this is evident while looking at the chromatograms in Fig. 2a and b:
the hump-shaped baseline right after the peak of interest is probably
due to the several co-eluting EDTA complexes with other metals
occurring in the formulation, which were not converted into the
Fe(III) complex (Fig. 2a). Hence, 5, 10, 20, and 35 mL of ferric chloride
were tested for the premix formulation: 35 mL for 2.5 g of formulation
were chosen, then added with 7 mL of water (final
volume = 42 mL). In these last conditions, the chromatogram
shows only the EDTA peak, thus clearly pointing out the quantitative
conversion of the EDTA species into the Fe(III)–EDTA chelate
(Fig. 2b). As an aqueous solution of ferric chloride is unstable, a
fresh solution was prepared every day, and the same stated for
standard solutions of EDTA. For the chromatographic analysis,
the choice of the best conditions involved the use of two analytical
columns: (1) a Lichrocart 100 RP-18 column (Merck KGaA,
250 4.6 mm, 5 lm); (2) a Kinetex C18 (Phenomenex, 300
2.1 mm, 2.6 lm). The former showed a poor peak shape on tested
standard solutions (4000–6000 theoretical plates), thus causing a
bad resolution of the complex Fe(III)–EDTA from interfering peaks
in samples. Kinetex C18 column, instead, provided higher effi-
ciency (15,000–20,000 theoretical plates) on both standard solutions
and feed samples, also allowing a total resolution among
the analyte peak and the multiple interfering species (Fig. 1b).
3. Validation: results and discussion
3.1. Specificity
Specificity means the ability of a method to distinguish between
the analyte being measured and other substances: in this case, the
acceptability criterion was the absence of interferents which may
possibly coelute with EDTA. EDTA retention time was checked by
using an EDTA standard for each batch of analyses, and no co-eluting
species were found. Specificity was evaluated by the analyses
of 10 blank feed samples, representative of the matrices which
the method was developed for.
นี้เห็นได้ชัดในขณะที่มอง chromatograms ในรูป 2a และ B:
โคกรูปพื้นฐานขวาหลังจากที่จุดสูงสุดของดอกเบี้ยอาจจะเนื่องมาจากหลายร่วม eluting คอมเพล็กซ์ EDTA กับโลหะอื่น ๆ ที่เกิดขึ้นในการกำหนดซึ่งไม่ได้ถูกแปลงเป็นเฟ (III) ที่ซับซ้อน (รูปที่ 2a.) . ดังนั้น, 5, 10, 20, และ 35 มลเฟอริกคลอไรด์ได้รับการตรวจสูตรพรีมิกซ์: 35 มิลลิลิตร 2.5 กรัมสูตรที่ได้รับเลือกเข้ามาแล้วกับ7 มิลลิลิตรน้ำ (สุดท้ายปริมาณ= 42 มิลลิลิตร) ในสภาพที่ผ่านมาเหล่านี้ chromatogram แสดงเฉพาะจุดสูงสุด EDTA จึงชี้ให้เห็นอย่างชัดเจนปริมาณการแปลงชนิดEDTA ลงในเฟ (III) คีเลต -EDTA (รูป. 2b) ในฐานะที่เป็นสารละลายเฟอริกคลอไรด์ไม่แน่นอนเป็นทางออกที่ถูกจัดทำสดใหม่ทุกวันเดียวกันที่ระบุไว้สำหรับการแก้ปัญหามาตรฐานของEDTA สำหรับการวิเคราะห์สารที่ทางเลือกของเงื่อนไขที่ดีที่สุดที่เกี่ยวข้องกับการใช้งานของทั้งสองการวิเคราะห์คอลัมน์: (1) Lichrocart 100 RP-18 คอลัมน์ (Merck KGaA,? 250 4.6 มม 5 LM); (2) Kinetex C18 (Phenomenex 300? 2.1 มม 2.6 ไมครอน) อดีตแสดงให้เห็นรูปร่างที่ไม่ดีสูงสุดในการทดสอบโซลูชั่นมาตรฐาน (4000-6000 แผ่นทฤษฎี) จึงก่อให้เกิดความละเอียดที่ไม่ดีของความซับซ้อนเฟ(III) -EDTA การแทรกแซงจากยอดเขาในตัวอย่าง คอลัมน์ Kinetex C18 แทนให้สูงที่สุดนั่นคือการขาด(15,000-20,000 แผ่นทฤษฎี) ทั้งการแก้ปัญหามาตรฐานและตัวอย่างอาหารที่ยังช่วยให้มีการลงมติในหมู่รวมสูงสุดวิเคราะห์และหลายชนิดรบกวน(รูป. 1 ข.) 3 การตรวจสอบ: ผลและการอภิปราย3.1 ความจำเพาะเฉพาะเจาะจงหมายถึงความสามารถของวิธีการที่จะแยกแยะความแตกต่างระหว่างการวิเคราะห์ที่มีการวัดและสารอื่นๆ ในกรณีนี้เกณฑ์การยอมรับเป็นกรณีที่ไม่มีinterferents ซึ่งอาจอาจcoelute กับ EDTA การเก็บรักษา EDTA เวลาถูกตรวจสอบโดยใช้มาตรฐานEDTA สำหรับชุดของการวิเคราะห์ในแต่ละครั้งและไม่ร่วม eluting สายพันธุ์ที่พบ จำเพาะถูกประเมินโดยการวิเคราะห์10 ตัวอย่างอาหารที่ว่างเปล่าเป็นตัวแทนของการฝึกอบรมซึ่งเป็นวิธีที่ได้รับการพัฒนา
การแปล กรุณารอสักครู่..