลางของแอนติ - ฮิวเมน CD3 / แอนติ - ฮิวเมนแอนติบอดี CD28
กระตุ้นเม็ดกระตุ้นฮิวเมน CD134 แสดงมนุษย์เอฟเฟคเตอร์ (A)
และการกำกับดูแล(B) T ลิมโฟไซต์. 6 รูปที่ 13 ผลของการสัมผัสกับเมาส์แอนติ - ฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 12113 หรือ โคลน 20E5 หรือฮิวเมน OX4OL ในฮิวเมน CD134 แสดงการกำกับดูแลของมนุษย์ T ลิมโฟไซต์ -mediated การปราบปรามของฮิวเมน CD134 แสดงมนุษย์เอฟเฟคเตอร์ทีลิมโฟไซต์งอก. 5 รูปที่ 14. ผูกพันของ มนุษย์ลูกผสม IgG4x แอนติ - ฮิวเมนแอนติบอดีโคลน CD134 20E5 บน (ลบและบวก IL-2) CD3 / CD28 ลูกปัดกระตุ้นฮิวเมน CD134 แสดง CD4 ทีลิมโฟไซต์และ CD8 T ลิมโฟไซต์. รูปที่ 15 . ผลของมนุษย์ลูกผสม IgG4K แอนติ - ฮิวเมนแอนติบอดีโคลน CD134 20E5 หรือฮิวเมน OX4OL ในการแพร่กระจายของ PHA-M-กระตุ้นฮิวเมน CD134 แสดง10 T ลิมโฟไซต์. รูปที่ 16 ผลปริมาณของการสัมผัสกับ มนุษย์ลูกผสม IgG4x แอนติ - ฮิวเมนแอนติบอดีโคลน CD134 20E5 หรือฮิวเมน OX4OL ในการแพร่กระจายของ PHA-M-กระตุ้นฮิวเมน CD134 แสดงทีลิมโฟไซต์รูปที่17 ผลของการรวมมนุษย์ลูกผสม IgG4K แอนติ - ฮิวเมนแอนติบอดี CD134 15 20E5 โคลนกับฮิวเมน OX4OL ในการแพร่กระจายของ PHA-M-กระตุ้นมนุษย์CD134 แสดงทีลิมโฟไซต์. รูปที่ 18 ผลของมนุษย์ลูกผสม IgG4K แอนติ - ฮิวเมนแอนติบอดีโคลน CD134 20E5 หรือฮิวเมน OX4OL ในการแพร่กระจายของ (ลบและบวก IL-2) CD3 / CD28 beads- กระตุ้นฮิวเมน CD134 แสดงทีลิมโฟไซต์. 20 รูปที่ 19. การผูกเมาส์แอนติ - ฮิวเมน CD134 โคลนแอนติบอดี 12,113 และ 20E5 ที่ไม่ใช่ลดลงและลดลง recombinant ฮิวเมน CD134: โปรตีนมนุษย์ FCY ฟิวชั่น (ก) การตรวจสอบที่ไม่ลด (A, B) และลด (C, D) เงื่อนไข (B) รูปแบบการโยกย้าย Electrophoretic ของ recombinant ฮิวเมน CD134: มนุษย์ FCY โปรตีนฟิวชั่น (rhuCD134) ภายใต้ไม่ลด (A, B) และลด (C, D) 25 เงื่อนไขการใช้ Coomassie ย้อมสีฟ้าสดใส (C) ดวงตะวันไม่ลด (A, B) และการลด(C, D) recombinant ฮิวเมน CD134: มนุษย์โปรตีนฟิวชั่น FCY สัมผัสกับแอนติบอดีควบคุมเมาส์IgG1x isotype (mIgG1) หรือเมาส์แอนติ - ฮิว เมน CD134 โคลนแอนติบอดีและ 12,113 20E5 (m12113 และ m20E5 ตามลำดับ). รูปที่ 20 แผนผังแสดงของโดเมน cysteine ​​ที่อุดมไปด้วย (CRD) มีความยาวเต็มรูปแบบ 30 ฮิวเมน CD134 (แสดงเป็น `CRD1 ') และตัดต่างๆฮิว รูปแบบเมน CD134 (แสดงเป็น `CRD2 ',` CRD3', `CRD4 'และ' ตัดทอน (TC) CRD4 '). รูปที่ 21 ผูกเมาส์แอนติ - ฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 12,113 และ 20E5 บน 293- สายพันธุ์ของเซลล์ F transfected transiently ที่มีความยาวเต็มรูปแบบฮิวเมน CD134 สร้าง7 (แสดง `CRD1) หรือโครงสร้างต่างๆที่ถูกตัดทอนฮิวเมน CD134 (แสดง` CRD2 ', `CRD3',` CRD4 'และ' ตัดทอน (TC) CRD4 '). รูปที่ 22. ผูกพันของมนุษย์ลูกผสม IgG4x และ / หรือ IgG1x แอนติ - ฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 12,113 และ 20E5 ในสายพันธุ์ของเซลล์ 293-F transfected transiently 5 ยาวเต็มรูปแบบฮิวเมน CD134 สร้าง (แสดง ` CRD1) หรือตัดทอนต่างๆฮิวเมนCD134 สร้าง (แสดง CRD2 `',` CRD3', `CRD4 'และ' ตัดทอน (TC). CRD4) รูปที่ 23. การผูกเมาส์แอนติ - ฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 12113 (A) และมนุษย์ลูกผสมIgG4x แอนติ - ฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 12H3 (B) กับมนุษย์ 10 เปปไทด์ CD134 มาซึ่งสอดคล้องกับอะมิโนลำดับกรดของตัดCRD3 A1-โมดูล CRD4 ย่อยอัลโมดูล (ตามคำนิยามของ Latza et al, Eur J Immunol 1994; . 24: 677 683) รูปที่ 24. ภูมิภาคตัวแปรของแอนติบอดี 20E5. หมาภูมิภาคตัวแปร (m20E5VH และ m20E5VL); ฮิวเมไนซ์ 20E5 ตัวแปร 15 โซ่หนัก (hu20E5_hl, hu20E5_h2 และ hu20E5 h3) และฮิวเมไนซ์ 20E5 โซ่แสงตัวแปร (hu20E5_11 และ hu20E5_12) m20E5VH: รหัส SEQ NO: 4; m20E5VL: รหัส SEQ NO 5. รูปที่ 25 ภูมิภาคตัวแปรของแอนติบอดี 12113. หมาภูมิภาคตัวแปร (m12H3VH และ m12H3VL); ฮิวเมไนซ์ 12H3 ตัวแปร 20 โซ่หนัก (hul2H3_hl, hul2H3_h2 และ hu12H3_h3) และฮิวเมไนซ์ 12,113 โซ่แสงตัวแปร (hul2H3_ll และ hu12113_12) m12H3VH: รหัส SEQ NO: 12 m12H3VL: รหัส SEQ NO: 13 รูปที่ 26 ฮิวเมไนซ์ 20E5 ภูมิภาคตัวแปร รูปที่ 27 ฮิวเมไนซ์ 12,113 ภูมิภาคตัวแปร. 25 รูปที่ 28 ลักษณะการผูกของฮิวเมไนซ์ของมนุษย์ IgG4K แอนติ - ฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 20E5 รุ่น VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) และ VL2H1, VL2VH2 . VL2VH3 (B) กับแผ่นที่ถูกผูกไว้ recombinant ฮิวเมน CD134 รูปที่ 29 ลักษณะการผูกของฮิวเมไนซ์ของมนุษย์ IgG4K แอนติ - ฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 12,113 รุ่น VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) และ VL2H1 , VL2VH2 30 VL2VH3 (B) กับแผ่นที่ถูกผูกไว้ recombinant ฮิวเมน CD134. รูปที่ 30 ลักษณะการผูกเมาส์ของผู้ปกครอง biotinylated ต่อต้านมนุษย์แอนติบอดีโคลนCD134 กับ recombinant 12,113 แผ่นที่ถูกผูกไว้ฮิวเมน CD134. 8 รูปที่ 31 ลักษณะการแข่งขัน ของฮิวเมไนซ์ของมนุษย์ IgG4ic แอนติ - ฮิวเมนแอนติบอดีโคลน CD134 12113 รุ่น VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) และ VL2H1, VL2VH2, VL2VH3 (B) ด้วยเมาส์ของผู้ปกครอง biotinylated แอนติ - ฮิวเมน CD134 แอนติบอดี โคลน 12113 (ที่ EC50 20 นาโนกรัม / มิลลิลิตร) สำหรับจับกับจานที่ถูกผูกไว้5 recombinant ฮิวเมน CD134. รูปที่ 32 ระดับการแสดงออกของยาวเต็มรูปแบบของมนุษย์ใน CD134 transfected เสถียร 293- F เซลล์โคลนเส้น 5 (A) และโคลนไม่ . 23 (ข) รูปที่ 33 ลักษณะการผูกของฮิวเมไนซ์ของมนุษย์ IgG4ic แอนติ - ฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 20E5 รุ่น VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) และ VL2H1, VL2VH2 10 VL2VH3 (B) กับพื้นผิว ฮิวเมน CD134 ใน transfected เสถียร 293-F สายพันธุ์ของเซลล์โคลนไม่มี 5. รูปที่ 34 ลักษณะการผูกของฮิวเมไนซ์ของมนุษย์ IgG4K แอนติ - ฮิวเมนแอนติบอดีโคลน CD134 12113 รุ่น VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) และ VL2H1, VL2VH2, VL2VH3 (B) กับพื้นผิวฮิวเมน CD134 ในเสถียร transfected 293-F สายพันธุ์ของเซลล์15 โคลนไม่มี 5. รูปที่ 35 ลักษณะการผูกของฮิวเมไนซ์ของมนุษย์ IgG4K แอนติ - ฮิวเมนแอนติบอดีโคลน CD134 12113 รุ่น VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) และ VL2H1, VL2VH2, VL2VH3 (B) กับพื้นผิวฮิวเมน CD134 ใน transfected เสถียร 293-F เซลล์โคลนเส้น 23. 20 รูปที่ 36. ผูกพันของฮิวเมไนซ์ของมนุษย์ IgG4ic แอนติ - ฮิวเมนแอนติบอดีโคลน CD134 12113 รุ่น VL1H1, VL1VH2, VL1VH3, VL2H1, VL2VH2, VL2VH3 293-F เซลล์ transfected transiently ที่มีความยาวเต็มรูปแบบ ฮิวเมน CD134 สร้าง (แสดง `CRD1) หรือตัดทอนต่างๆฮิวเมน CD134 สร้าง (แสดง` CRD3 'และ `CRD4'). 25 รูปที่ 37. การผูกของฮิวเมไนซ์ของมนุษย์ IgG4K แอนติ - ฮิว เมน CD134 แอนติบอดีโคลน20E5 รุ่น VL1H1 ในสายพันธุ์ของเซลล์ 293-F transfected transiently ที่มีความยาวเต็มรูปแบบฮิวเมนCD134 สร้าง (แสดง `CRD1) หรือโครงสร้างต่างๆที่ถูกตัดทอนฮิวเมน CD134 (แสดง` CRD3 'และ `CRD4) รูปที่ 38 ลักษณะการผูกเมาส์ของผู้ปกครอง biotinylated ต่อต้านมนุษย์30 CD134 แอนติบอดีโคลน 12,113 กับพื้นผิวฮิวเมน CD134 ใน transfected เสถียร293-F เซลล์โคลนเส้น 5. 9 รูปที่ 39 ลักษณะการแข่งขันของฮิวเมไนซ์ของมนุษย์ IgG4K แอนติ - ฮิวเมนแอนติบอดีโคลน CD134 12113 รุ่น VL1H1, VL1VH2, VL1VH3 (A) และ VL2H1, VL2VH2, VL2VH3 (B) ด้วยเมาส์ของผู้ปกครอง biotinylated แอ นติ - ฮิวเมน CD134 แอนติบอดีโคลน 12H3 (ที่ EC50 700 นาโนกรัม / มิลลิลิตร) สำหรับผลผูกพันไปยังพื้นผิวของมนุษย์ 5 CD134 ใน transfected เสถียร 293-F เซลล์โคลนเส้น 5. รูปที่ 40 downregulation ในการแสดงออกใน FOXP3 ขยาย Tregs (CD4 + CD25 + CD127 สลัว -) โดย OX4OL ที่ละลายน้ำได้และเมาส์ที่ละลายน้ำได้แอนติ - ฮิวเมน CD134 12,113 IgG1 แอนติบอดีที่ความเข้มข้นที่ระบุ แกน Y แสดง FOXP3 เรขาคณิตหมายถึงความเข้มของแสง(GeoMFI) ตรวจพบโดยใช้แอนติบอดีต่อต้าน FOX3P คู่กับ PE 10 m12H3 = 12,113 เมาส์ IgG1 ข้อมูลที่เป็นตัวแทนของกลุ่มตัวอย่างที่เพิ่มขึ้นสามเท่าจากหนึ่งในผู้บริจาค. รูปที่ 41 ของ Histogram มาซึ่งแสดงการวิเคราะห์ผลกระทบผลยับยั้งของTregs ในการขยาย Teff โดยแผ่นผูกพันฮิวเมไนซ์แอนติ - ฮิวเมน CD134 12113

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

รูปที่ 6 พร้อมกัน ( แอนติ - เมาส์ฮิวเมน cd134 แอนติบอดีโคลนหรือโคลน 12113 20e5 กับฮิวเมน ox4ol บน pha-m-stimulated ฮิวเมน cd134
10 แสดงลิมโฟไซต์ T .
รูปที่ 7 แน่นอนเวลาผลของการแอนติ - ฮิวเมนทันที / แอนติ - ฮิวเมน cd28
กระตุ้นการสร้างแอนติบอดีลูกปัดบนพื้นผิวฮิวเมน cd134 การแสดงออกของมนุษย์เอฟเฟคเตอร์ T ลิมโฟไซต์ ( teffs ) และกฎระเบียบลิมโฟไซต์ ( ทีเร็กส์ ) t .
รูปที่ 8 ผลของการสัมผัสกับรังสีแอนติ - เมาส์ฮิวเมน cd134 15 12113 แอนติบอดีโคลนหรือโคลน 20e5 หรือฮิวเมน ox4ol ในการแพร่กระจายของ pha-m-stimulated
ฮิวเมน cd134 แสดง T ลิมโฟไซต์ .
รูปที่ 9 ผลของการรวมเมาส์แอนติ - ฮิวเมน cd134 แอนติบอดีโคลน 12113
กับฮิวเมน ox4ol หรือเมาส์แอนติ - ฮิวเมน cd134 แอนติบอดีโคลน 20e5 ด้วย
ฮิวเมน ox4ol ในการแพร่กระจายของ pha-m-stimulated ฮิวเมน cd134 แสดงลิมโฟไซต์ T
20
รูปที่ 10ผลการแอนติ - เมาส์ฮิวเมน cd134 12113 แอนติบอดีโคลนหรือโคลน 20e5 หรือฮิวเมน ox4ol ในการแพร่กระจายของแอนติ - ฮิวเมนทันที / แอนติ - ฮิวเมน cd28 แอนติบอดีกระตุ้นลูกปัดกระตุ้นฮิวเมน cd134 แสดงมนุษย์
เอฟเฟคเตอร์ T ลิมโฟไซต์ .
25 รูปที่ 11ผลการแอนติ - เมาส์ฮิวเมน cd134 แอนติบอดีโคลนหรือโคลน 12113
20e5 หรือฮิวเมน ox4ol ในการแพร่กระจายของแอนติ - ฮิวเมนทันที / แอนติ - ฮิวเมน cd28 แอนติบอดีกระตุ้นลูกปัดกระตุ้นฮิวเมน cd134 แสดงมนุษย์บังคับ T ลิมโฟไซต์ .
รูปที่ 12ผลของแอนติ - เมาส์ฮิวเมน cd134 แอนติบอดีโคลน 12113 ในมนุษย์ ( 30 ox4ol proliferation ของแอนติ - ฮิวเมนทันที / แอนติ - ฮิวเมน cd28 แอนติบอดี
แสนงอนลูกปัดกระตุ้นฮิวเมน cd134 แสดงเอฟเฟคเตอร์มนุษย์ ( A ) และ ( B ) T ลิมโฟไซต์ข้อบังคับ
.
6







รูปที่ 13ผลการแอนติ - เมาส์ฮิวเมน cd134 12113 แอนติบอดีโคลนหรือโคลน 20e5 หรือฮิวเมน ox4ol บนฮิวเมน cd134 แสดงมนุษย์บังคับ T ลิมโฟไซต์ - เพื่อปราบปรามฮิวเมน cd134 แสดงมนุษย์เอฟเฟคเตอร์ T ลิมโฟไซต์ proliferation .
5 รูปที่ 14ผูกพันของมนุษย์ที่ igg4x แอนติ - ฮิวเมน cd134 แอนติบอดีโคลน
20e5 ( ลบและบวก 2 ) ทันที / cd28 ลูกปัดกระตุ้นฮิวเมน cd134 CD4 CD8 T T ลิมโฟไซต์แสดงและลิมโฟไซต์ .
รูปที่ 15ผลของมนุษย์ที่ igg4k แอนติ - ฮิวเมน cd134 แอนติบอดีโคลน 20e5 หรือฮิวเมน ox4ol ในการแพร่กระจายของ pha-m-stimulated ฮิวเมน cd134 แสดง 10 T
ลิมโฟไซต์ .
รูปที่ 16ผลของการสัมผัสกับรังสีที่มนุษย์ igg4x แอนติ - ฮิวเมน cd134 แอนติบอดีโคลน 20e5 หรือฮิวเมน ox4ol ในการแพร่กระจายของ pha-m-stimulated ฮิวเมน cd134 แสดง T ลิมโฟไซต์
รูปที่ 17 ผลของการรวมที่มนุษย์ igg4k แอนติ - ฮิวเมน cd134 แอนติบอดี 15 โคลน 20e5 กับฮิวเมน ox4ol ในการแพร่กระจายของ pha-m-stimulated มนุษย์
cd134 แสดง T ลิมโฟไซต์ .
รูปที่ 18 ผลของมนุษย์ที่ igg4k แอนติ - ฮิวเมน cd134 แอนติบอดีโคลน 20e5 หรือฮิวเมน ox4ol ในการแพร่กระจายของ ( ลบและบวก 2 ) ทันที / cd28 ลูกปัด --
t การฮิวเมน cd134 แสดงลิมโฟไซต์ .
20 รูปที่ 17 ผูกพันของแอนติ - เมาส์ฮิวเมน cd134 แอนติบอดีโคลน 12113 20e5
และไม่ลดลง และลดลงฮิวเมน cd134 : recombinant โปรตีน FCY มนุษย์ ( ก ) ตรวจสอบการลดไม่ลด ( a , b ) และ ( c , d ) เงื่อนไข ( ข ) รูปแบบการอพยพของโปรตีนรีคอมบิแนนท์ฮิวเมน cd134 : FCY
มนุษย์ ( rhucd134 ) ภายใต้การลดโนน ( A , B ) และการลด ( C , D ) สภาพ 25 ใช้เหล่านี้น่าจะเป็น Brilliant Blue staining ( c ) blot ตะวันตกไม่ลด ( AB )
ลด ( C , D ) ~ i ฮิวเมน cd134 : มนุษย์ FCY ของโปรตีนตาก
เมาส์แอนติบอดีควบคุมและ igg1x ( migg1 ) หรือแอนติ - เมาส์ฮิวเมน cd134
แอนติบอดีโคลนและ 12113 20e5 ( m12113 และ m20e5 ตามลำดับ )
รูปที่ 20แสดงแผนผังของโดเมนที่อุดมไปด้วยกรดอะมิโน ( CRD ) ยาว 30 ฮิวเมน cd134 ( กล่าวคือเป็น ` crd1 ' ) และในรูปแบบต่าง ๆ ตัดฮิวเมน cd134
( กล่าวคือเป็น ` ` crd3 crd2 ' , ' ' crd4 ' และ ' ตัด ( TC ) crd4 ' )
รูปที่ 21ผูกพันของแอนติ - เมาส์ฮิวเมน cd134 แอนติบอดีโคลน 12113 20e5 บนบรรทัดและเซลล์ 293-f บุคคลหรือสิ่งที่อยู่ชั่วคราว transfected กับเต็มตัวฮิวเมน cd134 สร้าง








7 ( แทน crd1 ` ' ) หรือตัดฮิวเมน cd134 โครงสร้างต่าง ๆ ( แทน crd2 ` ' ` crd3 ' ' crd4 ' และ ' ตัด ( TC ) crd4 ' )
รูปที่ 22รวมของที่ igg4x มนุษย์และ / หรือ igg1x แอนติ - ฮิวเมน cd134
แอนติบอดีโคลน 12113 20e5 บนบรรทัดและเซลล์ 293-f บุคคลหรือสิ่งที่อยู่ชั่วคราว transfected 5 เต็มฮิวเมน cd134 สร้าง ( กล่าวคือ ` crd1 ' ) หรือต่างๆตัด
ฮิวเมน cd134 โครงสร้าง ( แทน crd2 ` ' ` crd3 ' ' crd4 ' และ ' ตัด ( ทีซี crd4 )

' ) รูปที่ 23ผูกพันของแอนติ - เมาส์ฮิวเมน cd134 แอนติบอดีโคลน 12113 ( ) และมนุษย์ igg4x
ที่แอนติ - ฮิวเมน cd134 แอนติบอดีโคลน 12h3 ( B ) กับมนุษย์ 10 cd134 ได้มาเปปไทด์ ซึ่งสอดคล้องกับลำดับกรดอะมิโนของปลาย
crd3 a1-module-crd4 ซับโดเมน อัล โม ( ตามคำนิยามของ latza et
อัล Eur J immunol 1994 ; 24 : 677 683 ) .
รูปที่ 24ตัวแปรภูมิภาคของโมโนโคลนอลแอนติบอดี 20e5 .
~ ( m20e5vh ตัวแปรภูมิภาค และ m20e5vl ) ; ฮิวเมไนซ์ 20e5 ตัวแปร 15 หนักโซ่ ( hu20e5_hl hu20e5_h2 , และ hu20e5 H3 ) และฮิวเมไนซ์ 20e5
ตัวแปรโซ่ไฟ ( hu20e5_11 และ hu20e5_12 ) m20e5vh : seq id : 4 ;
m20e5vl : หมายเลข seq ไม่มี 5 .
รูปที่ 25 ตัวแปรภูมิภาคของโมโนโคลนอลแอนติบอดี 12113 .
ภูมิภาค ( m12h3vh ~ ตัวแปรและตัวแปร m12h3vl ) ; ฮิวเมไนซ์ 12h3 20 หนักโซ่ ( hul2h3_hl hul2h3_h2 , และ hu12h3_h3 ) และฮิวเมไนซ์ 12113
ตัวแปรโซ่ไฟ ( hul2h3_ll และ hu12113_12 ) m12h3vh : seq id : 12 ;
m12h3vl : seq id : 13 .
รูปที่ 26 ฮิวเมไนซ์ 20e5 ตัวแปรภูมิภาค รูปที่ 27 ฮิวเมไนซ์ 12113 ตัวแปรภูมิภาค .
25 รูปที่ 28ลักษณะการจับฮิวเมไนซ์มนุษย์ igg4k แอนติ - ฮิวเมน cd134
แอนติบอดีโคลน 20e5 รุ่น vl1h1 vl1vh2 vl1vh3 , , ( ) และ vl2h1 vl2vh2 vl2vh3 , , ( b ) กับจานไว้ใช้ฮิวเมน cd134 .
รูปที่ 29 ลักษณะการจับฮิวเมไนซ์มนุษย์ igg4k แอนติ - ฮิวเมน cd134
แอนติบอดีโคลน 12113 รุ่น vl1h1 vl1vh2 , vl1vh3 ( ) และ vl2h1 , ,vl2vh2 30 vl2vh3 ( B ) กับจานไว้ใช้ฮิวเมน cd134 .
รูปที่ 30 ผูก ลักษณะของไลเมาส์ต่อต้านมนุษย์
cd134 ผู้ปกครองแอนติบอดีโคลนกับแผ่น 12113 ผูกพันแบบฮิวเมน cd134 .
8






รูปที่ 31 ลักษณะการแข่งขันของมนุษย์ฮิวเมไนซ์ igg4ic แอนติ - ฮิวเมน cd134 แอนติบอดีโคลน 12113 รุ่น vl1h1 vl1vh2 , ,vl1vh3 ( ) และ vl2h1 vl2vh2 vl2vh3 , , ( B ) ของเมาส์แอนติไล - ฮิวเมน cd134
แอนติบอดีโคลน 12113 ( ที่ ec50 20 นาโนกรัม / มิลลิลิตร ) เพื่อจับกับจาน cd134 ฮิวเมนผูกพัน
5 ~ i .
รูปที่ 32 ระดับการแสดงออกของมนุษย์เต็มตัว cd134 ในเสถียร transfected 293 -
F ไพรที โคลนหมายเลข 5 ( ก ) และ ( ข ) ไม่โคลน 23 .
รูปที่ 33ลักษณะการจับฮิวเมไนซ์มนุษย์ igg4ic แอนติ - ฮิวเมน cd134
แอนติบอดีโคลน 20e5 รุ่น vl1h1 vl1vh2 vl1vh3 , , ( ) และ vl2h1 vl2vh2 , 10 , vl2vh3 ( B ) กับ cd134 ฮิวเมนผิวอย่างถาวร transfected โคลนเซลล์ 293-f หมายเลข 5 สาย
.
รูปที่ 34 .ลักษณะการจับฮิวเมไนซ์มนุษย์ igg4k แอนติ - ฮิวเมน cd134 แอนติบอดีโคลน 12113 รุ่น vl1h1 vl1vh2 vl1vh3 , , ( ) และ vl2h1 vl2vh2 vl2vh3 , , ( b ) กับ cd134 ฮิวเมนผิวอย่างถาวร transfected Cell 293-f
15 โคลนหมายเลข 5 .
รูปที่ 35 ลักษณะการจับฮิวเมไนซ์มนุษย์ igg4k แอนติ - ฮิวเมน cd134 12113 รุ่น vl1h1 แอนติบอดีโคลน ,vl1vh2 vl1vh3 , ( ) และ vl2h1 vl2vh2 vl2vh3 , , ( B ) กับ cd134 ฮิวเมนผิวอย่างถาวร transfected โคลนเซลล์ 293-f หมายเลข 23 .
20 รูปที่ 36 ผูกพันของฮิวเมไนซ์มนุษย์ igg4ic แอนติ - ฮิวเมน cd134 แอนติบอดีโคลน
12113 รุ่น vl1h1 vl1vh2 vl1vh3 vl2h1 , , , vl2vh2 vl2vh3 บน 293-f
, ,เซลล์เส้น transfected กับบุคคลหรือสิ่งที่อยู่ชั่วคราวแบบเต็มตัวฮิวเมน cd134 สร้าง ( กล่าวคือ ` crd1 ' ) หรือตัดฮิวเมน cd134 โครงสร้างต่าง ๆ ( แทน crd3 ` ' และ ` crd4 ' )
25 รูปที่ 37 ผูกพันของฮิวเมไนซ์มนุษย์ igg4k แอนติ - ฮิวเมน cd134 แอนติบอดีโคลน
20e5 รุ่น vl1h1 บนบรรทัดเซลล์ 293-f เต็มตัว
transfected กับบุคคลหรือสิ่งที่อยู่ชั่วคราวฮิวเมน cd134 สร้าง ( กล่าวคือ ` crd1 ' ) หรือตัดฮิวเมน cd134 โครงสร้างต่าง ๆ ( แทน crd3 ` ' และ ` crd4 ' )
รูปที่ 38 ลักษณะการจับเมาส์ต่อต้านผู้ปกครองไลมนุษย์
30 cd134 แอนติบอดีโคลน 12113 กับ cd134 ฮิวเมนผิวอย่างถาวร transfected
โคลนเซลล์ 293-f . 5 .
9







รูปที่ 39ลักษณะการแข่งขันของมนุษย์ฮิวเมไนซ์ igg4k แอนติ - ฮิวเมน cd134 แอนติบอดีโคลน 12113 รุ่น vl1h1 vl1vh2 vl1vh3 , , ( ) และ vl2h1 vl2vh2 vl2vh3 , , ( B ) ของเมาส์แอนติไล - ฮิวเมน cd134
แอนติบอดีโคลน 12h3 ( ที่ ec50 700 นาโนกรัม / มิลลิลิตร ) เพื่อจับกับผิวของมนุษย์ 5 cd134 บนโคลน transfected อย่างถาวร เซลล์ 293-f . 5 .
รูปที่ 40downregulation ของ foxp3 การแสดงออกในการขยายทีเร็กส์ ( CD4 cd25 cd127 ริบหรี่ ! - ) โดย ox4ol ละลายและละลายเมาส์แอนติ - ฮิวเมน cd134 12113 ( แอนติบอดีที่พบทั่วไป แกน Y แสดง foxp3 ค่าเฉลี่ยเรขาคณิต
เรืองแสงเข้ม ( geomfi ) ตรวจพบแอนติบอดีที่ใช้ anti-fox3p คู่ 10 PE m12h3 = เมาส์ ( 12113 . ข้อมูลที่แสดงถึงตัวอย่างทำสำเนาสามฉบับหนึ่ง

จากผู้บริจาครูปที่ 41 . การวิเคราะห์ความถี่ของ facs แสดงยับยั้งผลของแรงในการ teff
ทีเร็กส์โดยแผ่นผูกพันฮิวเมไนซ์แอนติ - ฮิวเมน cd134 12113