hMSCs contaminated with HeLa cells

hMSCs contaminated with HeLa cells were fixed with 4% paraformaldehyde
in PBS (Nacalai Tesque) for 10 min at room temperature
(RT) and blocked in Blocking One (Nacalai Tesque) for
30 min at RT. The cells, then, were incubated with anti-HPV18 E7
antibody (8E2) (abcam) diluted at 1:500 in the blocking solution
(PBS containing 5% Blocking One) for 1 h at RT for primary staining,
and secondarily stained with goat anti-mouse IgG Alexa Fluor 488
(1:1000; Invitrogen) in the blocking solution for 45 min at RT. The
cells were mounted with VECTASGIELD mounting medium with
DAPI (VECTOR) and observed with a fluorescence microscope (

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

hMSCs ปนเปื้อน HeLa เซลล์ได้คง มี paraformaldehyde 4%ใน PBS (Nacalai Tesque) ใน 10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง(RT) และบล็อกในบล็อกหนึ่ง (Nacalai Tesque) สำหรับ30 นาทีที่ RT. เซลล์ แล้ว ถูก incubated กับ E7 HPV18 ป้องกันแอนติบอดี (8E2) (abcam) ทำให้เจือจางที่ 1: 500 ในการแก้ปัญหาการบล็อค(PBS ประกอบด้วย 5% บล็อกหนึ่ง) สำหรับ h 1 ที่ RT สำหรับย้อมสีหลักและทิ้งคราบเชื่อมกับแพะป้องกันเมาส์ IgG Alexa Fluor 488(1:1000 Invitrogen) ในการแก้ปัญหาการบล็อคสำหรับ 45 นาทีที่ RT.เซลล์ติดตั้ง VECTASGIELD ขนาดกลางติดกับDAPI (เวกเตอร์) และสังเกต ด้วยการ fluorescence กล้องจุลทรรศน์(

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

hMSCs ปนเปื้อนด้วยเซลล์ HeLa ได้รับการแก้ไขมี 4% paraformaldehyde
ในพีบีเอส (Nacalai Tesque) เป็นเวลา 10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง
(RT) และบล็อกในบล็อกหนึ่ง (Nacalai Tesque) สำหรับ
30 นาทีที่ RT เซลล์แล้วถูกบ่มที่มีการป้องกัน HPV18 E7
แอนติบอดี (8E2) (Abcam) เจือจางที่ 1: 500 ในการแก้ปัญหาการปิดกั้น
(พีบีเอสที่มี 5% ปิดกั้นหนึ่ง) เป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่ RT สำหรับการย้อมสีหลัก
และย้อมสีครั้งที่สองกับแพะ IgG ต่อต้านเมาส์ของ Alexa Fluor 488
(1: 1000; Invitrogen) ในการแก้ปัญหาการปิดกั้นสำหรับ 45 นาทีที่ RT
เซลล์ถูกติดตั้งที่มีขนาดกลางติดตั้ง VECTASGIELD กับ
DAPI (เวกเตอร์) และสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์เรืองแสง (

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

hmscs ปนเปื้อน Hela cells แก้ไขด้วย 4% พาราฟอร์มาลดิไฮด์
ใน PBS ( nacalai tesque ) สำหรับ 10 นาทีที่
อุณหภูมิห้อง ( RT ) และบล็อกในบล็อกหนึ่ง ( nacalai tesque )
30 นาทีที่ RT . เซลล์ นั้น ได้ถูกบ่มกับ anti-hpv18 E7
แอนติบอดี ( 8e2 ) ( ABCAM เจือจาง 1 : 500 ) ที่ ในบล็อกโซลูชั่น
( PBS ที่มี 5% บล็อก ) เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ในการ RT สำหรับการย้อมสี
ครั้งที่สองและเปื้อนแพะป้องกันเมาส์ IgG Alexa Fluor 488
( 000 ; Invitrogen ) ในบล็อกโซลูชั่นสำหรับ 45 นาทีที่ RT .
เซลล์ติดยึดกับ vectasgield กลางด้วย
dapi ( เวกเตอร์ ) และสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์ ( เรือง