Lysozyme was produced by slightly modifying the
partial puriWcation step given in Jiang et al. (2001).
BrieXy, the egg whites separated carefully without disturbing
the egg yolks were Wrst diluted 3-fold with
0.05 M NaCl solution. To precipitate the egg white proteins
other than the lysozyme, the pH of this mixture was
set to 4.0 by carefully adding several drops of 1 N acetic
acid and it was diluted with equal volume of 60% (v/v)
ethanol. After 6 h incubation at room temperature in
presence of 30% ethanol, the mixture was centrifuged at
15,000g for 15 min at 4 °C and the precipitate was discarded.
The supernatant containing lysozyme was Wrst
dialyzed for 21 h at 4 °C by three changes of 2000 mL
distilled water and then lyophilized by using a freeze
drier (Labconco, FreeZone, 6 liter, Kansas City, MO,
USA) working between ¡44 and ¡47 °C collector temperature
and 50£10¡3
and 100 £10¡3 mbar vacuum.
The sample container volume was two to three times the
sample volume. The lyophilized enzymes used in Wlm
making were stored at ¡18 °C and their activities were
determined as U/mg before each Wlm preparation.
ไลโซไซม์ที่ผลิตโดยเล็กน้อยการปรับเปลี่ยนขั้นตอน puriWcation บางส่วนได้รับในเจียง et al,
(2001).
BrieXy,
ไข่ขาวแยกออกจากกันอย่างระมัดระวังโดยไม่ต้องรบกวนไข่แดงเป็นWrst เจือจาง 3 เท่ากับ
0.05 M NaCl การแก้ปัญหา เพื่อให้เกิดการตกตะกอนโปรตีนไข่สีขาวอื่น ๆ นอกเหนือจากไลโซไซม์ที่มีค่า pH ของส่วนผสมนี้ได้รับการตั้งค่าให้4.0 โดยระมัดระวังเพิ่มหลายหยด 1 N อะซิติกกรดและมันก็เจือจางด้วยปริมาณเท่ากับ60% (v / v) เอทานอล หลังจากบ่ม 6 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้องในการปรากฏตัวของเอทานอล30% ส่วนผสมที่ถูกหมุนเหวี่ยงที่15,000g 15 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียสและตะกอนที่ถูกทิ้ง. สารละลายที่มีส่วนผสมของไลโซไซม์ถูก Wrst dialyzed 21 ชั่วโมงที่ 4 ° C โดยสาม การเปลี่ยนแปลงของปี 2000 มิลลิลิตรน้ำกลั่นและแห้งแล้วโดยใช้แช่แข็งแห้ง(Labconco, FreeZone, 6 ลิตร, แคนซัสซิตี, MO, USA) การทำงานระหว่าง¡¡ 44 และ 47 องศาเซลเซียสอุณหภูมิเก็บและ50 £10¡3และ100 £ 10 ¡ 3 เอ็มบาร์สูญญากาศ. ปริมาณของภาชนะบรรจุตัวอย่างเป็น 2-3 เท่าของปริมาณตัวอย่าง เอนไซม์ที่ใช้ในการแห้ง WLM ทำถูกเก็บไว้ที่¡ 18 องศาเซลเซียสและกิจกรรมของพวกเขาถูกกำหนดเป็นU / มก. ก่อนที่จะเตรียมความพร้อมในแต่ละ WLM
การแปล กรุณารอสักครู่..

ไลโซไซม์ที่ผลิตโดยการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย
บางส่วน puriwcation ขั้นตอนให้เจียง et al . ( 2544 ) .
briexy , ไข่ขาวแยกออกอย่างระมัดระวังโดยไม่รบกวน
ไข่แดงเป็น wrst 3-fold
0.05 M NaCl เจือจางด้วยสารละลาย ตกตะกอนโปรตีนไข่สีขาว
นอกจากไลโซไซม์ , pH ของส่วนผสมนี้
ตั้ง 4.0 โดยรอบคอบเพิ่มหลายหยด 1
n ติคและกรดเจือจางด้วยปริมาณเท่ากับ 60 เปอร์เซ็นต์ ( v / v )
เอทานอล หลังจาก 6 ชั่วโมงบ่มที่อุณหภูมิห้องใน
มีเอทานอลผสมอยู่ที่ระดับ 30% ที่
15000g สำหรับ 15 นาทีที่ 4 ° C และที่ถูกทิ้ง ถูก wrst
ผ่านสูงที่มีไลโซไซม์ 21 4 ° C H ที่ 3 การเปลี่ยนแปลงของ 2000 ml
น้ำกลั่นแล้วแห้งโดย ใช้ตรึงแห้ง ( แล็บคอนโก้
,ฟรีโซน , 6 ลิตร , Kansas City , โม ,
USA ) ทำงานระหว่าง¡ 44 และ 47 ° C ¡สะสมอุณหภูมิ 50 กว่า 10 ¡
3
100 กว่า 10 ¡ 3 มิลลิบาร์ สูญญากาศ
ตัวอย่างภาชนะปริมาณเป็นสองถึงสามครั้ง
ตัวอย่างเสียง เอนไซม์โปรตีนที่ใช้ใน wlm
การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ¡ 18 ° C และกิจกรรมของพวกเขา
กำหนดเป็น U / mg ก่อนละ
wlm การเตรียม
การแปล กรุณารอสักครู่..
