2. Materials and methods2.1. Microb

2. Materials and methods
2.1. Microbial strains and culture media
S. cerevisiae D5a is available as ATCC 200062 (American Type
Culture Collection, Manassas, VA, USA). S. cerevisiae YRH400
[21] maintains integrated copies of the xylose reductase,
xylitol dehydrogenase, and xylulokinase genes necessary for
xylose utilization. S. cerevisiae D5a and YRH400 were cultured
at 32 C in YPD medium (10 g yeast extract, 20 g peptone
(Becton Dickinson and Company, Sparks, MD, USA), and 20 g
glucose per L). E. coli FBR5 [18] carries the Zymomonas mobilis
pdc and adhB genes for fermentation of pyruvate to ethanol. E.
coli FBR5 was grown at 35 C in LB medium (10 g peptone, 5 g
yeast extract, and 5 g NaCl per L) containing 4 g/L xylose. C.
ligniaria NRRL30616 was subcultured periodically in mineral
medium (12.5 mM each Na2HPO4 and KH2PO4, 0.1% (w/v)
(NH4)2SO4, and 1 ml/L of Hutner’s mineral solution [25])
containing 10 mM furfural as the source of carbon and
energy.
2.2. Preparation of hydrolyzates
Rice hulls were obtained whole from Label Peelers (Kent, OH)
or as a 20/80 grind from Rice Hull Specialty Products (Stuttgart,
AR). Whole rice hulls were ground in a knife mill (Grindomix
GM200, Retsch GmbH, Haan, Germany) at 6000 rpm for 10 s
followed by grinding twice at 10,000 rpm for 30 s. The resulting
ground material passed through a No. 18 (1 mm) screen.
Ground rice hulls had a moisture content of 6.2% w/w and
contained 35.6  0.1% cellulose, 12.0  0.7% hemicellulose,
15.4  0.2% lignin, and 18.7  0.0% ash (w/w, dry basis).
The ground material was hydrolyzed in a rotating stainless
steel reactor equipped with infrared heating (Labomat BFA-12
v200, Werner Mathis, Concord, NC). Samples containing 30 g
biomass in 100 ml 1.0% (v/v) H2SO4 were heated (45 min) to
150 C, held for 20 min, and cooled (35 min) to room temperature.
Samples were rotated at 50 rpm during pretreatment. In
cases where solids were removed (centrifugation for 10 min,
25 C, 15,000 g), the solids were washed with a 10% volume of
sterile water, which was added back to the supernatant. The
combined supernatant plus wash liquid was adjusted to pH
6.5 with Ca(OH)2 and filter-sterilized prior to inoculation with

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. จุลินทรีย์สายพันธุ์และสื่อวัฒนธรรมเป็น D5a S. cerevisiae เป็น 200062 ATCC (ชนิดอเมริกันวัฒนธรรมชุด มานาสซาส VA สหรัฐอเมริกา) S. cerevisiae YRH400[21] รักษาสำเนา xylose reductase รวมไซลิทอ dehydrogenase และยีน xylulokinase ที่จำเป็นสำหรับการใช้ประโยชน์ xylose S. cerevisiae D5a และ YRH400 มีอ่างที่ 32 C ในกลาง YPD (สารสกัดจากยีสต์ 10 กรัม 20 กรัม peptone(Becton สัน และ บริษัท สปาร์ค MD สหรัฐอเมริกา), และ 20 กรัมกลูโคสต่อ L) E. coli FBR5 Zymomonas mobilis ลงโทษ [18]pdc และ adhB ยีนสำหรับหมัก pyruvate เพื่อเอทานอล อีcoli FBR5 ถูกปลูกที่ 35 C ในปอนด์ (peptone 10 กรัม 5 กรัมยีสต์สกัด และ 5 g NaCl ต่อ L) ประกอบด้วย xylose 4 g/L คligniaria NRRL30616 เป็น subcultured เป็นระยะ ๆ ในแร่ปานกลาง (12.5 มม.แต่ละ Na2HPO4 และ KH2PO4, 0.1% (w/v)(NH4) 2SO4 และ 1 ml/L ของโซลูชันแร่ของ Hutner [25])ประกอบด้วย 10 มม. furfural เป็นแหล่งของคาร์บอน และประหยัดพลังงาน2.2 การเตรียม hydrolyzatesแกลบได้รับทั้งหมดจากป้าย Peelers (Kent, OH)หรือเป็น 20/80 บดจากข้าวผลิตภัณฑ์พิเศษฮัลล์ (สตุทการ์ทAR) แกลบทั้งหมดมีพื้นในโรงงานผลิตมีด (GrindomixGM200, Retsch GmbH, Haan เยอรมนี) ที่ 6000 รอบต่อนาที 10 sตาม ด้วยคัฟครั้งที่ 10000 rpm สำหรับ 30 s การส่งผลวัสดุชั้นล่างผ่านหน้าจอหมายเลข 18 (1 mm)แกลบดินมีความชื้นของ 6.2% w/w และประกอบด้วยเซลลูโลส 0.1% 35.6, 12.0 hemicellulose 0.7%15.4 0.2% lignin และ 18.7 0.0% ขี้เถ้า (w/w แห้งพื้นฐาน)วัสดุพื้นถูก hydrolyzed ในการหมุนสแตนเลสเครื่องปฏิกรณ์เหล็กพร้อมอินฟราเรดความร้อน (Labomat BFA-12v200, Werner Mathis คอนคอร์ด NC) ตัวอย่างประกอบด้วย 30 กรัมชีวมวล 100 มล 1.0% (v/v) กำมะถันได้อุ่น (45 นาที)150 C จัดขึ้น 20 นาที และระบายความร้อนด้วย (35 นาที) อุณหภูมิห้องตัวอย่างมีหมุนที่รอบต่อนาที 50 ระหว่าง pretreatment ในกรณีที่ของแข็งถูกเอาออก (centrifugation สำหรับ 10 นาที25 C, g 15000), ของแข็งถูกล้างด้วย 10%กระบอกน้ำ ที่ถูกเพิ่มไป supernatant ที่รวมของเหลว supernatant บวกซักทำถูกปรับค่า pH6.5 กับ Ca (OH) 2 และตัวกรอง sterilized ก่อน inoculation ด้วย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 สายพันธุ์จุลินทรีย์และวัฒนธรรมสื่อ
S. cerevisiae D5A สามารถใช้ได้เป็น ATCC 200062 (American ประเภท
วัฒนธรรมเก็บซา, VA, USA) S. cerevisiae YRH400
[21] รักษาสำเนาแบบบูรณาการของ reductase ไซโลส,
ไซลิทอล dehydrogenase และยีน xylulokinase ที่จำเป็นสำหรับ
การใช้ไซโลส S. cerevisiae D5A และ YRH400 ถูกเลี้ยง
ที่ 32 องศาเซลเซียสใน YPD กลาง (10 กรัมสารสกัดจากยีสต์ 20 กรัมเปปโตน
(Becton ดิกคินสันและ บริษัท ประกายไฟ, MD, USA) และ 20 กรัม
น้ำตาลต่อลิตร) E. coli FBR5 [18] ดำเนิน Zymomonas mobilis
PDC และยีน adhB สำหรับการหมักเอทานอลไพรู E.
coli FBR5 เติบโตเป็นผู้ใหญ่ที่ 35 องศาเซลเซียสใน LB กลาง (10 กรัมเปปโตน, 5 กรัม
สารสกัดจากยีสต์และ 5 กรัมโซเดียมคลอไรด์ต่อลิตร) มี 4 กรัม / ลิตรไซโล C.
ligniaria NRRL30616 ได้รับเชื้อเป็นระยะ ๆ ในแร่
ปานกลาง (12.5 มมแต่ละ Na2HPO4 และ KH2PO4 0.1% (w / v)
(NH4) 2SO4 และ 1 มิลลิลิตร / ลิตรของการแก้ปัญหาแร่ Hutner ของ [25])
ที่มีขนาด 10 MM เฟอร์ฟูรัลเป็นแหล่ง ของคาร์บอนและ
พลังงาน
2.2 เตรียม hydrolyzates
แกลบที่ได้รับทั้งจาก Peelers ฉลาก (เคนโอ)
หรือเป็น 20/80 จากข้าวบดฮัลล์ผลิตภัณฑ์พิเศษ (สตุตกา,
AR) แกลบทั้งที่พื้นดินในโรงงานมีด (Grindomix
GM200, Retsch GmbH, Haan, เยอรมนี) ที่ 6000 รอบต่อนาที 10 วินาที
ตามด้วยบดเป็นครั้งที่สองที่ 10,000 รอบต่อนาที 30 วินาที ส่งผลให้
วัสดุพื้นดินผ่านฉบับที่ 18 (1 มิลลิเมตร) หน้าจอ
แกลบพื้นดินมีความชื้น 6.2% w / w และ
มี 35.6? 0.1% เซลลูโลส 12.0? 0.7% เฮมิเซลลูโลส
15.4? 0.2% ลิกนินและ 18.7? เถ้า 0.0% (w / W, พื้นฐานแห้ง)
วัสดุพื้นดินได้รับการไฮโดรไลซ์ในการหมุนสแตนเลส
เหล็กเครื่องปฏิกรณ์มีความร้อนอินฟราเรด (Labomat BFA-12
V200 เวอร์เนอร์ธิสคองคอร์ด) กลุ่มตัวอย่างที่มี 30 กรัม
ชีวมวลใน 100 มล 1.0% (v / v) H2SO4 ถูกความร้อน (45 นาที)
150? C, จัดขึ้นเป็นเวลา 20 นาทีและการระบายความร้อน (35 นาที) อุณหภูมิห้อง
ตัวอย่างกำลังหมุนที่ 50 รอบต่อนาทีในช่วงการปรับสภาพ . ใน
กรณีที่ของแข็งถูกถอดออก (ปั่นเป็นเวลา 10 นาที,
25? C, 15,000 กรัม) ของแข็งถูกล้างด้วยปริมาณ 10% ของ
น้ำที่ผ่านการฆ่าเชื้อที่ถูกเพิ่มเข้ามากลับไปยังใส
ใสรวมทั้งล้างของเหลวมีการปรับค่าพีเอช
6.5 กับ Ca (OH) 2 และกรองผ่านการฆ่าเชื้อก่อนที่จะมีการฉีดวัคซีนด้วย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . สายพันธุ์จุลินทรีย์ และวัฒนธรรมสื่อ
S . cerevisiae d5a ใช้ได้เป็นเชื้อ 200062 ( ชนิดของอเมริกัน
วัฒนธรรมคอลเลกชัน , กัวลาลัมเปอร์ , VA , USA ) S . cerevisiae yrh400
[ 21 ] รักษารวมสำเนาของไซโลสและไซลิทอลดีไฮโดรจีเนส และ xylulokinase
, ,
6 ยีนที่จำเป็นสำหรับการใช้ . และเพาะเชื้อ S . cerevisiae d5a yrh400
ที่ 32  C ใน ypd ปานกลาง ( 10 กรัม 20 กรัมยีสต์สกัด ( extract
, บริษัท , ประกายไฟ , MD , USA และเบคตอน Dickinson ) และกลูโคส 20 กรัมต่อลิตร
) E . coli fbr5 [ 18 ] อุ้ม Zymomonas mobilis
PDC และ adhb ยีนไพรูเวทสำหรับหมักเอทานอล E . coli fbr5
ปลูกที่ 35  C ใน LB medium ( 10 กรัม 5 กรัม extract สารสกัดจากยีสต์ ,
5 กรัมต่อลิตร และเกลือ ) ที่ประกอบด้วย 4 กรัม / ลิตร 6 . C .
ligniaria nrrl30616 คือ subcultured เป็นระยะ ๆแร่
ขนาดกลาง ( 12.5 มม. แต่ละ na2hpo4 kh2po4 และ 0.1% ( w / v )
( NH4 ) 2so4 และ 1 มิลลิลิตร / ลิตร hutner เป็นแร่โซลูชั่น [ 25 ] )
( Furfural 10 มม. เป็นแหล่งคาร์บอนและแหล่งพลังงาน

. . . การเตรียม hydrolyzates
เปลือกข้าวที่ได้รับทั้งจากป้ายตำรวจ ( เคนท์ , โอไฮโอ )
หรือเป็น 20 / 80 จากแกลบบดผลิตภัณฑ์พิเศษ ( สตุทการ์ท
AR )เปลือกข้าวทั้งหมดพื้นดินในมีดโรงงาน ( grindomix
gm200 retsch GmbH , แฮน , Germany ) ที่ 6 , 000 รอบต่อนาที 10
ตามบดสองครั้งที่ 10 , 000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 วินาทีที่เกิด
พื้นวัสดุผ่านหมายเลข 18 ( 1 มิลลิเมตร ) หน้าจอ
เปลือกข้าวบดมีความชื้นร้อยละ 6.2 % w / w และ
ที่มีอยู่ 35.6  0.1% เซลลูโลส , เฮมิเซลลูโลส
12.0  0.7% , 15.4  0.2 เปอร์เซ็นต์ลิกนินและ 18.7  0.0% แอช ( W / W ,บริการพื้นฐาน ) .
วัสดุพื้นดินถูกไฮโดรไลซ์ในการหมุนถังเหล็กสแตนเลส
อุปกรณ์ที่มีความร้อนอินฟราเรด ( labomat bfa-12
v200 , เวอร์เนอร์ Mathis , Concord NC ) ตัวอย่างที่มี 30 g
ชีวมวล 1.0% 100 มล. ( v / v ) กรดซัลฟิวริกเป็นอุ่น ( 45 นาที )

150  C จัดขึ้นเป็นเวลา 20 นาที และทำให้เย็น ( 35 นาที ) ที่อุณหภูมิห้อง
จำนวน 50 รอบในการหมุนที่ . ใน
กรณีที่ของแข็งถูกเอาออก ( ปั่น 10 นาที
25  C , 15 , 000 กรัมของแข็งถูกซัดด้วย 10% ของปริมาณ
น้ำหมัน ซึ่งเพิ่มกลับมาที่น่าน .
รวมสูงบวกกับของเหลวล้างปรับ pH
6.5 กับ Ca ( OH ) 2 ตัวกรองและฆ่าเชื้อก่อนใช้กับ