2.3. Antimicrobial activity of NEW

2.3. Antimicrobial activity of NEW in vitro
2.3.1. In vitro assays
In the first assay was used NEW obtained from 0.1% w/v of sodium chloride or sodium bicarbonate solutions in tap water against P. fluorescens NCPPB 1964, P. marginalis667, and P. syringae PS1 as indicator strains; electrolyzed tap water without salts was used as a control. Each sample of NEW, 9.9 ml, was contaminated with 0.1 ml of bacterial suspension having OD600 = 0.3 ± 0.05 (about at 8 log cfu/ml). Contaminated NEW samples were incubated at 4 °C for 2 and 5 min afterwards 0.1 ml was diluted in 9.9 ml of sterile saline solution to dilute free chlorine potentially still having antimicrobial activity. Surviving bacteria were enumerated after incubation (24 h at 30 °C) of PCA plates seeded with decimal dilution, in sterile saline, of 1:100 NEW samples. Each strain was assayed three times, independently (N = 3). Based on results, 14 spoilagePseudomonas strains, as well as, P. aeruginosa DSM939, were used for an additionalin vitro assay by using the most probable number (MPN) method for enumeration of viable microbial cells. Three samples of NEW, produced from potassium chloride as electrolyte, were prepared after 2 h of electrolysis (4000 mg/L free chlorine, pH = 8.2, ORP = 846 mV). The NEW, diluted to 400, 200, and 100 mg/L of free chlorine, was inoculated as previously reported and incubated at 4 °C for 2 min. Inoculated NEW samples were decimally diluted four times in mPCB. Occurrence of visible microbial growth was recorded after 24 h at 25 °C; un-treated bacterial suspensions were used as a positive control. Absorbance value of test tubes without visible growth was recorded at 600 nm and compared with un-inoculated (blank) tubes. Test tubes were considered positive when OD600 readings were 0.050 higher than blank tubes. Calculation of MPN was obtained comparing the results with MPN tables ( Man, 1983). In order to avoid false negative results deriving from chlorine stressed cells, test tubes were incubated for additional 24 h at 30 °C. In this case the assay was performed a single time with three repetition for each strain (N = 3).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 ฤทธิ์ต้านจุลชีพของใหม่ในหลอดทดลอง
2.3.1 ในการตรวจหลอดทดลองในการทดสอบครั้งแรกที่ถูกนำมาใช้ใหม่ที่ได้รับจาก 0.1% w / v ของโซเดียมคลอไรด์หรือสารละลายโซเดียมไบคาร์บอเนตในน้ำประปากับพี fluorescens NCPPB 1964 marginalis667 พีและพี syringae PS1 เป็นตัวบ่งชี้สายพันธุ์;
น้ำประปาอิเล็กโทรไลเกลือโดยไม่ต้องถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุม ตัวอย่างแต่ละใหม่ 9.9 มล. ถูกปนเปื้อนด้วย 0.1 มล. ของการระงับแบคทีเรียมี OD600 = 0.3 ± 0.05 (ประมาณ 8 ล็อก cfu / ml) ที่ปนเปื้อนตัวอย่างใหม่ถูกบ่มที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2 และ 5 นาทีหลังจากนั้น 0.1 มิลลิลิตรเจือจางใน 9.9 มล. น้ำเกลือปลอดเชื้อเพื่อเจือจางคลอรีนอิสระที่อาจเกิดขึ้นยังคงมีฤทธิ์ต้านจุลชีพ เชื้อแบคทีเรียที่รอดตายหลังจากที่ถูกแจกแจงบ่ม (24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส) ของแผ่น PCA เมล็ดที่มีการลดสัดส่วนทศนิยมในน้ำเกลือฆ่าเชื้อ 1: 100 ตัวอย่างใหม่ แต่ละสายพันธุ์ได้รับการวิเคราะห์สามครั้งเป็นอิสระ (ยังไม่มี = 3) บนพื้นฐานของผล 14 spoilagePseudomonas สายพันธุ์เช่นเดียวกับพี aeruginosa DSM939 ถูกนำมาใช้สำหรับการทดสอบในหลอดทดลอง additionalin โดยใช้ตัวเลขน่าจะเป็นที่สุด (MPN) วิธีการนับของเซลล์จุลินทรีย์ที่ทำงานได้ สามตัวอย่างใหม่ที่ผลิตจากโพแทสเซียมคลอไรด์เป็นอิเล็กโทรไลได้จัดทำหลังจาก 2 ชั่วโมงของกระแสไฟฟ้า (4,000 มิลลิกรัม / ลิตรคลอรีนอิสระค่า pH = 8.2 ORP = 846 mV) ใหม่ลดลงเหลือ 400, 200, และ 100 มิลลิกรัม / ลิตรของคลอรีนอิสระได้รับการฉีดวัคซีนตามที่รายงานก่อนหน้านี้และบ่มที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2 นาที ตัวอย่างเชื้อใหม่ที่ถูกปรับลด decimally สี่ครั้งใน mPCB การเกิดขึ้นของเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ที่มองเห็นได้หลังจากที่ได้รับการบันทึก 24 ชั่วโมงที่ 25 ° C; ยกเลิกการรับการรักษาสารแขวนลอยแบคทีเรียถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมในเชิงบวก ค่าการดูดกลืนแสงของหลอดทดสอบการเจริญเติบโตโดยไม่ต้องมองเห็นได้ถูกบันทึกไว้ที่ 600 นาโนเมตรและเมื่อเทียบกับการยกเลิกเชื้อ (ว่าง) ท่อ หลอดทดลองได้รับการพิจารณาบวกเมื่อ OD600 อ่านได้ 0.050 สูงกว่าหลอดว่างเปล่า การคำนวณ MPN ที่ได้รับการเปรียบเทียบผลกับตาราง MPN (ผู้ชาย, 1983) เพื่อหลีกเลี่ยงผลลบผิดพลาดที่เกิดจากคลอรีนเซลล์เน้นหลอดทดลองถูกบ่มเพิ่มเติม 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส ในกรณีนี้การทดสอบได้ดำเนินการมาเป็นเวลาเดียวกับสามซ้ำสำหรับแต่ละสายพันธุ์ (ยังไม่มี = 3)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 ฤทธิ์ต้านจุลชีพของ
หลอดใหม่ 2.3.1 . ในหลอดทดลองใช้ในการทดสอบครั้งแรก
ใช้ใหม่ได้จาก 0.1 % W / V ของโซเดียม คลอไรด์ หรือ โซลูชั่น โซเดียมไบคาร์บอเนต ในน้ำประปากับ P . fluorescens ncppb 2507 , หน้า marginalis667 และหน้า syringae PS1 เป็นตัวบ่งชี้สายพันธุ์ ; เครื่องแยกสารประกอบน้ำประปาไม่มีเกลือถูกใช้เป็นตัวควบคุม แต่ละตัวอย่างของมล ใหม่ , 9.9 , ถูกปนเปื้อนด้วย 01 มิลลิลิตร bacterial suspension มี od600 = 0.3 ± 0.05 ( ประมาณ 8 log CFU / ml ) ตัวอย่างใหม่ที่อุณหภูมิ 4 องศา C 2 และ 5 นาทีหลังจากนั้น 0.1 มิลลิลิตร เจือจางใน 1 มิลลิลิตร ปลอดเชื้อ น้ำเกลือเจือจางคลอรีนที่อาจยังคงมีฤทธิ์ต้านจุลชีพ . ที่รอดตายแบคทีเรียถูกระบุหลังจากบ่ม ( 24 H 30 ° C ) ของ PCA จานเมล็ดกับทศนิยมเจือจางในน้ำเกลือปลอดเชื้อ , 100 ตัวอย่างใหม่ แต่ละสายพันธุ์มีปริมาณ 3 ครั้งอย่างอิสระ ( n = 3 ) บนพื้นฐานของผล 14 spoilagepseudomonas สายพันธุ์ รวมทั้ง P . aeruginosa dsm939 ถูกใช้เป็น additionalin นอร์เวย์โดยใช้หมายเลขที่น่าจะเป็นมากที่สุด ( MPN ) วิธีการในการใช้จุลินทรีย์เซลล์ 3 ตัวอย่างใหม่ ผลิตจากโพแทสเซียมคลอไรด์เป็นอิเล็กโทรไลต์ ,เตรียมหลังจาก 2 H ด้วยไฟฟ้า ( 4 , 000 มก. / ล. ฟรีคลอรีน pH = 8.2 , ORP = 846 MV ) ใหม่ , ประมาณ 400 , 200 และ 100 มก. / ล. คลอรีนเป็นเชื้อตามที่รายงานก่อนหน้านี้ และ บ่มที่ 4 ° C 2 นาทีจากตัวอย่างใหม่ decimally เจือจางสี่ครั้งใน mpcb . การมองเห็นได้จากการบันทึกหลัง 24 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 25 ° C ;และรักษาแบคทีเรียช่วงล่างใช้เป็นตัวควบคุมบวก ค่าการดูดกลืนแสงของหลอดทดลอง โดยไม่มีการปรากฏเป็นบันทึกที่ 600 นาโนเมตรและเมื่อเทียบกับสหประชาชาติ หัวเชื้อ ( ว่าง ) หลอด หลอดทดสอบถูกถือว่าเป็นบวกเมื่ออ่าน od600 เป็น 0.050 สูงกว่าหลอดเปล่า การเปรียบเทียบผลลัพธ์ที่ได้กับเมื่อได้รับตาราง MPN ( 1983 )เพื่อหลีกเลี่ยงลบปลอมผลอนุพันธ์จากคลอรีนเน้นเซลล์หลอดทดสอบถูกบ่มเพิ่ม 24 H ที่ 30 องศา ในกรณีนี้ ( แสดงเวลาเดียวกับสามซ้ำสำหรับแต่ละสายพันธุ์
( n = 3 )