After hemodynamic data were collect

After hemodynamic data were collected, heparin (3000 U/kg, Sigma Chemical Co) was injected into an atrial appendage. The hearts were removed, blotted, weighed, and cannulated through the aorta for retrograde perfusion. The aorta was perfused with calcium-free Joklik medium (Sigma) containing 0.01 mmol/L EGTA (Sigma) followed by Joklik medium plus collagenase (Worthington Biochemical Co, 200 U activity/mL). Softened tissue was minced and poured through 250-μm nylon mesh for collection of myocytes. Isolated myocytes readily passed through the mesh, and incompletely digested clumps of tissue remained in the mesh. Freshly isolated cardiac myocytes were fixed immediately in a manner that does not alter cell volume.16 The isolated cell suspensions were centrifuged through a Ficoll gradient for removal of capillaries, blood cells, and other unwanted debris.17 With this procedure, the heavier myocytes tend to settle to the bottom of the centrifuge tube, and unwanted debris (capillaries, damaged cells, etc) tends to become more concentrated in the supernatant, which is discarded. To ensure that Ficoll treatment did not alter cell sampling, we measured mean cell length from samples before and after this procedure.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

หลังจากข้อมูลถูกรวบรวม เฮ (3000 U กิโลกรัม Sigma เคมี Co) ถูกฉีดเข้าไปในรยางค์หัวใจเต้น หัวใจถูกเอาออก blotted ชั่งน้ำหนัก และ cannulated โลหิตสำหรับกำซาบ retrograde ผ่าน โลหิตคือเนื้อกับฟรีแคลเซียม Joklik กลาง (Sigma) ที่ประกอบด้วย 0.01 โมล/L EGTA (Sigma) ตาม ด้วย Joklik ปานกลางบวกกับ collagenase (ธธิงชีวเคมี Co, 200 U กิจกรรม/มิลลิลิตร) เนื้อเยื่ออ่อนถูกบด และเทผ่านตาข่ายไนล่อน 250 μ m สำหรับคอลเลกชันของ myocytes Myocytes ที่แยกได้อย่างง่ายดายผ่านตาข่าย และกระจุกย่อยไม่สมบูรณ์ของเนื้อเยื่อที่ยังคงอยู่ในตาข่าย Myocytes หัวใจที่สดแยกได้รับการแก้ไขทันทีในลักษณะที่ไม่เปลี่ยนเซลล์ volume.16 สนองเซลล์ที่แยกได้จากผ่านการไล่ระดับสี Ficoll สำหรับกำจัดเส้นเลือดฝอย เม็ดเลือด และ debris.17 อื่น ๆ ที่ไม่พึงประสงค์กับกระบวนการนี้ myocytes หนักมักจะ ไปด้านล่างของหลอดหมุนเหวี่ยง และเศษขยะไม่พึงประสงค์ (เส้นเลือดฝอย เสียหาย ฯลฯ) มีแนวโน้มจะกลายเป็นความเข้มข้นใน supernatant มากขึ้น ซึ่งจะถูกยกเลิก เพื่อให้แน่ใจว่า Ficoll รักษาไม่เปลี่ยนแปลงสุ่มตัวอย่างเซลล์ เราวัดความยาวของเซลล์จากตัวอย่างก่อน และ หลังขั้นตอนนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หลังจากที่ถูกเก็บรวบรวมข้อมูลการไหลเวียนโลหิต, ยา heparin (3000 U / กก. ซิก Chemical Co) คือการฉีดเข้าไปในรยางค์ atrial หัวใจถูกถอดออกเปื้อนชั่งน้ำหนักและ cannulated ผ่านเส้นเลือดใหญ่สำหรับปะถอยหลังเข้าคลอง เส้นเลือดถูก perfused ที่มีแคลเซียมฟรี Joklik กลาง (ซิกม่า) ที่มี 0.01 มิลลิโมล / ลิตร EGTA (ซิกม่า) ตามด้วย Joklik กลางบวกคอลลา (วอร์ชิงตันชีวเคมี Co, 200 กิจกรรม U / มิลลิลิตร) เนื้อเยื่ออ่อนถูกสับและเทผ่านตาข่ายไนลอน 250 ไมครอนสำหรับคอลเลกชันของ myocytes myocytes บางแห่งผ่านได้อย่างง่ายดายผ่านตาข่ายและกระจุกย่อยไม่สมบูรณ์ของเนื้อเยื่อยังคงอยู่ในตาข่าย สด myocytes การเต้นของหัวใจบางแห่งได้รับการแก้ไขทันทีในลักษณะที่ไม่เปลี่ยนแปลงของเซลล์ volume.16 แขวนลอยเซลล์บางแห่งถูกปั่นผ่านการไล่ระดับสี Ficoll สำหรับการกำจัดของเส้นเลือดฝอยเซลล์เม็ดเลือดและ debris.17 ที่ไม่พึงประสงค์อื่น ๆ ที่มีขั้นตอนนี้จะมีการ myocytes หนักมีแนวโน้มที่ ที่จะชำระที่ด้านล่างของหลอด centrifuge และเศษที่ไม่พึงประสงค์ (เส้นเลือดฝอยเซลล์ที่เสียหาย ฯลฯ ) มีแนวโน้มที่จะกลายเป็นความเข้มข้นมากขึ้นในสารละลายซึ่งจะถูกยกเลิก เพื่อให้แน่ใจว่าการรักษา Ficoll ไม่ได้เปลี่ยนแปลงการสุ่มตัวอย่างมือถือที่เราหมายถึงวัดความยาวของเซลล์จากตัวอย่างก่อนและหลังขั้นตอนนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หลังจากเก็บข้อมูลการผลิต , เฮปาริน ( 3000 U / kg , Sigma เคมี Co ) ถูกฉีดเข้าไปในแขนขาไม่เป็น . หัวใจถูกลบออก , ลบ , ชั่งน้ำหนัก และ cannulated ผ่านหลอดเลือดแดงใหญ่เพื่อถอยหลังผ่าน . ใหญ่หนู แคลเซียม ฟรี joklik ขนาดกลาง ( Sigma ) ที่มีหน่วย 0.01 มิลลิโมล / ลิตร ( Sigma ) รองลงมา คือ joklik กลางพลัสคอลลาเจน ( Worthington ชีวเคมี Co , กิจกรรม 200 U / ml ) ทำให้เนื้อเยื่อที่สับแล้วเทผ่าน 250 - ตาข่ายไนล่อน M μสำหรับคอลเลกชันของ myocytes . แยก myocytes พร้อมผ่านตาข่ายและย่อยเนื้อเยื่อปกติอยู่อยู่ในตาข่าย แยกสด ๆหัวใจ myocytes ได้รับการแก้ไขทันทีในลักษณะที่ไม่มีการเปลี่ยนแปลง เซลล์ volume.16 แยกเซลล์แขวนลอยมีไฟฟ้าผ่าน ficoll ลาดสำหรับการกำจัดเส้นเลือดฝอย เลือด เซลล์ และที่ไม่พึงประสงค์อื่น ๆ debris.17 กับขั้นตอนนี้ myocytes หนักมีแนวโน้มที่จะตกลงไปด้านล่างของ centrifuge หลอดและไม่พึงประสงค์เศษ ( เส้นเลือด เซลล์ที่ถูกทำลาย , ฯลฯ ) มีแนวโน้มที่จะกลายเป็นเข้มข้นมากขึ้นในน่านซึ่งถูกละทิ้ง เพื่อให้แน่ใจว่า ficoll รักษาไม่ได้เปลี่ยนแปลงจำนวนเซลล์ที่เราวัดค่าเฉลี่ยความยาวของเซลล์จากตัวอย่างก่อนและหลังขั้นตอนนี้