2.3. Detection of antagonistic acti

2.3. Detection of antagonistic activity
For detection of antagonistic activity, an agar spot test was
used. The agar spot test was a modification of that described by
Schillinger and Lucke (1989). Approximately 104 CFU/ml of the
strains to be tested for production of an antimicrobial compound
were spotted onto the surface of MRS agar plates (1.5% agar) and
incubated for 48 h at 37 C. This allowed colonies to develop. The
plates were overlaid with 10 ml of Nutrient soft agar (0.75% agar).
The overlay agar was seeded with 104 cfu/ml of the pathogenic
bacteria to be tested for sensitivity (Escherichia coli, Staphylococcus
aureus and Salmonella sp.). After incubation for 24 h at 37 C the
plates were checked for inhibition zone diameters. Inhibition was
scored as positive if the width of the clear zone around the colonies
of the producer strain was 10 mm or larger.
Strains exhibiting antagonistic activities against pathogenic
bacteria were investigated for their antimicrobial compounds as
described byAslim, Yuksekdag, Sarikaya, and Beyatli (2005). Strains
of LAB were grown for 24 h at 37 C in 10 ml of MRS broth and then
centrifuged at 9500g for 10 min. Three samples of the supernatant
were taken from each strain of LAB. Samples 1 and 2 were adjusted
to pH 6.5 with NaOH (1 N) to rule out acid inhibition. For sample 2,
a catalase solution (Fluka, Germany) (300 U/ml in PBS buffer, pH 7)
was added to rule out inhibition from hydrogen peroxide. For
sample 3, the supernatant was used as a control. The antagonistic
activity of the three samples was detected using the well diffusion
agar method (Papamaloni, Tzanetakis, Tzanetaki, & Kotzekidou,
2003). Twenty ml of soft BHI agar (containing 1.0% agar) were
poured on sterile plates and inoculated with an overnight culture of
pathogenic bacteria (about 107 cfu/ml). After solidification, wells
were perforated with a sterile 7 mm cork borer. The culturefiltrates
(50 ml) were placed in each well. The plates were incubated at 37 C
and examined after 24 h for clear zones showing the pathogenic
bacteria inhibition. The diameters of the inhibition zones were
measured and the diameter of the well, 7 mm, was subtracted from
the total zone diameter.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3 การตรวจสอบของกิจกรรมที่เป็นปฏิปักษ์
สำหรับการตรวจสอบของกิจกรรมต่อต้านการทดสอบจุดวุ้น
ถูกใช้ ทดสอบจุดวุ้นคือการปรับเปลี่ยนจากการที่อธิบายไว้โดย
Schillinger และ lucke (1989) ประมาณ 104 / โคโลนีมิลลิลิตร
สายพันธุ์ได้รับการทดสอบสำหรับการผลิตสารต้านจุลชีพ
ถูกพบบนพื้นผิวของแผ่น mrs วุ้น (1.5% วุ้น) และ
บ่มเป็นเวลา 48 ชั่วโมงที่ 37 คนี้ได้รับอนุญาตอาณานิคมในการพัฒนา
แผ่นถูกบุด้วย 10 มิลลิลิตรของสารอาหารวุ้นนุ่ม (0.75% วุ้น).
วุ้นหุ้มเมล็ดที่ 104 / ml โคโลนีของเชื้อแบคทีเรียที่ทำให้เกิดโรค
ได้รับการทดสอบเพื่อความไว (Escherichia coli, Staphylococcus aureus
และเชื้อเอสพี ) หลังจากการบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ 37 ค
แผ่นถูกตรวจสอบขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางโซนยับยั้ง ยับยั้งเป็น
คะแนนเป็นบวกถ้าความกว้างของวงใสรอบโคโลนี
ของสายพันธุ์ที่ผลิตได้ 10 มม. หรือขนาดใหญ่.
สายพันธุ์การแสดงกิจกรรมที่เป็นปฏิปักษ์ต่อเชื้อแบคทีเรียที่ทำให้เกิดโรค
การตรวจสอบสารต้านจุลชีพของพวกเขาเป็น
byaslim อธิบาย yuksekdag, Sarikaya และ beyatli (2005)
สายพันธุ์ของห้องปฏิบัติการได้รับการปลูกเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ 37 คใน 10 มิลลิลิตรของน้ำซุป mrs แล้ว
หมุนเหวี่ยงที่ 9500g เป็นเวลา 10 นาที สามตัวอย่างของการใส
ถูกพรากไปจากสายพันธุ์ของแต่ละห้องปฏิบัติการ ตัวอย่างที่ 1 และ 2 ได้รับการปรับค่าพีเอช
6.5 ด้วย NaOH (1 n) การออกกฎการยับยั้งกรด สำหรับตัวอย่าง 2
แก้ปัญหา catalase (หนู, เยอรมนี) (300 u / ml ในบัฟเฟอร์ pbs, ph 7)
ถูกเพิ่มเข้ามาในการออกกฎการยับยั้งจากไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ เพื่อ
ตัวอย่าง 3 ใสถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุม ศัตรู
กิจกรรมของทั้งสามตัวอย่างที่ถูกตรวจพบโดยใช้ทั้งวิธีการแพร่
วุ้น (papamaloni, tzanetakis, tzanetaki, & kotzekidou
2003) ยี่สิบมิลลิลิตรของอาหารเลี้ยงเชื้อ BHI อ่อน (ที่มี 1.0% วุ้น) เป็น
เทลงบนแผ่นผ่านการฆ่าเชื้อและเชื้อด้วยวัฒนธรรมในชั่วข้ามคืนของ
แบคทีเรีย (ประมาณ 107 โคโลนี / มล. ) หลังจากการแข็งตัวหลุม
ถูกเจาะด้วยหมัน 7 มม. เจาะไม้ก๊อก culturefiltrates
(50 มล. ) ถูกวางไว้ในแต่ละดี แผ่นถูกบ่มที่ 37 c
และตรวจสอบหลัง 24 ชั่วโมงสำหรับโซนที่ชัดเจนที่แสดงให้เห็นทำให้เกิดโรค
แบคทีเรียยับยั้ง ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางของโซนยับยั้งถูก
และวัดเส้นผ่าศูนย์กลางของดี, 7 มม. ถูกหักออกจาก
เส้นผ่าศูนย์กลางโซนรวม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 การตรวจสอบกิจกรรมต่อต้าน
ตรวจกิจกรรมต่อต้าน การทดสอบการจุด agar
ใช้ Modification ของที่อธิบายโดยสำหรับการทดสอบจุด agar
Schillinger และ Lucke (1989) ประมาณ 104 CFU/ml ของ
สายพันธุ์ที่จะทดสอบสำหรับการผลิตของสารประกอบจุลินทรีย์
ถูกพบบนพื้นผิวของแผ่น MRS agar (1.5% agar) และ
incubated สำหรับ h 48 ที่ 37 เซลเซียส นี้อาณานิคมเพื่อพัฒนาได้
แผ่นถูก overlaid กับ 10 ml ของธาตุอาหารนุ่ม agar (agar 0.75%)
agar ซ้อนทับถูก seeded กับ 104 cfu/ml ของการอุบัติ
แบคทีเรียสามารถทดสอบความไว (Escherichia coli, Staphylococcus
หมอเทศข้างลาย และซัล sp.) หลังจากฟักตัวใน 24 ชมที่ 37 C
แผ่นถูกตรวจสอบยับยั้งโซนสมมาตร ถูกยับยั้ง
คะแนนเป็นบวกถ้าความกว้างของโซนชัดเจนทั่วอาณานิคม
ของโปรดิวเซอร์ที่ ต้องใช้เป็น 10 มม. หรือใหญ่กว่า
สายพันธุ์อย่างมีระดับกิจกรรมต่อต้านกับอุบัติ
แบคทีเรียถูกสอบสวนในสารของจุลินทรีย์เป็น
อธิบาย byAslim, Yuksekdag, Sarikaya และ Beyatli (2005) สายพันธุ์
ของ LAB ได้เติบโตขึ้นใน 24 ชมที่ 37 C ใน 10 ml ของ MRS ซุปแล้ว
centrifuged ที่ 9500g สำหรับ 10 นาที ตัวอย่างสามของ supernatant
ได้มาจากแต่ละต้องใช้ของห้องปฏิบัติการ ตัวอย่างที่ 1 และ 2 ได้ปรับปรุง
ไปค่า pH ที่ 6.5 กับ NaOH (1 N) ยับยั้งการเปลี่ยนกรดออกกฎ สำหรับตัวอย่าง 2,
โซลูชัน catalase (Fluka เยอรมนี) (300 U/ml ใน PBS บัฟเฟอร์ pH 7)
เพิ่มออกยับยั้งจากไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ สำหรับ
ตัวอย่าง 3, supernatant ถูกใช้เป็นตัวควบคุม การต่อต้าน
กิจกรรมตัวอย่างสามพบใช้แพร่ดี
วิธี agar (Papamaloni, Tzanetakis, Tzanetaki & Kotzekidou,
2003) ได้ 20 ml ของ agar BHI นุ่ม (มี 1.0% agar)
poured บนแผ่นกอซ และ inoculated กับวัฒนธรรมค้างคืน
อุบัติแบคทีเรีย (ประมาณ 107 cfu/ml) หลังจาก solidification, wells
ได้ perforated กับ borer เป็นคอร์กมม. 7 กระบอก Culturefiltrates
(50 ml) ไว้ในแต่ละดี แผ่นก็ incubated ที่ 37 C
และตรวจสอบหลังจาก h 24 สำหรับโซนชัดเจนแสดงอุบัติการ
ยับยั้งแบคทีเรีย ปัจจุบันโซนยับยั้งได้
วัด และเส้นผ่าศูนย์กลางดี 7 มม ถูกลบจาก
เส้นผ่าศูนย์กลางรวมโซน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 . การตรวจจับของกิจกรรมความเป็นศัตรูกัน
ซึ่งจะช่วยในการตรวจจับของกิจกรรมการทดสอบความเป็นศัตรูกันจุดสาหร่ายทะเลที่เป็น
ซึ่งจะช่วยนำไปใช้ การทดสอบจุดสาหร่ายทะเลที่เป็น modification ของที่อธิบายไว้โดย
schillinger และ lucke ( 1989 ) ประมาณ 104 CFU ,/ ML ของ
พันธุ์ได้รับการทดสอบการผลิตของกลุ่มยาปฎิชีวนะชนิดผสม
ซึ่งจะช่วยเป็นด่างลงบนพื้นผิวของนางสาหร่ายแผ่นความร้อน( 1.5% สาหร่ายทะเล)และ
incubated สำหรับ 48 ชั่วโมงที่ 37 C .โรงแรมแห่งนี้ได้รับอนุญาตให้อาณานิคมในการพัฒนา
แผ่นทำความร้อนที่มีหุ้มด้วย 10 มล.ของสารอาหารนุ่มสาหร่ายทะเล( 0.75% สาหร่ายทะเล)..
ที่หุ้มสาหร่ายทะเลเป็นแกะเมล็ดออกพร้อมด้วย 104 CFU ,/ ML ของ pathogenic
ซึ่งจะช่วยกำจัดเชื้อแบคทีเรียได้รับการทดสอบการความไวแสง(ริคีอาผล, staphylococcus
สุนัขจิ้งจอกและพอใจ sp .). หลังจากแสดงระยะฟักตัวสำหรับ 24 ชั่วโมงที่ 37 C
แผ่นทำความร้อนที่ได้รับการตรวจสอบเส้นผ่านศูนย์กลางโซนที่ยับยั้ง ข้อห้ามก็ตอบแทน
ทำคะแนนได้เป็นในเชิงบวกหากความกว้างของโซนที่ชัดเจนโดยรอบที่ดินแดนอาณานิคมของประเทศผู้ผลิต
ซึ่งจะช่วยลดความตึงเครียดอยู่ที่ 10 มม.หรือใหญ่กว่า.
พันธุ์แสดงความเป็นศัตรูกันกิจกรรมกับ pathogenic
แบคทีเรียก็ให้มีการตรวจสอบชนิดของสารประกอบเป็น
อธิบายไว้ byaslim , yuksekdag , sarikaya ,และ beyatli ( 2005 ) ความตึงเครียด
ในห้องปฏิบัติการได้เติบโตสำหรับ 24 ชั่วโมงที่ 37 C ใน 10 มล.ของน้ำซุปนางแล้ว
centrifuged ที่ 9500 g สำหรับ 10 สามตัวอย่างนาทีของ supernatant
ซึ่งจะช่วยให้เป็นไปได้แต่ละสายพันธุ์ในห้องปฏิบัติการ ตัวอย่าง 1 และ 2 เป็น
ซึ่งจะช่วยในการปรับค่า pH 6.5 พร้อมด้วยโซดาไฟ( 1 N )กับกฎข้อที่ออกมายับยั้งกรด สำหรับ 2 ตัวอย่าง
โซลูชัน catalase ( fluka เยอรมัน)( 300 มล./ U / pbs ในบัฟเฟอร์ pH 7 )
ถูกเพิ่มในกฎข้อที่ออกมายับยั้งจากไฮโดร สำหรับ
ตัวอย่าง 3 supernatant ที่ได้เคยถูกใช้เป็นการควบคุม
ตามมาตรฐานที่ความเป็นศัตรูกันการทำงานของทั้งสามตัวอย่างที่มีการตรวจพบโดยใช้วิธีรวมถึงแพร่
สาหร่ายทะเล( papamaloni tzanetakis tzanetaki & kotzekidou
2003 ) ยี่สิบมล.ของสาหร่ายทะเล bhi แบบไม่มีแอลกอฮอล์(ประกอบด้วยสาหร่ายทะเล 1.0% )มี
เทลงบน inoculated และแผ่นความร้อนฆ่าเชื้อขวดนมพร้อมด้วยวัฒนธรรมพักค้างคืนที่ของแบคทีเรีย
pathogenic (ประมาณ 107 CFU ,/มล.) หลังจาก solidification บ่อ
ซึ่งจะช่วยกันเจาะรูพร้อมด้วยหัวเจาะ, Cork , 7 มม.ที่ฆ่าเชื้อขวดนม culturefiltrates
ตามมาตรฐานได้( 50 มล.)ถูกนำมาใส่ไว้ในแต่ละครั้งเป็นอย่างดี แผ่นความร้อนมี incubated ที่ 37 C
และตรวจสอบหลังจาก 24 ชั่วโมงสำหรับโซนอย่างชัดเจนแสดงยับยั้งเชื้อแบคทีเรีย pathogenic
ซึ่งจะช่วยได้ เส้นผ่านศูนย์กลางของโซนยับยั้งได้
ซึ่งจะช่วยวัดและขนาดเส้นผ่านศูนย์กลางของความเป็นที่ 7 มม.เป็นตัวตั้งจากเส้นผ่านศูนย์กลางโซนรวม
ซึ่งจะช่วยได้