staining.For AO/PI staining, the Mn

staining.
For AO/PI staining, the Mn-treated and untreated Acanthamoeba cells were harvested and washed with PBS and
then incubated with 5μl of acridine orange (10μg/ml) and propidium iodide (10μg/ml) at a ratio of 1:1 in 1 ml of
cells and centrifuged at 1000 rpm/15 min. After centrifuge, supernatant was removed leaving 50 μl of residual
supernatant with pellet. The pellet was resuspended and 10 μl was pipetted on the slide before putting on the cover
slip. Within 30 min, the slide was analyzed using fluorescence microscope (Leica, Germany).
2.3 Analysis of DNA damage by Alkaline Comet Assay
Analysis of DNA damage by alkaline comet assay for Acanthamoeba sp. was performed after 2 h treatment with
Mn in six-well plates containing trophozoites (104 cell/ml) at their IC25 concentration. The alkaline comet assay
protocol described by Lah et al. [2] was followed. One hundred cells on each slide with three replicates were
viewed, classified and quantified based on descriptions by Collins [10]. Kruskal-Wallis Test was used to analyse the
data obtained from the comet scoring.
3. Results and discussion
Anthropogenic activities have led to metal pollution in the water bodies as it threatened some of the aquatic

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ย้อมสีสำหรับ อ่าว/PI ย้อมสี เซลล์ Acanthamoeba ถือ ว่า Mn และไม่ถูกรักษาเก็บเกี่ยว และล้าง ด้วย PBS และแล้ว incubated กับ 5μl acridine orange (10μg/ml) และ propidium ไอโอไดด์ (มล 10μg) ที่อัตราส่วน 1:1 ใน 1 มิลลิลิตรของเซลล์ และ centrifuged ที่ 1000 รอบต่อ นาที/15 min หลังจากเครื่องหมุนเหวี่ยง supernatant ถูกเอาออกจาก 50 μl ของส่วนที่เหลือจากsupernatant กับเม็ด เม็ดถูก resuspended และ 10 μl มี pipetted บนภาพนิ่งก่อนที่จะวางบนฝาจัดส่ง ภายใน 30 นาที ภาพนิ่งถูกวิเคราะห์โดยใช้กล้องจุลทรรศน์ fluorescence (ไล เยอรมนี)2.3 การวิเคราะห์ความเสียหายของดีเอ็นเอโดยวิเคราะห์ดาวหางด่างทำการวิเคราะห์ความเสียหายของดีเอ็นเอโดยวิเคราะห์ดาวหางด่างสำหรับ Acanthamoeba sp.หลังการรักษา 2 h ด้วยMn ในดีหกแผ่นประกอบด้วย trophozoites (104 เซลล์/มล.) ที่ความเข้มข้นของ IC25 วิเคราะห์ดาวหางด่างโพรโทคอลโดย Lah et al. [2] อธิบายได้ตาม มีหนึ่งร้อยเซลล์บนภาพนิ่งด้วยเหมือนกับสามดู จัด และ quantified ตามคำอธิบายตามคอลลินส์ [10] ทดสอบ Kruskal วาลลิถูกใช้เพื่อวิเคราะห์ความต้องการข้อมูลที่ได้จากการให้คะแนนดาวหาง3. ผลลัพธ์ และสนทนากิจกรรมที่มาของมนุษย์ได้นำไปสู่มลพิษโลหะในแหล่งน้ำมันถูกคุกคามของน้ำ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

.
การย้อมสีสำหรับย้อมสีAO / PI ที่ Mn รับการรักษาและเซลล์ Acanthamoeba
ได้รับการรักษาที่ถูกเก็บเกี่ยวและล้างด้วยพีบีเอสและบ่มแล้วกับ5μlส้มacridine (10μg / ml) และไอโอไดด์ propidium (10μg / ml) ในอัตราส่วน 1: 1 ใน 1
มิลลิลิตรของเซลล์และหมุนเหวี่ยงที่1,000 รอบต่อนาที / 15 นาที หลังจากเหวี่ยง, ใสถูกลบออกออกจาก 50
เหลือไมโครลิตรของสารละลายที่มีเม็ด เม็ดถูก resuspended และ 10
ไมโครลิตรถูกปิเปตบนภาพนิ่งก่อนที่จะวางบนหน้าปกใบ ภายใน 30 นาที, สไลด์ได้รับการวิเคราะห์โดยใช้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง (Leica, เยอรมนี).
2.3 การวิเคราะห์ความเสียหายของดีเอ็นเอโดยอัลคาไลน์ดาวหาง Assay
การวิเคราะห์ความเสียหายของดีเอ็นเอด้วยวิธีดาวหางด่างสำหรับ Acanthamoeba SP ได้ดำเนินการหลังจาก 2 ชั่วโมงกับการรักษา
Mn ในหกแผ่นเดียวที่มี trophozoites (104 เซลล์ / มล.) ที่มีความเข้มข้น IC25 ของพวกเขา การทดสอบดาวหางด่างโปรโตคอลอธิบายโดยหละ et al,
[2] ตามมา หนึ่งร้อยเซลล์บนสไลด์ที่มีสามซ้ำแต่ละดูจำแนกและปริมาณขึ้นอยู่กับรายละเอียดโดยคอลลิน [10]
ทดสอบ Kruskal-Wallis
ถูกใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูลที่ได้จากการให้คะแนนของดาวหาง.
3 ผลการอภิปรายและกิจกรรม Anthropogenic ได้นำไปสู่มลพิษโลหะในร่างกายของน้ำในขณะที่มันขู่ว่าบางส่วนของน้ำ