Experimental design
In the present study, AMI and IMI were daily administered for 35 consecutive days beginning 2 weeks prior to rotenone administration to account for the delay in the therapeutic efficacy of antidepressants (Malberg and Blendy, 2005, Martinez-Turrillas et al., 2005 and Paumier et al., 2015). On the 15th day from the start of the experiment, rats in appropriate groups received rotenone or its solvent DMSO every other day for 3 weeks for a total of 11 injections (Fig. 1). Rats were divided into seven groups consisting of 24 rats each. Group I received saline (1 ml/kg, i.p.) for 35 days and served as control. Group II received 11 subcutaneous injections of 10% DMSO (0.2 ml/kg) every other day starting from the 15th day. Animals of groups III & IV received daily AMI (5 mg/kg, i.p.) (Paumier et al., 2015) and IMI (10 mg/kg, i.p.) (Daniel et al., 1981) for 35 consecutive days dissolved in physiological saline, respectively. Groups V–VII received 11 subcutaneous injections of rotenone (1.5 mg/kg) (Abdelkader et al., 2014) every other day starting from the 15th day dissolved in DMSO. Moreover, groups VI & VII were daily treated 1 h before rotenone injection with AMI and IMI as previously described, respectively. All rats were screened for motor impairment using the open field and rotarod tests, 24 h after the last rotenone injection. At the end of the observation period, animals in each group were further divided into three sets, then were sacrificed by cervical dislocation under anesthesia and the brain was carefully removed and washed with ice-cold saline. Dissection of each brain was performed on an ice-cold glass plate for separation of both striata. Thereafter in the first set both striata were homogenized in ice-cold saline for the evaluation of monoamines’ level. In the second set, both striata were homogenized in ice-cold saline for the estimation of malondialdehyde (MDA), superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and tumor necrosis factor-α (TNF-α). The last set was conducted to assess inducible nitric oxide synthase (iNOS) and BDNF expression as well as immunohistological alterations in the striata and SN of animals representing each group.
การออกแบบการทดลอง
ในการศึกษาปัจจุบัน, AMI และ IMI เป็นยาทุกวันเป็นเวลา 35 วันติดต่อกันเริ่มต้น 2 สัปดาห์ก่อนที่จะมีการบริหาร rotenone บัญชีสำหรับความล่าช้าในประสิทธิภาพการรักษาของยาแก้ซึมเศร้า (Malberg และ Blendy 2005 มาร์ติเน Turrillas et al., 2005 และ Paumier et al., 2015) ในวันที่ 15 จากจุดเริ่มต้นของการทดลองหนูในกลุ่มที่เหมาะสมได้รับ rotenone หรือ DMSO ตัวทำละลายของมันทุกวัน ๆ เป็นเวลา 3 สัปดาห์รวมเป็น 11 ฉีด (รูปที่ 1). หนูถูกแบ่งออกเป็นเจ็ดกลุ่มที่ประกอบด้วย 24 หนูแต่ละ กลุ่มที่ได้รับน้ำเกลือ (1 มล. / กก IP) เป็นเวลา 35 วันและทำหน้าที่เป็นผู้ควบคุม กลุ่มที่สองได้รับการฉีดใต้ผิวหนัง 11% ของ DMSO 10 (0.2 มล. / กก.) ทุกวัน ๆ เริ่มต้นจากวันที่ 15 สัตว์ในกลุ่มที่สามและที่สี่ได้รับทุกวัน AMI (5 mg / kg IP) (Paumier et al., 2015) และ IMI (10 mg / kg IP) (แดเนียล et al., 1981) เป็นเวลา 35 วันติดต่อกันละลายในทางสรีรวิทยา น้ำเกลือตามลำดับ กลุ่ม V-ปกเกล้าเจ้าอยู่หัวได้รับการฉีดใต้ผิวหนัง 11 ของ rotenone (1.5 มก. / กก.) (Abdelkader et al. 2014) ทุกวัน ๆ เริ่มต้นจากวันที่ 15 ละลายใน DMSO นอกจากนี้ยังมีกลุ่มที่หกและปกเกล้าเจ้าอยู่หัวได้รับการปฏิบัติในชีวิตประจำวัน 1 ชั่วโมงก่อนที่จะฉีด rotenone กับ AMI และ IMI ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ตามลำดับ หนูทั้งหมดถูกคัดกรองการด้อยค่ามอเตอร์ใช้เปิดสนามและ rotarod ทดสอบ 24 ชั่วโมงหลังจากการฉีด rotenone สุดท้าย เมื่อสิ้นสุดระยะเวลาการสังเกตสัตว์ในแต่ละกลุ่มถูกแบ่งออกเป็นสามชุดแล้วถูกเสียสละโดยการเคลื่อนที่ภายใต้ยาชาปากมดลูกและสมองจะถูกลบออกอย่างระมัดระวังและล้างด้วยน้ำเกลือเย็น ผ่าสมองของแต่ละที่ได้ดำเนินการบนแผ่นกระจกเย็นสำหรับการแยกของทั้งสอง striata หลังจากนั้นในชุดแรกทั้ง striata ถูกปั่นในน้ำเกลือเย็นสำหรับการประเมินผลของระดับ monoamines ฯ ในชุดที่สองทั้ง striata ถูกปั่นในน้ำเกลือเย็นเพื่อประมาณการการ Malondialdehyde (MDA) ที่ superoxide dismutase (SOD), catalase (กสท.) และเนื้อร้ายเนื้องอกปัจจัยα (TNF-α) ชุดที่ผ่านมาได้ดำเนินการในการประเมิน inducible เทสไนตริกออกไซด์ (iNOS) และการแสดงออก BDNF เช่นเดียวกับการปรับเปลี่ยน immunohistological ใน striata และ SN ของสัตว์ที่เป็นตัวแทนของแต่ละกลุ่ม
การแปล กรุณารอสักครู่..
