Assay of a-amylaseActivity of a-amy

Assay of a-amylase
Activity of a-amylase was estimated following the method
described by Bernfeld (1955). One gram of germinating seed was
ground in 10 mL of 0.1 M acetate buffer, pH 4.75, homogenized
for 30 min, and centrifuged at 10,000 rpm for 10 min at 4 C. The
supernatant was used for the enzyme assay. Enzyme extract
(0.25 mL) was taken and diluted to 1 mL. One milliliter of a 0.01%
(w/v) starch solution was added and incubated for 60 min at
37 C. Two milliliters of DNS reagent (1% dinitrosalicylic acid dissolved
in 0.2 M NaOH and 30% sodium potassium tartrate) were
added and kept in a boiling water bath for 5 min. After cooling in
water, absorbance was measured at 540 nm. For the controls,
1 mL double-distilled water was used in place of the enzyme
extract. A standard graph was prepared using glucose, and the
amount of amylase present in the samples was calculated from
the standard curve and expressed as mg glucose/g fresh weight.
All measurements were conducted in triplicate.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทดสอบของมี amylaseการมี amylase ประเมินวิธีการอธิบายไว้ โดย Bernfeld (1955) หนึ่งกรัมของเมล็ด germinating ถูกดิน 10 ml ของบัฟเฟอร์ 0.1 M อะซิเตท ค่า pH 4.75, homogenized30 นาที และเหวี่ยงที่ 10,000 rpm 10 นาทีที่ 4 csupernatant ถูกใช้สำหรับการทดสอบเอนไซม์ สารสกัดจากเอนไซม์ถ่าย และเจือจางไป 1 มิลลิลิตร (0.25 mL) หนึ่งมิลลิเมตรของ 0.01%(w/v) แป้งแก้ไขเพิ่ม และได้รับการกก 60 นาทีที่ค. 37 มิลลิลิตร 2 ของรีเอเจนต์ DNS (1% dinitrosalicylic กรดละลายใน 0.2 M NaOH และ 30% โซเดียมโพแทสเซียม tartrate)เพิ่ม และเก็บไว้ในอ่างน้ำเดือด 5 นาที หลังจากเย็นในน้ำ มีวัด absorbance ที่ 540 nm การควบคุมน้ำกลั่นคู่ 1 มล.ใช้แทนเอนไซม์แยก กราฟมาตรฐานถูกเตรียมการใช้กลูโคส และคำนวณจำนวน amylase อยู่ในตัวอย่างกราฟมาตรฐาน และแสดงเป็นมิลลิกรัมต่อน้ำหนักสดน้ำตาล กลูโคส/gได้ดำเนินการประเมินทั้งหมดลข้อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Assay ของอะไมเลส
กิจกรรมของอะไมเลสเป็นที่คาดกันดังต่อไปนี้วิธีการ
อธิบายโดย Bernfeld (1955) หนึ่งกรัมเมล็ดงอกได้รับการ
พื้นดินใน 10 มล 0.1 M บัฟเฟอร์น้ำนมค่า pH 4.75, ปั่น
เป็นเวลา 30 นาทีและหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส
สารละลายที่ใช้สำหรับการทดสอบการทำงานของเอนไซม์ สารสกัดจากเอนไซม์
(0.25 มิลลิลิตร) ถูกนำตัวและลดลงเหลือ 1 มิลลิลิตร หนึ่งมิลลิลิตรของ 0.01%
(w / v) สารละลายแป้งถูกบันทึกและบ่มเป็นเวลา 60 นาทีที่
37 องศาเซลเซียส สองมิลลิลิตรน้ำยา DNS (1% กรด dinitrosalicylic ละลาย
ใน 0.2 M NaOH และ 30% โซเดียมโพแทสเซียม tartrate) ได้รับการ
เพิ่มและเก็บไว้ในอ่างน้ำเดือดเป็นเวลา 5 นาที หลังจากที่เย็นใน
น้ำการดูดกลืนแสงวัดที่ 540 นาโนเมตร สำหรับการควบคุมที่
1 มิลลิลิตรน้ำกลั่นสองครั้งถูกนำมาใช้ในสถานที่ของเอนไซม์
สารสกัดจาก กราฟมาตรฐานถูกจัดทำขึ้นโดยใช้น้ำตาลกลูโคสและ
ปริมาณของอะไมเลสอยู่ในกลุ่มตัวอย่างที่คำนวณได้จาก
เส้นโค้งมาตรฐานและแสดงความเป็นกลูโคสมิลลิกรัม / กรัมน้ำหนักสด.
วัดทั้งหมดได้ดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ของ a-amylase การทดสอบกิจกรรมของ a-amylase ประมาณตามวิธีอธิบายโดย bernfeld ( 1955 ) หนึ่งกรัมของเมล็ดงอกพื้นดินใน 10 ml 0.1 M อาซีเตตบัฟเฟอร์ pH 4.75 บด ,30 นาที ระดับที่ 10 , 000 รอบต่อนาที และ 10 นาทีที่ 4 ค .นำการใช้เอนไซม์ ( . . . เอนไซม์สกัด( 0.25 ml ) ถูกเจือจางใน 1 ml เป็น 0.01 มิลลิลิตร( w / v ) สารละลายแป้งเพิ่ม และ บ่มนาน 60 นาที ที่37 . 2 มิลลิลิตร ใช้ DNS ( 1% dinitrosalicylic กรดละลายน้ำใน 0.2 M NaOH และ 30 % โซเดียมโพแทสเซียมทาร์เทรต ) ได้แก่เพิ่มและเก็บไว้ในอ่างน้ำเดือด 5 นาที หลังเย็นน้ำ , วัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 540 นาโนเมตร สำหรับการควบคุมคู่ 1 มล. น้ำกลั่นที่ใช้ในสถานที่ของเอนไซม์สารสกัด กราฟมาตรฐานเป็นเตรียมใช้กลูโคส และปริมาณของเอนไซม์อะไมเลสอยู่ในตัวอย่างคำนวณได้จากมาตรฐานเส้นโค้งและแสดงเป็น mg glucose / กรัมน้ำหนักสด .วัดทั้งหมดมีวัตถุประสงค์ทั้งสามใบ