were separated by ion exchange chromatography. Based on
the positive charge and ionic strength of amino acids, they
bind to the sulphonic group or to the silica matrix. The
entire amino acids move through the column at different
rate, based on their pK values, but also in part on their
adsorption or solubility in the silica particle. The amino
acid levels were determined using a reverse-phase high-performance
liquid chromatography system (Hewlett–Packard
model 1100 series, Hewlett–Packard, Palo Alto, CA, USA)
equipped with a Hypersil AA-ODS silica based C18 column
(200 mm · 2.1 mm) (Hewlett–Packard, Palo Alto,
CA, USA). Sodium acetate buffer (20 mM) with tetrahydrofuran
(3 ml L1
) was prepared and adjusted to a pH
of 7.2 with 1% acetic acid and to this mixture triethylamine
(180 ml L1
) was added and the pH was rechecked (mobile
phase A). Sodium acetate buffer (20 mM) was prepared
and adjusted to a pH 7.2, and methanol (400 ml L1
)
and acetonitrile (400 ml L1
) was added (mobile phase
B). The separation was achieved using a gradient program
by utilizing the two mobile phases according to the procedure
described by the manufacturer (Hewlett–Packard,
Palo Alto, CA, USA). Individual amino acids were identi-
fied by comparing their retention times with those of amino
acid standards (HP 5062–2478, Hewlett–Packard, Palo
Alto, CA, USA) run under identical conditions and
expressed as percentage of total amino acids.
แยกโดยโครมาโตกราฟีแลกเปลี่ยนไอออน ขึ้นอยู่กับความแรงของไอออนประจุบวก
และกรดอะมิโน พวกเขา
ผูกกับกลุ่ม sulphonic หรือซิลิกาเมทริกซ์
ทั้งหมดกรดอะมิโนที่ย้ายผ่านคอลัมน์ในอัตราที่แตกต่างกัน
, ตามค่า PK ของพวกเขา แต่ยังเป็นส่วนหนึ่งในการดูดซับหรือการละลายของพวกเขา
ในส่วนของอนุภาค อะมิโน
ระดับกรดถูกกำหนดใช้ขั้นตอนย้อนกลับที่มีประสิทธิภาพสูง
liquid chromatography ( Hewlett - Packard ระบบ
รุ่น 1100 ชุด , Hewlett - Packard , พาโลอัลโต , แคลิฟอร์เนีย , สหรัฐอเมริกา )
พร้อมขน aa-ods ซิลิกาคอลัมน์ ( c18
ตามด้วย 200 มม. 2.1 มม. ) ( Hewlett - Packard , Palo Alto ,
CA , USA ) . โซเดียมอะซิเตทบัฟเฟอร์ ( 20 มม. ) กับเตตระไฮโดรฟแรน
( 3 ml . l1
) ถูกเตรียมและปรับ pH
7 .2 กับ 1% กรดอะซิติกและส่วนผสมนี้ไตรเอตทิลามีน ( 180 มล. L1
) คือการเพิ่มและ pH rechecked ( มือถือ
เฟส ) โซเดียมอะซิเตทบัฟเฟอร์ ( 20 มม. ) เพื่อเตรียม
และปรับ pH 7.2 และเมทานอล ( 400 ml L1
) และ ไน ( 400 ml l1
) เพิ่ม ( มือถือ ) :
b ) การใช้โปรแกรมทำสีโดยการใช้ 2 มือถือ
ขั้นตอนตามขั้นตอนบรรยายโดยผู้ผลิต ( Hewlett - Packard ,
พาโลอัลโต แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา ) กรดอะมิโนเป็นบุคคล identi -
fied โดยเปรียบเทียบของพวกเขาเวลากักที่มีกรดอะมิโนมาตรฐาน
( HP 5062 – 2478 Hewlett และ Packard ,
, พาโลอัลโต , แคลิฟอร์เนีย , สหรัฐอเมริกา ) ทำงานภายใต้เงื่อนไขที่เหมือนกันและ
แสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของผลรวมกรดอะมิโน
.
การแปล กรุณารอสักครู่..