Initial validation experiments were

Initial validation experiments were conducted to determine optimal primer
annealing temperatures and to ensure that PCRs were reproducible (R2N0.98) and
that orexin, GnRH and EF1α had equivalent PCR efficiencies (0.99% for OX and GnRH
and 1.03% for EF1α). Following the validation experiments, relative quantification
experiments were conducted on 96-well plates under the following conditions: 95 °C
for 5 min followed by 40 cycles of 95 °C for 15 s, 60 °C for 15 s and 68 °C for 20 s. Samples
were analyzed in duplicate, and experiments were repeated at least twice. In all cases, a
no template negative control (in which cDNAs were replaced by water) was included.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การทดลองการตรวจสอบครั้งแรกได้ดำเนินการเพื่อตรวจสอบที่ดีที่สุดของไพรเมอร์
อุณหภูมิการหลอมและเพื่อให้แน่ใจว่ามี PCRs ทำซ้ำ (r2n0.98) และ
ว่า orexin gnrh และef1αมีประสิทธิภาพเทียบเท่า pcr (0.99% วัวและ gnrh
และ 1.03% ในef1α) . ต่อไปนี้การทดลองการตรวจสอบปริมาณญาติ
ทดลองได้ดำเนินการบนจาน 96 ดีภายใต้เงื่อนไขต่อไปนี้95 ° c
เป็นเวลา 5 นาทีตามด้วย 40 รอบจาก 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 วินาที, 60 ° C เป็นเวลา 15 และ 68 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 s
ตัวอย่างการวิเคราะห์ในที่ซ้ำกันและทดลองซ้ำแล้วซ้ำอีกอย่างน้อยสองครั้ง ในทุกกรณี
ไม่มีการควบคุมเชิงลบแม่แบบ (ซึ่ง cDNAs ถูกแทนที่ด้วยน้ำ) ถูกรวม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ได้ดำเนินการตรวจสอบเริ่มต้นทดลองกำหนดรองพื้นดีที่สุด
อุณหภูมิการอบเหนียวและ เพื่อให้แน่ใจว่า PCRs ถูกจำลอง (R2N0.98) และ
orexin ที่ บางส่วนและ EF1α มีประสิทธิภาพเทียบเท่าการ PCR (0.99% สำหรับวัวและบางส่วน
และ 1.03% EF1α) ขั้นทดลองสอบ นับญาติ
ได้ดำเนินการทดลองในแผ่น 96 ดีภายใต้เงื่อนไขต่อไปนี้: 95 ° C
สำหรับ 5 นาทีตาม ด้วยรอบ 40 95 องศาเซลเซียส 15 s, 60 ° C สำหรับ s 15 และ 68 ° C สำหรับ 20 ตัวอย่าง s.
ถูกวิเคราะห์ในซ้ำ และทดลองได้ที่ ในทุกกรณี การ
ควบคุมไม่ลบแม่แบบ (ใน cDNAs ที่ถูกแทนที่ ด้วยน้ำ) ถูกรวม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การตรวจสอบการทดลองครั้งแรกได้ทำการตรวจสอบอย่างมี ประสิทธิภาพ เชื้อปะทุ
annealing อุณหภูมิ และเพื่อตรวจสอบให้แน่ใจว่าได้เกิดขึ้นซ้ำเดิมได้ pcrs ( R 2 N 0.98 )และ
ที่ orexin , gnrh และ EF 1 กล้องมี ประสิทธิภาพ เทียบเท่า pcr ( 0.99% สำหรับวัวและ gnrh
และ 1.03% สำหรับ EF 1 กล้อง) ต่อไปนี้:การทดลองการตรวจสอบจึงจำเป็นต้องมีการทดลอง
ซึ่งจะช่วยญาติได้ทำใน 96 - แผ่นความร้อนเป็นอย่างดี ภายใต้ เงื่อนไขต่อไปนี้:95 ° C
สำหรับ 5 นาทีตามด้วย 40 รอบของ 95 ° C 15 s 60 ° C 15 s และ 68 ° C 20 S ตัวอย่าง
ซึ่งจะช่วยได้วิเคราะห์ในที่ซ้ำซ้อนและการทดลองอยู่หลายครั้งอย่างน้อยสองครั้ง ในทุกกรณีไม่มีเทมเพลต
ซึ่งจะช่วยให้การควบคุมลบ(ในที่ cdnas ถูกแทนด้วยน้ำ)ให้มา