Page: 1of 8 117 Journal of Oleo Sc

Page:
1
of 8
117 Journal of Oleo Science Copyright ©2015 by Japan Oil Chemists’ Society doi : 10.5650/jos.ess14163 J. Oleo Sci. 64, (1) 117-124 (2015) Essential Oils from Herbs against Foodborne Pathogens in Chicken Sausage Lidiane Nunes Barbosa1＊, Isabella Silva Probst1, Bruna Fernanda Murbach Teles Andrade1, Fernanda Cristina Bérgamo Alves1, Mariana Albano1, Vera Lucia Mores Rall2 and Ary Fernandes Júnior1 1 Laboratory of Bacteriology and Natural Products. 2Labor atory of Food Microbiology. Department of Microbiology and Immunology, Biosciences Institute,Universidade Estadual Paulista "Julio de Mesquita Filho", Botucatu,São Paulo, Brazil, CEP 18618-970 1 INTRODUCTION Chicken meat and its products have increased in popu-larity and have become widespread throughout the world, with chicken sausage being one of the most popular cate-gories among these products1. Sausage manufacture in-volves a number of handling steps, which increase the chances of contamination by pathogens or spoilage2. Fresh sausage does not undergo heat treatment and has a highwater activity; giving this food a short shelf life and sub-jecting it directly to the action of the microorganisms pres-ents3. Application of agents with adequate antimicrobial and antioxidant activities has significant potential to extend the shelf life of chicken products and prevent economic losses4. Due to the negative perception of chemical preser-vatives, consumers attention is c hanging to natural alter-＊Correspondence to: Lidiane Nunes Barbosa, Department of Microbiology and Immunology, Biosciences Institute, Sao Paulo State University E-mail: [e-mail] Accepted September 2, 2014 (received for review July 25, 2014) Journal of Oleo Science ISSN 1345-8957 print / ISSN 1347-3352 online http://www.jstage.jst.go.jp/browse/jos/http://mc.manusriptcentral.com/jjocs natives and particular interest has been focused on the po-tential use of essential oilsEOfrom aromatic plants5. It is well known that most species, especially those be-longing to the Lamiaceae family, have different biological and pharmacological activities, which has meant that for a long time they have been used for improving the taste and organoleptic properties o f different foods6. Ocimum basi-licumbasiland its EO are used as flavoring in tomato-based products and those that are prone to deterioration by acid-tolerant microbiota7, 8 and studies have revealed the potential use of the of Origanum vulgareoreganoEO against several microorganismos9, 10. Foodborne diseases are a growing public health problem worldwide. Salmonella Enteritidis is considered the most important serovar of Salmonella, causing gastrointestinal disease of varying severity in humans11. This pathogen is Abstract: Consumption of chicken meat and its products, especially sausage, have increased in recent years. However, this product is susceptible to microbial contamination during manufacturing, which compromises its shelf life. The flavoring and preservative activities of essential oils (EO) have been recognized and the application of these antimicrobial agents as natural active compounds in food preservation has shown promise. The aim of this study was to evaluate the effect of Ocimum basilicum and Origanum vulgare EO on Listeria monocytogenes and Salmonella Enteritidis strains in artificially inoculated samples of fresh chicken sausage. First, the minimal inhibitory concentration (MIC) of EO in vitro was determined. The sausage was prepared and kept at ± 4°C; then, the inoculation of individual bacteria was carried out. EO were added at 0.3%, 1.0% and 1.5%v/w. After 0, 5, and 24 hours, the most probable number method (MPN) was performed. Transmission electron microscopy (TEM) was used to view the damage caused by these EO on bacterial morphology and/or structure. Only the 1.5% concentration was effective in reducing L. monocytogenes. 0.3% of O. vulgare EO was able to reduce the MPN/g of Salmonella Enteritidis (2 log) after 5 hours trials. O. basilicum EO showed no effect on Salmonella after 5 hours, but decreased by 2 log after 24 hours. O. vulgare EO at 1% gave a greater reduction of S. Enteritidis at 5 hours, increasing or maintaining this effect after 24 hours. The results confirmed the potential benefits of use EO in control of foodborne pathogens. Key words: Ocimum basilicum, Origanum vulgare, Salmonella Enteritidis, Listeria monocytogenes, preservative
L. N. Barbosa, I. S. Probst, B. F. M. T. Andrade et al. J. Oleo Sci. 64, (1) 117-124 (2015) 118 commonly found in chicken, which is the primary vector for transmission of Salmonella to humans12, 13. Listeria monocytogenes, on the other hand, is common in dairy products and red meat, but it can also be found in chicken, adding to the health concerns of Salmonella and Campy-lobacter14. Listeria is an opportunistic pathogen that mainly affects pregnant women, newborns, the elderly and immunocompromised individuals. This pathogen emerged in the late 20th century and has caused many outbreaks with high mortality rates15, 16. Thus the aim was to investigate the antimicrobial activi-ties of O. basilicum and O. vulgare EO against Listeria monocytogenes and Salmonella Enteritidis in artificially inoculated fresh chicken sausage samples after different periods of contact between pathogen and EO. 2 EXPERIMENTAL 2.1 Essential oils Fresh plant samples of O. basilicum and O. vulgare were purchased in the city of Botucatu, São Paulo, Brazil, and used in the preparation of EO by the steam distillation methodology in a Marconi device, Model M480. Dried speci-mens of plants were deposited in the Herbarium Irina Delanova Gemtchujnicov Department of Botany, Institute of Biosciences – IBB/ UNESP, whose numbers were: O. basilicum Botu 26037 and O. vulgare Botu 26287. 2.2 Chemical characterization Chemical analysis of EO was performed by gas chroma-tography-mass spectrometryGC-MSin a Shimadzu device, model QP5050A, using a capillary column, CBP-5, 50 m in length, with an internal diameter of 0.25 mm and 0.25 μm film thickness. The carrier gas was He and the identification of EO compounds was made on the basis of the National Institute of Standards and TechnologyNISTlibrary, analysis of the mass spectra, and also data in the literature17. 2.3 Preparation of fresh chicken sausage samples The formulation comprising 84.55 of boneless chicken breast, 10 lard, 3 water, 1.5 salt, 0.5 polyphos-phate, 0.25 garlic, and 0.2 pepper 18. The mass was in-corporated into in swine casings with a mean diameter of around 30 mm, and the samples produced were divided buds, separated by lots, and stored in a refrigerator at 4. 2.4 Bacterial strains Salmonella EnteritidisATCC-13076and Listeria monocytogenesATCC-15313strains were stored at 80 until their use in microbiological essays. 2.5 Enumeration of L. monocytogenes and S. Enteritidis in chicken sausage assays Susceptibility tests of the EO were performed with the inoculation of bacterial strains on chicken sausage samples 25 gwith suspensions standardized by a 0.5 MacFarland standard, aiming at a bacterial concentration of approxi-mately 105 colony forming unit/garound 5 log CFU/ g. After, volumes of O. vulgare and O. basilicum EO were added separately, to achieve concentrations of 0.3MIC ob-tained in previous microdilution in vitro assays – data not shown, 1.0, and 1.5 in inoculated sausage samples. All phases of assays were performed in sterile Petri plates, all procedures were carried out at laminar flow, and handling of the bacteria and EO homogenization were performed using sterile cutleryknife and forkmade of stainless steel. Following homogenization, sausage samples were kept at 4 refrigerator temperature. After 0, 5, and 24 hours, quantification of the bacteria inoculated in the sausage samples was performed by the most probable number MPNmethod. Despite the inherent characteristics of the MPN techniquee.g., large volume of material required, workload, and the time necessary to complete identifica-tion, this method proved to have high sensitivity and high reproducibility19. Different times were chosen to verify ifthe contact time influences the antibacterial action of es-sential oils. Control tests were also prepared using non-in-oculatednegative controland inoculated sausage samples positive controlboth without EO addition. Assays were performed in triplicate. The detection of Listeria, 25 g were homogenized in stomacher with 225 ml of LEB brothListeria Enrichment Broth - Oxoidand pre incubated a t 30 for 4 hours. The following were added selective agents40 mg/L nalidixic acid 50 mg/L of cycloheximide and 15 mg/L of acriflavinewith reincubation under the same temperature for 48 hours. At 24 and 48 hours, aliquots were plated with the aid of a chromium nickel strap in Palcam agarOxoidincu-bated at 35 for 48 hours. After this period, up to 5 coloniesblack with black halos, due to b reakage Aesculincharacteristics were transferred to a tube with TSA-YE agarTSA plus 0.6 yeast extract, incubated at 35ºC/24 hours. From this stock preliminary evidence of identifica-tion such as Gram stainGram positive rods are, the catalasepositive reactionand plated on agar motility for observation of growth like umbrella were performed. Then, if necessary, suspected colonies are identified with the help of API20. In tests with Salmonella, it is wo

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

หน้า: 18 สมุดรายวันที่ 117 ภัณฑ์ Oleo วิทยาศาสตร์ลิขสิทธิ์ © 2015 โดยญี่ปุ่นน้ำมันนักเคมีของสังคมดอย: 10.5650/jos.ess14163 J. ภัณฑ์ Oleo Sci. 64, (1) 117-124 (2015) น้ำมันหอมระเหยจากสมุนไพรกับโรค Foodborne ในไก่ไส้กรอก Lidiane Nunes Barbosa1 * อิซาเบลลา Probst1 Silva, Bruna Fernanda Murbach Teles Andrade1, Fernanda เรจ Bérgamo Alves1, Albano1 มาเรียนา หางลูเซียจารีตและวิถีประชา Rall2 Ary Fernandes Júnior1 1 ห้องปฏิบัติการของ Bacteriology และ ผลิตภัณฑ์ธรรมชาติ Atory 2Labor ของจุลชีววิทยาอาหาร ภาควิชาจุลชีววิทยาและภูมิคุ้มกันวิทยา เวลาออก สถาบัน Universidade Estadual Paulista "จูลิโอเดอ Mesquita Filho", Botucatu เซาเปาลู บราซิล CEP 18618-970 1 แนะนำไก่เนื้อ และผลิตภัณฑ์มีการเพิ่มขึ้นใน popu larity และได้แพร่สะพัดทั่วโลก ไส้กรอกไก่เป็นนิยมมากที่สุด cate gories ใน products1 เหล่านี้อย่างใดอย่างหนึ่ง ไส้กรอกผลิตจำนวนขั้นตอนการจัดการ ซึ่งเพิ่มโอกาสของการปนเปื้อนโรคหรือ spoilage2 ใน volves สดรับรักษาความร้อน และมีกิจกรรม highwater ให้อาหารนี้อายุสั้นและ jecting ย่อยได้โดยตรงกับการกระทำของจุลินทรีย์เค้น-ents3 แอพลิเคชันของตัวแทนกับกิจกรรมต้านจุลชีพและสารต้านอนุมูลอิสระเพียงพอมีศักยภาพอย่างมีนัยสำคัญเพื่อยืดอายุการเก็บรักษาผลิตภัณฑ์ไก่ และป้องกัน losses4 เศรษฐกิจ ลบการรับรู้ของเคมี preser-vatives ความสนใจของผู้บริโภคเป็นแขวน c ให้ธรรมชาติเปลี่ยนแปลง- * โต้ตอบกับ: Lidiane Nunes Barbosa ภาควิชาจุลชีววิทยา และภูมิคุ้มกันวิทยา เวลาออก สถาบัน อีเมล์มหาวิทยาลัยรัฐเซาเปาโล: [e-mail] Accepted 2 กันยายน 2014 (รับตรวจทานที่ 25 กรกฎาคม 2014) สมุดภัณฑ์ Oleo วิทยาศาสตร์นอกพิมพ์ 1345-8957 / นอก 1347-3352 http://www.jstage.jst.go.jp/browse/jos/http://mc.manusriptcentral.com/jjocs ออนไลน์ชาวพื้นเมืองและสนใจเฉพาะได้ถูกเน้นใช้ po tential plants5 หอม oilsEOfrom จำเป็น เป็นที่รู้จักว่า สปีชีส์ส่วนใหญ่ โดยเฉพาะอย่างยิ่งผู้ที่จะคิดถึงครอบครัววงศ์กะเพรา มีชีวภาพ และ pharmacological กิจกรรมต่าง ๆ ซึ่งมีความหมาย ว่า เป็นเวลานาน ใช้สำหรับปรับปรุงรสชาติและคุณสมบัติ organoleptic o f foods6 แตกต่างกัน Basi สกุลกะเพรา-โหระพาของอีโอใช้เป็น flavoring ผลิตภัณฑ์จากมะเขือเทศและผู้ที่มีแนวโน้มที่จะเสื่อมสภาพ โดยทนกับกรด microbiota7, 8 ศึกษา licumbasiland ได้เปิดเผยการใช้ศักยภาพของการของ Origanum vulgareoreganoEO กับ microorganismos9 หลาย 10 โรค Foodborne เป็นปัญหาสาธารณสุขเพิ่มขึ้นทั่วโลก สาย Enteritidis ถือเป็น serovar ที่สำคัญที่สุดของสาย การทำให้เกิดโรคความรุนแรงแตกต่างกันระบบใน humans11 การศึกษานี้เป็นบทคัดย่อ: การบริโภคเนื้อไก่และผลิตภัณฑ์ โดยเฉพาะไส้กรอก ได้เพิ่มขึ้นในปีที่ผ่านมา อย่างไรก็ตาม ผลิตภัณฑ์นี้จึงไวต่อการปนเปื้อนจุลินทรีย์ในระหว่างการผลิต การลดระดับในเรื่องของอายุ ได้รับรู้กิจกรรม flavoring และ preservative ระเหย (อีโอ) และแอพลิเคชันของจุลินทรีย์เหล่านี้เป็นสารประกอบธรรมชาติที่ใช้ในการถนอมอาหารได้แสดงสัญญา จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้คือการ ประเมินผลของ basilicum สกุลกะเพรา-โหระพาและ Origanum vulgare อีโอออลิ monocytogenes และสายพันธุ์ซัล Enteritidis ในเหือด inoculated ตัวอย่างไก่สดไส้กรอก ครั้งแรก น้อยลิปกลอสไขความเข้มข้น (MIC) ของอีโอการเพาะเลี้ยงที่ถูกกำหนด ไส้กรอกเตรียมไว้ และเก็บไว้ที่ 4° C ± แล้ว inoculation ของแบคทีเรียแต่ละตัวถูกดำเนินการ มีเพิ่มอีโอที่ 0.3%, 1.0% และ 1.5%v/w หลังจาก 0, 5, 24 ชั่วโมง มีดำเนินวิธีการหมายเลขน่าเป็นที่สุด (บริษัทเอ็มพีเอ็น) ส่งอิเล็กตรอน microscopy (ยการ) ถูกใช้เพื่อดูความเสียหายที่เกิดจากอีโอเหล่านี้ในโครงสร้างสัณฐานวิทยาแบคทีเรีย เข้มข้น 1.5% เท่านั้นมีประสิทธิภาพในการลด L. monocytogenes 0.3% ของ vulgare โออีโอได้ลดบริษัทเอ็มพีเอ็น/กรัมของซัล Enteritidis (2 ล็อก) หลังจากทดลอง 5 ชั่วโมง Basilicum โออีโอแสดงให้เห็นว่าไม่มีผลต่อระดับหลังจาก 5 ชั่วโมง แต่ลด 2 ล็อกหลังจาก 24 ชั่วโมง Vulgare โออีโอ 1% ให้ลดมากกว่า Enteritidis s ได้ใน 5 ชั่วโมง เพิ่ม หรือรักษาผลนี้หลังจาก 24 ชั่วโมง ผลการยืนยันประโยชน์ของอีโอใช้ในการควบคุมของ foodborne โรคอาจเกิดขึ้น คำสำคัญ: basilicum สกุลกะเพรา-โหระพา Origanum vulgare ซัล Enteritidis ออลิ monocytogenes, preservativeL. N. Barbosa, I. S. Probst, B. F. M. T. Andrade et al. J. Oleo Sci. 64, (1) 117-124 (2015) 118 commonly found in chicken, which is the primary vector for transmission of Salmonella to humans12, 13. Listeria monocytogenes, on the other hand, is common in dairy products and red meat, but it can also be found in chicken, adding to the health concerns of Salmonella and Campy-lobacter14. Listeria is an opportunistic pathogen that mainly affects pregnant women, newborns, the elderly and immunocompromised individuals. This pathogen emerged in the late 20th century and has caused many outbreaks with high mortality rates15, 16. Thus the aim was to investigate the antimicrobial activi-ties of O. basilicum and O. vulgare EO against Listeria monocytogenes and Salmonella Enteritidis in artificially inoculated fresh chicken sausage samples after different periods of contact between pathogen and EO. 2 EXPERIMENTAL 2.1 Essential oils Fresh plant samples of O. basilicum and O. vulgare were purchased in the city of Botucatu, São Paulo, Brazil, and used in the preparation of EO by the steam distillation methodology in a Marconi device, Model M480. Dried speci-mens of plants were deposited in the Herbarium Irina Delanova Gemtchujnicov Department of Botany, Institute of Biosciences – IBB/ UNESP, whose numbers were: O. basilicum Botu 26037 and O. vulgare Botu 26287. 2.2 Chemical characterization Chemical analysis of EO was performed by gas chroma-tography-mass spectrometryGC-MSin a Shimadzu device, model QP5050A, using a capillary column, CBP-5, 50 m in length, with an internal diameter of 0.25 mm and 0.25 μm film thickness. The carrier gas was He and the identification of EO compounds was made on the basis of the National Institute of Standards and TechnologyNISTlibrary, analysis of the mass spectra, and also data in the literature17. 2.3 Preparation of fresh chicken sausage samples The formulation comprising 84.55 of boneless chicken breast, 10 lard, 3 water, 1.5 salt, 0.5 polyphos-phate, 0.25 garlic, and 0.2 pepper 18. The mass was in-corporated into in swine casings with a mean diameter of around 30 mm, and the samples produced were divided buds, separated by lots, and stored in a refrigerator at 4. 2.4 Bacterial strains Salmonella EnteritidisATCC-13076and Listeria monocytogenesATCC-15313strains were stored at 80 until their use in microbiological essays. 2.5 Enumeration of L. monocytogenes and S. Enteritidis in chicken sausage assays Susceptibility tests of the EO were performed with the inoculation of bacterial strains on chicken sausage samples 25 gwith suspensions standardized by a 0.5 MacFarland standard, aiming at a bacterial concentration of approxi-mately 105 colony forming unit/garound 5 log CFU/ g. After, volumes of O. vulgare and O. basilicum EO were added separately, to achieve concentrations of 0.3MIC ob-tained in previous microdilution in vitro assays – data not shown, 1.0, and 1.5 in inoculated sausage samples. All phases of assays were performed in sterile Petri plates, all procedures were carried out at laminar flow, and handling of the bacteria and EO homogenization were performed using sterile cutleryknife and forkmade of stainless steel. Following homogenization, sausage samples were kept at 4 refrigerator temperature. After 0, 5, and 24 hours, quantification of the bacteria inoculated in the sausage samples was performed by the most probable number MPNmethod. Despite the inherent characteristics of the MPN techniquee.g., large volume of material required, workload, and the time necessary to complete identifica-tion, this method proved to have high sensitivity and high reproducibility19. Different times were chosen to verify ifthe contact time influences the antibacterial action of es-sential oils. Control tests were also prepared using non-in-oculatednegative controland inoculated sausage samples positive controlboth without EO addition. Assays were performed in triplicate. The detection of Listeria, 25 g were homogenized in stomacher with 225 ml of LEB brothListeria Enrichment Broth - Oxoidand pre incubated a t 30 for 4 hours. The following were added selective agents40 mg/L nalidixic acid 50 mg/L of cycloheximide and 15 mg/L of acriflavinewith reincubation under the same temperature for 48 hours. At 24 and 48 hours, aliquots were plated with the aid of a chromium nickel strap in Palcam agarOxoidincu-bated at 35 for 48 hours. After this period, up to 5 coloniesblack with black halos, due to b reakage Aesculincharacteristics were transferred to a tube with TSA-YE agarTSA plus 0.6 yeast extract, incubated at 35ºC/24 hours. From this stock preliminary evidence of identifica-tion such as Gram stainGram positive rods are, the catalasepositive reactionand plated on agar motility for observation of growth like umbrella were performed. Then, if necessary, suspected colonies are identified with the help of API20. In tests with Salmonella, it is wo

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หน้า:
1
จาก 8
117 วารสารวิทยาศาสตร์ Oleo ลิขสิทธิ์© 2015 โดยนักเคมีญี่ปุ่นน้ำมันสังคมดอย: 10.5650 / jos.ess14163 เจ Oleo วิทย์ 64 (1) 117-124 (2015) น้ำมันหอมระเหยจากสมุนไพรกับจุลชีพก่อโรคระบาดจากอาหารในไก่ไส้กรอก Lidiane Nunes Barbosa1 * Isabella Probst1 ซิลวา, เฟร์นัน Bruna Murbach Teles Andrade1, เฟร์นันคริสตินากาโม Alves1 มาเรียนา Albano1 เวร่าลูเซีย Mores Rall2 และ Ary เฟอร์นันเดJúnior1 1 ห้องปฏิบัติการแบคทีเรียและผลิตภัณฑ์ธรรมชาติ 2Labor Atory จุลชีววิทยาอาหาร ภาควิชาจุลชีววิทยาและวิทยาภูมิคุ้มกัน, ชีววิทยาศาสตร์สถาบัน Universidade Estadual Paulista "จูลิโอเดอ Mesquita Filho" Botucatu, เซาเปาลู, บราซิล, CEP 18618-970 1 บทนำเนื้อไก่และผลิตภัณฑ์ของ บริษัท ได้เพิ่มขึ้นในอป-larity และได้กลายเป็นที่แพร่หลายไปทั่วโลก กับไส้กรอกไก่เป็นหนึ่งในความนิยมมากที่สุด Cate-Gories หมู่ products1 เหล่านี้ การผลิตไส้กรอกใน volves จำนวนของขั้นตอนการจัดการที่เพิ่มโอกาสในการปนเปื้อนโดยเชื้อโรคหรือ spoilage2 ไส้กรอกสดไม่ได้รับการรักษาความร้อนและมีกิจกรรม Highwater นั้น ให้อาหารพวกนี้มีอายุการเก็บรักษาสั้นและย่อย jecting โดยตรงกับการกระทำของจุลินทรีย์ pres-ents3 แอพลิเคชันของตัวแทนที่มีกิจกรรมการต้านเชื้อจุลินทรีย์และสารต้านอนุมูลอิสระที่มีศักยภาพเพียงพอที่สำคัญในการยืดอายุการเก็บรักษาของผลิตภัณฑ์เนื้อไก่และป้องกันไม่ให้เศรษฐกิจ losses4 เนื่องจากการรับรู้เชิงลบของสารเคมี preser-vatives ผู้บริโภคให้ความสนใจคือ c หรืออีกวิธีหนึ่งที่จะแขวนธรรมชาติ * จดหมายไปที่: Lidiane Nunes แปภาควิชาจุลชีววิทยาและวิทยาภูมิคุ้มกัน, สถาบันชีววิทยาศาสตร์, เซาเปาลูรัฐมหาวิทยาลัย E-mail: [e-mail] .br ได้รับการยอมรับ 2 กันยายน 2014 (รับสำหรับความคิดเห็น 25 กรกฎาคม 2014) วารสารวิทยาศาสตร์ Oleo ISSN 1345-8957 พิมพ์ / ISSN 1347-3352 ออนไลน์ http://www.jstage.jst.go.jp/browse/jos/http : ชาวบ้าน //mc.manusriptcentral.com/jjocs และน่าสนใจโดยเฉพาะได้รับการมุ่งเน้นไปที่การใช้งาน PO-tential ของ oilsEOfrom จำเป็น plants5 หอม เป็นที่ทราบกันดีว่าสายพันธุ์มากที่สุดโดยเฉพาะอย่างยิ่งผู้ใดปรารถนาของครอบครัวกะเพรามีฤทธิ์ทางชีวภาพและเภสัชวิทยาที่แตกต่างกันซึ่งมีความหมายว่าเป็นเวลานานพวกเขาได้ถูกนำมาใช้สำหรับการปรับปรุงรสชาติและคุณสมบัติทางประสาทสัมผัสของ foods6 ที่แตกต่างกัน Ocimum ฐาน licumbasiland-EO มันจะถูกใช้เป็นเครื่องปรุงในผลิตภัณฑ์มะเขือเทศที่ใช้และผู้ที่มีแนวโน้มที่จะเสื่อมสภาพโดย microbiota7 กรดใจกว้าง, 8 และการศึกษาได้เผยให้เห็นถึงศักยภาพของการใช้งานของ Origanum vulgareoreganoEO กับ microorganismos9 หลายโรคระบาดจากอาหาร 10. มี ปัญหาสุขภาพของประชาชนที่เพิ่มขึ้นทั่วโลก Salmonella Enteritidis ถือว่าเป็น serovar ที่สำคัญที่สุดของเชื้อ Salmonella ที่ก่อให้เกิดโรคระบบทางเดินอาหารที่แตกต่างกันของความรุนแรงใน humans11 เชื้อโรคนี้เป็นบทคัดย่อ: การบริโภคเนื้อไก่และผลิตภัณฑ์ของ บริษัท โดยเฉพาะไส้กรอกได้เพิ่มขึ้นในปีที่ผ่านมา แต่ผลิตภัณฑ์นี้เป็นที่ประทับใจกับการปนเปื้อนของเชื้อจุลินทรีย์ในระหว่างการผลิตซึ่งบั่นทอนอายุการเก็บรักษา กิจกรรมแต่งกลิ่นและสารกันบูดของน้ำมันหอมระเหย (EO) ได้รับการยอมรับและการประยุกต์ใช้ยาต้านจุลชีพเหล่านี้เป็นสารธรรมชาติในการเก็บรักษาอาหารที่มีการแสดงให้เห็นสัญญา จุดมุ่งหมายของการศึกษาครั้งนี้เพื่อประเมินผลกระทบของการ Ocimum basilicum และ Origanum vulgare EO ใน Listeria monocytogenes และสายพันธุ์เชื้อ Salmonella Enteritidis ในตัวอย่างเชื้อเทียมไส้กรอกไก่สด ก่อนที่ความเข้มข้นน้อยที่สุดยับยั้ง (MIC) ของ EO ในหลอดทดลองที่ถูกกำหนด ไส้กรอกจัดทำและเก็บไว้ที่± 4 ° C; แล้วฉีดวัคซีนของเชื้อแบคทีเรียของแต่ละบุคคลได้ดำเนินการ EO ถูกเพิ่มที่ 0.3%, 1.0% และ 1.5% v / w หลังจากที่ 0, 5 และ 24 ชั่วโมงวิธีการจำนวนน่าจะเป็นที่สุด (MPN) ที่ได้ดำเนินการ ส่งกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (TEM) ถูกนำมาใช้เพื่อดูความเสียหายที่เกิดจาก EO เหล่านี้บนลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเชื้อแบคทีเรียและ / หรือโครงสร้าง เพียง แต่ความเข้มข้น 1.5% มีประสิทธิภาพในการลด L. monocytogenes 0.3% ของทุม vulgare EO ก็สามารถที่จะลด MPN / กรัม Salmonella Enteritidis ของ (2 log) หลังจาก 5 ชั่วโมงการทดลอง ทุม basilicum EO แสดงให้เห็นว่าไม่มีผลต่อเชื้อ Salmonella หลังจาก 5 ชั่วโมง แต่ลดลง 2 เข้าสู่ระบบหลังจาก 24 ชั่วโมง ทุม vulgare EO ที่ 1% ให้ลดลงมากขึ้นของเอส Enteritidis ที่ 5 ชั่วโมงที่เพิ่มขึ้นหรือดูแลผลกระทบนี้หลังจาก 24 ชั่วโมง ผลการยืนยันผลประโยชน์ที่อาจเกิดขึ้นในการใช้ EO อยู่ในการควบคุมของเชื้อโรคที่เกิดจากอาหาร คำสำคัญ: Ocimum basilicum, Origanum vulgare, Salmonella Enteritidis, Listeria monocytogenes,
สารกันบูดลิตร N. แป IS Probst, BFMT Andrade et al, เจ Oleo วิทย์ 64 (1) 117-124 (2015) 118 พบในไก่ซึ่งเป็นเวกเตอร์หลักสำหรับการส่งของเชื้อ Salmonella ที่จะ humans12 13 Listeria monocytogenes ในมืออื่น ๆ ที่เป็นเรื่องธรรมดาในผลิตภัณฑ์นมและเนื้อสัตว์สีแดง แต่มัน นอกจากนี้ยังสามารถพบได้ในไก่เพิ่มความกังวลเรื่องสุขภาพของเชื้อ Salmonella และเปิ-lobacter14 Listeria เป็นเชื้อฉวยโอกาสที่ส่วนใหญ่มีผลกระทบต่อหญิงตั้งครรภ์ทารกแรกเกิดบุคคลที่ผู้สูงอายุและมีภาวะภูมิคุ้มกันบกพร่อง เชื้อโรคนี้โผล่ออกมาในช่วงปลายศตวรรษที่ 20 และได้ก่อให้เกิดการระบาดจำนวนมากที่มีอัตราการตายสูง rates15 16 ดังนั้นจุดมุ่งหมายเพื่อศึกษาความสัมพันธ์ activi-ยาต้านจุลชีพของ basilicum ทุมและทุม vulgare EO กับเชื้อ Listeria monocytogenes และเชื้อ Salmonella Enteritidis ในเชื้อเทียมสด ตัวอย่างไส้กรอกไก่หลังจากช่วงเวลาที่แตกต่างกันของการติดต่อระหว่างเชื้อโรคและ EO 2 ทดลอง 2.1 น้ำมันหอมระเหยตัวอย่างพืชสดของ basilicum ทุมทุม vulgare และกำลังซื้อในเมือง Botucatu, เซาเปาลู, บราซิล, และใช้ในการจัดทำ EO โดยวิธีการกลั่นด้วยไอน้ำในอุปกรณ์มาร์โคนีที่รุ่น M480 แห้งบุรุษ-speci ของพืชที่ถูกฝากไว้ในหอพรรณไม้ Irina Delanova Gemtchujnicov ภาควิชาพฤกษศาสตร์สถาบันชีววิทยาศาสตร์ - IBB / UNESP ซึ่งมีตัวเลขอยู่: ทุม basilicum Botu 26037 และทุม vulgare Botu 26287. 2.2 ลักษณะของสารเคมีในการวิเคราะห์ทางเคมีของ EO เป็น ดำเนินการโดยก๊าซสี-tography มวล spectrometryGC-MSin อุปกรณ์ Shimadzu, QP5050A รุ่นโดยใช้คอลัมน์เส้นเลือดฝอยที่ CBP-5, 50 เมตรยาวมีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางภายใน 0.25 มิลลิเมตรและ 0.25 ไมโครเมตรความหนาของฟิล์ม ผู้ให้บริการก๊าซเป็นเขาและบัตรประจำตัวของสาร EO ที่ถูกสร้างขึ้นบนพื้นฐานของสถาบันมาตรฐานและ TechnologyNISTlibrary การวิเคราะห์สเปกตรัมของมวลและข้อมูลใน literature17 2.3 การจัดทำไก่สดตัวอย่างไส้กรอกสูตรประกอบด้วย 84.55 ของอกไก่ไม่มีกระดูก 10 หมู 3 น้ำ 1.5 เกลือ 0.5 polyphos-phate, 0.25, กระเทียมและพริกไทย 0.2 18. มวลที่ได้รับใน corporated เข้าไปในปลอกสุกรด้วย หมายถึงมีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางประมาณ 30 มิลลิเมตรและตัวอย่างที่ผลิตถูกแบ่งออกตาคั่นด้วยจำนวนมากและเก็บไว้ในตู้เย็นที่ 4. 2.4 สายพันธุ์แบคทีเรีย Salmonella EnteritidisATCC-13076and Listeria monocytogenesATCC-15313strains ถูกเก็บไว้ที่ 80 จนถึงวันที่ใช้ในการเขียนเรียงความจุลชีววิทยา 2.5 การแจงนับของ L. monocytogenes และ S. Enteritidis ในการตรวจไส้กรอกไก่ทดสอบความไวของ EO ได้ดำเนินการกับการฉีดวัคซีนสายพันธุ์แบคทีเรียตัวอย่างไส้กรอกไก่ 25 แขวนลอย gwith มาตรฐานโดย 0.5 MacFarland มาตรฐานมุ่งที่ความเข้มข้นของแบคทีเรีย approxi-mately อาณานิคม 105 หน่วยสร้าง / garound 5 log CFU / g หลังจากที่ปริมาณของโอ vulgare และทุม basilicum EO ถูกเพิ่มแยกกันเพื่อให้บรรลุความเข้มข้นของ 0.3MIC อบ-tained ใน microdilution ก่อนหน้านี้ในหลอดทดลองการวิเคราะห์ - ไม่ได้แสดงข้อมูล, 1.0 และ 1.5 ในตัวอย่างไส้กรอกเชื้อ ทุกขั้นตอนของการตรวจได้ดำเนินการในจานเลี้ยงเชื้อผ่านการฆ่าเชื้อทุกขั้นตอนได้ดำเนินการที่ไหลและการจัดการของเชื้อแบคทีเรียและทำให้เป็นเนื้อเดียวกัน EO ถูกดำเนินการโดยใช้ cutleryknife ผ่านการฆ่าเชื้อและ forkmade สแตนเลส ต่อไปนี้เป็นเนื้อเดียวกันตัวอย่างไส้กรอกถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิตู้เย็น 4 หลังจากที่ 0, 5 และ 24 ชั่วโมงปริมาณของเชื้อแบคทีเรียเชื้อในตัวอย่างไส้กรอกได้ดำเนินการโดยตัวเลขที่น่าจะเป็นมากที่สุด MPNmethod แม้จะมีลักษณะโดยธรรมชาติของ techniquee.g MPN. ปริมาณขนาดใหญ่ของวัสดุที่จำเป็นต้องมีภาระงานและเวลาที่จำเป็นเพื่อให้การ identifica-วิธีนี้พิสูจน์ให้เห็นว่ามีความไวสูงและ reproducibility19 สูง เวลาที่ต่างกันได้รับการแต่งตั้งเพื่อตรวจสอบเวลาการติดต่อ ifthe ที่มีอิทธิพลต่อการดำเนินการต้านเชื้อแบคทีเรียของน้ำมัน ES-sential การทดสอบการควบคุมนอกจากนี้ยังได้เตรียมใช้ controland ไม่ใช่ใน oculatednegative เชื้อตัวอย่างไส้กรอก controlboth บวกโดยไม่ต้องเติม EO การตรวจได้ดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า การตรวจหาเชื้อ Listeria 25 กรัมปั่นใน Stomacher 225 มิลลิลิตร LEB brothListeria การเพิ่มปริมาณน้ำซุป - Oxoidand ก่อนบ่มที่ 30 เป็นเวลา 4 ชั่วโมง ต่อไปนี้จะมีการเพิ่ม agents40 เลือกมิลลิกรัม / ลิตร nalidixic กรด 50 มิลลิกรัม / ลิตรของ cycloheximide และ 15 มิลลิกรัม / ลิตรของ reincubation acriflavinewith ภายใต้อุณหภูมิเดียวกันเป็นเวลา 48 ชั่วโมง ณ วันที่ 24 และ 48 ชั่วโมง aliquots ถูกชุบด้วยความช่วยเหลือของโครเมียมนิกเกิลสายในอาหาร PALCAM agarOxoidincu-ซึ้งน้อยลงที่ 35 เป็นเวลา 48 ชั่วโมง หลังจากช่วงเวลานี้ถึง 5 coloniesblack มีรัศมีสีดำเนื่องจากข reakage Aesculincharacteristics ถูกโอนไปยังหลอด TSA-YE agarTSA บวกสารสกัดจากยีสต์ 0.6 การบ่มที่35ºC / 24 ชั่วโมง จากสต็อกหลักฐานเบื้องต้นของ identifica-การเช่นแกรม stainGram แท่งบวกนี้ catalasepositive reactionand ชุบวุ้นในการเคลื่อนไหวสำหรับการสังเกตของการเจริญเติบโตเช่นร่มได้ดำเนินการ จากนั้นถ้าจำเป็นอาณานิคมที่ต้องสงสัยว่าจะมีการระบุด้วยความช่วยเหลือของ API20 ในการทดสอบกับเชื้อ Salmonella มันเป็น wo

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หน้า :
1
8
117 วารสารวิทยาศาสตร์ลิขสิทธิ์© 2015 โดยน้ำมันโอลีโอญี่ปุ่นนักเคมี ' สังคมดอย : 10.5650/jos.ess14163 เจ. โอลีโอวิทย์ . 64 ( 1 ) 117-124 ( 2015 ) น้ำมันหอมระเหยจากสมุนไพรต่อต้านเชื้อโรคอาหารเป็นพิษในไก่ ไส้กรอก lidiane นูนส์ barbosa1 ＊ Isabella ซิลวา probst1 Bruna Fernanda , murbach TELES andrade1 Fernanda B é rgamo alves1 , คริสติน่า , albano1 มาเรียนา ,วีร่า ลูเซีย และประเพณี rall2 อ้าย ) J ú nior1 1 ปฏิบัติการแบคทีเรียวิทยาและผลิตภัณฑ์ธรรมชาติ 2labor atory จุลชีววิทยาอาหาร ภาควิชาจุลชีววิทยาและวิทยาภูมิคุ้มกัน ชีววิทยา สถาบัน มหาวิทยาลัย estadual Paulista " จูลิโอ เดอ mesquita ลูกคิดว่า " Botucatu , เซาเปาลู , บราซิลเห็ดกินได้ชนิดหนึ่ง 18618-970 1 แนะนำ ไก่เนื้อและผลิตภัณฑ์ของ บริษัท มีการเพิ่มขึ้นใน popu larity และได้กลายเป็นที่แพร่หลายทั่วโลก ด้วยไส้กรอกไก่เป็นหนึ่งในความนิยมมากที่สุดในหมู่เหล่านี้ products1 เคท gories . ไส้กรอกที่ผลิตใน volves จํานวนของการจัดการขั้นตอน ซึ่งเพิ่มโอกาสของการปนเปื้อนจากเชื้อโรคหรือ spoilage2 .ไส้กรอกสดที่ไม่ได้ผ่านความร้อน และมี highwater กิจกรรม การให้อาหารนี้อายุการเก็บรักษาสั้นและย่อย jecting มันตรงกับการกระทำของจุลินทรีย์ pres-ents3 . การประยุกต์ใช้สารต้านอนุมูลอิสระที่มีศักยภาพเพียงพอ และมีกิจกรรมที่สำคัญ เพื่อยืดอายุการเก็บของผลิตภัณฑ์ไก่ และป้องกัน losses4 ทางเศรษฐกิจเนื่องจากการรับรู้เชิงลบของ vatives preser เคมี ผู้บริโภคสนใจคือ C hanging ธรรมชาติแก้ไข - ＊ติดต่อ : lidiane นูนส์ บาร์โบซา ภาควิชาจุลชีววิทยาและวิทยาภูมิคุ้มกัน วิทยาศาสตร์ชีวภาพสถาบันเซาเปาโลรัฐมหาวิทยาลัย E-mail : [e-mail] ยอมรับ 2 กันยายน 2014 ( ได้รับการทบทวน 25 กรกฎาคม2014 ) วารสารวิทยาศาสตร์ชื่อโอลีโอ 1345-8957 พิมพ์ / ISSN 1347-3352 ออนไลน์ http : //www.jstage.jst.go.jp/browse/jos/http://mc.manusriptcentral.com/jjocs ชาวพื้นเมืองและความสนใจเฉพาะมีการเน้นใช้ tential PO สรุป oilseofrom หอม plants5 . มันเป็นที่รู้จักกันดีว่าสปีชีส์มากที่สุด โดยเฉพาะผู้จะปรารถนา Lamiaceae ครอบครัว ,มีกิจกรรมทางชีวภาพและทางต่าง ๆซึ่งมีความหมายว่า เป็นเวลานานที่พวกเขาได้ถูกนำมาใช้เพื่อปรับปรุงรสชาติและคุณสมบัติทางประสาทสัมผัสที่แตกต่างกัน foods6 o F . คอม - licumbasiland ของ EO ใช้เป็นเครื่องปรุงในผลิตภัณฑ์มะเขือเทศตาม และผู้ที่มักจะ microbiota7 การชะด้วยกรดใจกว้าง ,8 และมีการศึกษาพบศักยภาพของ Origanum vulgareoreganoeo กับหลาย microorganismos9 10 อาหารเป็นพิษโรคที่เป็นปัญหาสาธารณสุข การเติบโตทั่วโลก ซัลโมเนลลา enteritidis ถือว่าสำคัญที่สุดไนเชื้อก่อให้เกิดโรคระบบทางเดินอาหารที่แตกต่างจากความรุนแรงใน humans11 . เชื้อโรคนี้เป็นนามธรรมการบริโภคเนื้อไก่และผลิตภัณฑ์ของตนโดยเฉพาะไส้กรอก มีเพิ่มขึ้นในปีล่าสุด อย่างไรก็ตาม ผลิตภัณฑ์นี้จะเสี่ยงต่อการปนเปื้อนของจุลินทรีย์ในระหว่างการผลิต ซึ่งบั่นทอนอายุการใช้งานของรสสารกันบูดและกิจกรรมของน้ำมันหอมระเหย ( EO ) ได้รับการยอมรับและการใช้ยาต้านจุลชีพตัวแทนเหล่านี้เป็นสารประกอบธรรมชาติที่ใช้ในการเก็บรักษาอาหารได้แสดงสัญญาจุดมุ่งหมายของการศึกษานี้เพื่อศึกษาผลของโหระพา กะเพรา และ Origanum vulgare EO ใน monocytogenes Listeria Salmonella ในตัวอย่างของสายพันธุ์เชื้อ enteritidis เทียม ไส้กรอกไก่สด แรก , ความเข้มข้นยับยั้งน้อยที่สุด ( MIC ) ของ EO ในหลอดทดลองจะถูกนำ ไส้กรอกที่เตรียมไว้และเก็บไว้ที่± 4 ° C แล้ววัคซีนเชื้อแบคทีเรีย บุคคลมีการ EO ถูกเพิ่มที่ 0.3% , 1.0 และ 1.5 % v / W . หลังจาก 0 , 5 และ 24 ชั่วโมง แบบเลขที่น่าจะเป็นไปได้มากที่สุด ( MPN ) กำหนด ส่งกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน ( TEM ) ถูกใช้เพื่อดูความเสียหายที่เกิดจากแบคทีเรียเหล่านี้ EO ทางสัณฐานวิทยาและ / หรือโครงสร้าง เพียง 1.5% มีค่าประสิทธิภาพในการลดล. monocytogenes . 0.3 เปอร์เซ็นต์ .vulgare EO สามารถลด MPN / g ของ Salmonella enteritidis ( 2 บันทึก ) หลังจาก 5 ชั่วโมง การทดลอง โอออ พบว่าไม่มีผลต่อเชื้อซัลโมเนลลาโหระพาหลังจาก 5 ชั่วโมง แต่ลดลง 1 log หลังจาก 24 ชั่วโมง o . vulgare EO ที่ 1% ให้ลดลงมากขึ้นของ S . enteritidis 5 ชั่วโมง , การเพิ่มหรือการรักษาผลหลังจาก 24 ชั่วโมงผลยืนยันประโยชน์ของการใช้ EO ในการควบคุมเชื้อโรคอาหารเป็นพิษ . คำสำคัญ : แมงลักโหระพา , Origanum vulgare , Salmonella enteritidis วงแหวนแวนอัลเลน , สารกันบูด
L , N . S . Probst บาร์โบซ่า บี เอฟ เอ็ม ที อันดราเด้ et al . เจ โอลีโอวิทย์ . 64 ( 1 ) 117-124 ( 2015 ) 118 มักพบในไก่ ซึ่งเป็นหลักสำหรับการส่งของ Salmonella ในเวกเตอร์ humans12 , 13 .วงแหวนแวนอัลเลน , บนมืออื่น ๆที่พบในผลิตภัณฑ์นมและเนื้อสัตว์สีแดง แต่มันยังสามารถพบได้ในไก่ , เพื่อเพิ่มความกังวลเรื่องสุขภาพของ Salmonella และ campy-lobacter14 . ลิสเตอเรียเป็นเชื้อฉวยโอกาสที่ส่วนใหญ่มีผลกระทบต่อหญิงตั้งครรภ์ ทารกแรกเกิด , ผู้สูงอายุ และผู้ที่มีภาวะภูมิคุ้มกันบกพร่อง .เชื้อโรคนี้เกิดในปลายศตวรรษที่ 20 และมีอัตราการตายสูง ทำให้หลายๆ rates15 16 . จึงมีจุดมุ่งหมายเพื่อศึกษาความสัมพันธ์ของการรักษา ฯลฯ . และ Listeria O vulgare EO กับ monocytogenes Salmonella ในตัวอย่างเชื้อ enteritidis เทียม ไก่สด ไส้กรอก หลังจากรอบระยะเวลาที่แตกต่างกันของการติดต่อระหว่างเชื้อโรคและออ . ทดลอง 2 กลุ่ม 2น้ํามัน 1 จำเป็นตัวอย่างพืชสดโหระพาและ O . O vulgare ซื้อในเมือง Botucatu , เซาเปาลู , บราซิล , และใช้ในการเตรียมของ EO โดยวิธีการกลั่นด้วยไอน้ำใน Marconi อุปกรณ์แบบ m480 . แห้งประเภทบุรุษของพืชสมุนไพรที่ฝากไว้ อิริน่า delanova gemtchujnicov ภาควิชาพฤกษศาสตร์ สถาบันชีววิทยาศาสตร์ และ / unesp Ibb ,ที่มีตัวเลขอยู่ : o botu และรักษา 26037 . vulgare botu 26287 . 2.2 คุณสมบัติทางเคมีการวิเคราะห์ทางเคมีของก๊าซ EO โดยใช้โครมา tography มวล spectrometrygc msin อุปกรณ์ Shimadzu Model qp5050a โดยใช้ capillary คอลัมน์ cbp-5 50 เมตรในความยาว มีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางภายในของ 0.25 มม. และ 0.25 μ M ฟิล์มหนาแก๊สตัวพาเขาและการจำแนกสาร EO ถูกสร้างบนพื้นฐานของสถาบันมาตรฐานและ technologynistlibrary การวิเคราะห์ของมวลสเปกตรัม และข้อมูลใน literature17 . 2.3 การเตรียมสด ไส้กรอกไก่ ตัวอย่างการกำหนดประกอบด้วย 84.55 ของเต้านมไก่ boneless 10 , น้ำมันหมู , 3 น้ำ , เกลือ 1.5 , 0.5 polyphos เฟต , 0.25 ) และ 02 พริกไทย 18 มวลใน corporated เข้าไปในสุกรปลอกกับหมายถึงเส้นผ่าศูนย์กลางประมาณ 30 มิลลิเมตร และตัวอย่างผลิตแบ่งตา โดยแยกจํานวนมาก และเก็บในตู้เย็นที่อุณหภูมิ 4 . 2.4 แบคทีเรีย Salmonella Listeria enteritidisatcc-13076and monocytogenesatcc-15313strains เก็บรักษาที่อุณหภูมิ 80 จนใช้ในการเขียนเรียงความจุลชีววิทยา 2.5 การล. monocytogenes และ senteritidis ไส้กรอกไก่ หรือเกิดในการทดสอบของออได้กับเชื้อแบคทีเรียในตัวอย่างสายพันธุ์ไส้กรอกไก่ 25 gwith ช่วงล่างแบบมาตรฐาน โดย แม็คฟาร์แลนด์มาตรฐาน 0.5 มีความเข้มข้นของแบคทีเรีย approxi mately 105 โคโลนีสร้างหน่วย / garound 5 log CFU / กรัม หลังวอลุ่มของ O และ O . โหระพาออ vulgare เพิ่มต่างหาก ,เพื่อให้บรรลุความเข้มข้นของ 0.3mic OB tained ใน microdilution ก่อนหน้านี้ในหลอดทดลอง ) –ข้อมูลไม่แสดง , 1.0 และ 1.5 จากตัวอย่างไส้กรอก ทุกขั้นตอนของวิธีการในจาน Petri หมันขั้นตอนทั้งหมดได้ดำเนินการในการไหลแบบราบเรียบ และการจัดการของแบคทีเรียและการใช้ cutleryknife EO การฆ่าเชื้อและ forkmade ของเหล็กกล้าไร้สนิมตามการตัวอย่างไส้กรอกไว้ที่ 4 ตู้เย็นอุณหภูมิ หลังจาก 0 , 5 และ 24 ชั่วโมง ปริมาณของเชื้อแบคทีเรียในไส้กรอกตัวอย่างการวิเคราะห์โดย mpnmethod หมายเลขที่น่าจะเป็นมากที่สุด แม้จะมีลักษณะของ เอ็ม พี เอ็น techniquee . . ปริมาณขนาดใหญ่ของวัสดุที่จำเป็น ปริมาณงาน และเวลาที่จำเป็นเพื่อให้ identifica tionวิธีนี้เป็นวิธีที่พิสูจน์แล้วว่ามีความไวสูงและ reproducibility19 สูง เวลาที่แตกต่างกันถูกเลือกเพื่อตรวจสอบเวลาในการติดต่อ ถ้าอิทธิพลการต้านเชื้อแบคทีเรียของ ES sential น้ำมัน การทดสอบการควบคุมยังไม่เตรียมไว้ใช้ในการควบคุมเชื้อ oculatednegative ตัวอย่างไส้กรอกบวก controlboth ไม่เติมออ . หรือมีการปฏิบัติทั้งสามใบ การตรวจหาเชื้อ Listeria ,25 กรัมเป็นโฮโมแผงประดับหน้าอกกับ 225 มิลลิลิตร ในการ oxoidand pre - ของ brothlisteria broth บ่ม T 30 เป็นเวลา 4 ชั่วโมง ต่อไปนี้มีการเพิ่มการ agents40 มก. / ล. นาลิดิซิกแอซิด 50 มก. / ล. และร้อยเรียง 15 mg / l acriflavinewith reincubation ภายใต้อุณหภูมิเดียวกัน เป็นเวลา 48 ชั่วโมง ที่ 24 และ 48 ชั่วโมงเฉยๆถูกชุบด้วยความช่วยเหลือของโครเมียม นิกเกิล สายใน palcam agaroxoidincu ลด 35 เป็นเวลา 48 ชั่วโมง หลังจากช่วงเวลานี้ถึง 5 coloniesblack ด้วยรัศมีสีดำ เนื่องจาก B reakage aesculincharacteristics ถูกย้ายหลอดที่มี tsa-ye agartsa บวก 0.6 ยีสต์สกัด บ่มที่อุณหภูมิ 35 º C / 24 ชั่วโมงจากหุ้นนี้หลักฐานเบื้องต้นของ identifica tion เช่นกรัม staingram บวกแท่ง , reactionand catalasepositive ชุบวุ้นในการเคลื่อนที่เพื่อสังเกตการณ์ของการเจริญเติบโต เช่น ร่มในการวิจัย แล้วถ้าเป็น อาณานิคม สงสัยจะถูกระบุ ด้วยการช่วยเหลือของ api20 . ในการทดสอบกับเชื้อ Salmonella , มันคือ โว