Sulphur amino acids (cysteine and methionine) were determined as cysteic acid and methionine sulphone, respectively, by a Biochrom 20 Plus (Pharmacia, Cambridge, UK) amino acid analyser. Before the acid hydrolysis, a performic oxidation was done.
Tryptophan was determined after alkaline hydrolysis of the proteins and a SP 8800 HPLC (Spectra physics, San Jose, CA, USA) analysis at 280 nm, with a XTERRA RP18 (4.6 × 150 mm; 3.5 μm) column. The temperature of the column was kept at 45 °C and the injection volume was 5 μl. Flow rate was 1 ml/min with a mixture of solvent A (760 ml of sodium acetate buffer (0.07 M)/triethanolamine (0.025% v/v) adjusted to pH 4.5 with glacial acetic acid + 40 ml of methanol) and solvent B (acetonitrile containing 0.05% (w/v) trifluoroacetic acid). The following gradients (solvent A/solvent B/min) were used: 0/100/0; 0/100/10; 50/50/5; 50/50/5; 0/100/5; 0/100/5. Separated tryptophan was quantified by using α-methyl-tryptophan as reference.
Sulphur amino acids (cysteine and methionine) were determined as cysteic acid and methionine sulphone, respectively, by a Biochrom 20 Plus (Pharmacia, Cambridge, UK) amino acid analyser. Before the acid hydrolysis, a performic oxidation was done.Tryptophan was determined after alkaline hydrolysis of the proteins and a SP 8800 HPLC (Spectra physics, San Jose, CA, USA) analysis at 280 nm, with a XTERRA RP18 (4.6 × 150 mm; 3.5 μm) column. The temperature of the column was kept at 45 °C and the injection volume was 5 μl. Flow rate was 1 ml/min with a mixture of solvent A (760 ml of sodium acetate buffer (0.07 M)/triethanolamine (0.025% v/v) adjusted to pH 4.5 with glacial acetic acid + 40 ml of methanol) and solvent B (acetonitrile containing 0.05% (w/v) trifluoroacetic acid). The following gradients (solvent A/solvent B/min) were used: 0/100/0; 0/100/10; 50/50/5; 50/50/5; 0/100/5; 0/100/5. Separated tryptophan was quantified by using α-methyl-tryptophan as reference.
การแปล กรุณารอสักครู่..

กรดอะมิโนหลายชนิด ( กรดอะมิโนเมทไธโอนีนและ ) ถูกกำหนดเป็นสิ่งแวดล้อม และเมทไธโอนีน sulphone ตามลำดับ โดย biochrom 20 บวก ( มุ่งมั่น , เคมบริดจ์ , UK ) กรดอะมิโน . ก่อนที่กรด , ออกซิเดชัน performic แล้ว
ทริปตั้งใจหลังจากการย่อยสลายด่าง ของโปรตีนและ SP 8800 HPLC ( ฟิสิกส์ , Spectra San Jose , CA , USA ) การวิเคราะห์ที่ 280 นาโนเมตรกับ xterra rp18 ( 4.6 × 150 มม. ; 3.5 μ M ) คอลัมน์ อุณหภูมิของคอลัมน์ที่ถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 45 องศาซี และปริมาณการฉีด 5 μลิตรอัตราการไหลเท่ากับ 1 มิลลิลิตรต่อนาที ด้วยส่วนผสมของตัวทำละลาย ( 760 กรัม โซเดียมอะซิเตทบัฟเฟอร์ ( 0.07 เมตร ) / ไตร 0.025 % v / v ) ปรับ pH 4.5 กับกรดแอซีติก 40 ml ของเมทานอล ) และตัวทำละลาย B ( ไนประกอบด้วย 0.05% ( w / v ) กรดไตรฟลูออโรอะซิติก )การไล่ระดับสีต่อไปนี้ ( ตัวทำละลายตัวทำละลาย A / B / มิน ) จำนวน : 0 / 100 / 0 ; 0 / 100 / 10 ; 50 / 50 / 50 / 50 / 5 ; 5 ; 0 / 100 / 5 ; 0 / 100 / 5 แยกทริปถูกวัดโดยใช้แอลฟาเมทิลทริป เป็นข้อมูลอ้างอิง
การแปล กรุณารอสักครู่..
