MicroRNAs (miRNAs) from milk whey h

MicroRNAs (miRNAs) from milk whey have been considered for their potential as noninvasive biomarkers for milk quality control and disease diagnosis. However, standard protocols for miRNA isolation and quantification from milk whey are not well established. The objective of this study was to compare two methods for the isolation of miRNAs from milk whey. These two methods were modified phenol-based technique (Trizol LS® followed by phenol precipitation, the TP method) and combined phenol and column-based approach (Trizol LS® followed by cleanup using the miRNeasy kit, the TM method). Yield and quality of RNA were rigorously measured using a NanoDrop ND-1000 spectrophotometer and then the distribution of RNA was precisely detected in a Bioanalyzer 2100 instrument by microchip gel electrophoresis. Several endogenous miRNAs (bta-miR-141, bta-miR-146a, bta-miR-148a, bta-miR-200c, bta-miR-362, and bta-miR-375) and an exogenous spike-in synthetic control miRNA (cel-miR-39) were quantified by real-time polymerase chain reaction (PCR) to examine the apparent recovery efficiency of milk whey miRNAs. Both methods could successfully isolate sufficient small RNA (

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

MicroRNAs (miRNAs) จากนมเวย์ได้รับการพิจารณาสำหรับศักยภาพเป็น biomarkers noninvasive เพื่อควบคุมคุณภาพนมและการวินิจฉัยโรค อย่างไรก็ตาม โพรโทคอลมาตรฐานสำหรับการแยกเที่ยวและนับจากหางนมนมไม่ดี วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้เป็นการ เปรียบเทียบสองวิธีการแยกของ miRNAs จากนมเวย์ สองวิธีแก้ไขเทคนิคใช้ฟีนอล (Trizol LS ®ตาม ด้วยฝนฟีนอล วิธี TP) และรวมสารฟีนอลและวิธีใช้คอลัมน์ (Trizol LS ®ตาม ด้วยล้างใช้ชุด miRNeasy วิธี TM) ผลผลิตและคุณภาพของ RNA เคร่งครัดวัด spectrophotometer NanoDrop ND-1000 แล้ว การกระจายของ RNA อย่างแม่นยำพบในเครื่อง Bioanalyzer 2100 โดยไมโครเจอิ หลาย miRNAs ภายนอก (bta-มีร์-141, bta-มีร์-146a, bta-มีร์-148a, bta-มีร์ - 200c, bta-มีร์-362 และ bta-มีร์-375) และเที่ยวภายนอกเข็มในสังเคราะห์ควบคุม (cel มีร์ 39) ถูกวัด โดยปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสแบบเรียลไทม์ (PCR) การตรวจสอบประสิทธิภาพการกู้คืนที่ชัดเจนของนมเวย์ miRNAs ทั้งสองวิธีสามารถแยก RNA ขนาดเล็กที่เพียงพอแล้ว (< 200 nt) จากนม เวย์ และผลตอบแทนของพวกเขาค่อนข้างคล้ายกัน อย่างไรก็ตาม ผลการนับแสดงว่าประสิทธิภาพการกู้คืนเที่ยวรวม โดยวิธี TM เหนือที่ โดยวิธี TP TM วิธีดำเนินการดีกว่า TP ในนมเวย์เที่ยวเนื่องจากความสอดคล้องและความดีในเที่ยวภายนอก และเก็บชั่วคราวในการกู้คืน นอกจากนี้ วิเคราะห์เชิงปริมาณกู้เที่ยวเข็มอาจยิ่งถึงนมเวย์เที่ยวกู้คืนประสิทธิภาพมากกว่าการใช้ RNA คุณภาพวิเคราะห์เครื่องดนตรีโบราณ (NanoDrop หรือ Bioanalyzer 2100)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

microRNAs (miRNAs) จากหางนมได้รับการพิจารณาศักยภาพของพวกเขาเป็น biomarkers ไม่รุกล้ำสำหรับการควบคุมคุณภาพนมและการวินิจฉัยโรค อย่างไรก็ตามโปรโตคอลมาตรฐานสำหรับ miRNA การแยกและการหาปริมาณจากหางนมยังไม่ได้จัดตั้งขึ้นรวมทั้ง วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้คือการเปรียบเทียบสองวิธีสำหรับการแยก miRNAs จากหางนมนม ทั้งสองวิธีมีการแก้ไขเทคนิคฟีนอลที่ใช้ (Trizol LS®ตามด้วยการเร่งรัดฟีนอล, วิธี TP) และฟีนอลรวมและวิธีการของคอลัมน์-based (Trizol LS®ตามด้วยการทำความสะอาดโดยใช้ชุด miRNeasy วิธีของ TM) ผลผลิตและคุณภาพของ RNA ถูกวัดอย่างจริงจังโดยใช้ spectrophotometer NanoDrop ND-1000 และจากนั้นการกระจายของ RNA ที่ถูกตรวจพบได้อย่างแม่นยำใน Bioanalyzer 2,100 เครื่องโดย Microchip gel electrophoresis miRNAs ภายนอกหลายคน (BTA เมียร์-141, BTA เมียร์-146A, BTA เมียร์-148a, BTA เมียร์-200C, BTA เมียร์-362 และ BTA เมียร์-375) และภายนอกขัดขวางใน miRNA ควบคุมสังเคราะห์ (Cel เมียร์-39) ได้รับการวัดโดยแบบ real-time วิธี Polymerase chain reaction (PCR) เพื่อตรวจสอบประสิทธิภาพการกู้คืนที่ชัดเจนของ miRNAs หางนม ทั้งสองวิธีประสบความสำเร็จสามารถแยก RNA เพียงพอขนาดเล็ก (<200 NT) จากหางนมและอัตราผลตอบแทนของพวกเขาค่อนข้างคล้าย อย่างไรก็ตามผลปริมาณแสดงให้เห็นว่าทั้งหมดมีประสิทธิภาพการกู้คืน miRNA โดยวิธี TM จะดีกว่าที่จะว่าด้วยวิธีการค่า TP วิธี TM ดำเนินการดีกว่า TP สำหรับการกู้คืนของ miRNA นมเวย์เนื่องจากความสอดคล้องและการทำซ้ำที่ดีในภายนอกและขัดขวางการกู้คืนใน miRNA นอกจากนี้การวิเคราะห์เชิงปริมาณของการกู้คืนขัดขวางใน miRNA อาจจะถูกต้องมากขึ้นเพื่อสะท้อนให้เห็นนมเวย์ที่มีประสิทธิภาพการกู้คืน miRNA กว่าการใช้เครื่องมือวิเคราะห์คุณภาพ RNA แบบดั้งเดิม (NanoDrop หรือ Bioanalyzer 2100)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

micrornas ( mirnas ) จากโปรตีนนมได้รับการพิจารณาศักยภาพของพวกเขาเป็นซึ่งไม่ควบคุมคุณภาพน้ำนมและการวินิจฉัยโรค อย่างไรก็ตาม โปรโตคอลมาตรฐานสำหรับการแยกและ mirna ปริมาณจากหางนมนมยังไม่ขึ้นดี การวิจัยครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อเปรียบเทียบสองวิธีสำหรับการแยก mirnas จากโปรตีนนม ทั้งสองวิธีนี้เป็นเทคนิคดัดแปลง ฟีนอลตาม ( trizol ® LS ตามด้วยการตกตะกอน , ฟีนอล TP วิธี ) และรวมฟีนอลและคอลัมน์ตามแบบ ( trizol LS ®ตามด้วยล้างโดยใช้ชุด mirneasy TM วิธี ) ผลผลิตและคุณภาพของอาร์เอ็นเอเป็นอย่างจริงจังวัดโดยใช้ nanodrop nd-1000 Spectrophotometer และการกระจายของ RNA ถูกแน่นอนที่ตรวจพบใน bioanalyzer 2100 โดยเครื่องมือไมโครเจล หลายใน mirnas ( bta-mir-141 bta-mir-146a bta-mir-148a bta-mir-200c , , , , bta-mir-362 และ bta-mir-375 ) และขัดขวางจากภายนอกใน mirna ควบคุมสังเคราะห์ ( cel-mir-39 ) เป็นวัดโดยแบบปฏิกิริยาลูกโซ่ ) เพื่อตรวจสอบประสิทธิภาพของ whey mirnas แจ้งกู้น้ำนม ทั้งสองวิธีประสบความสำเร็จสามารถแยก RNA ขนาดเล็กเพียงพอ ( < 200 NT ) จากโปรตีนนมและผลผลิตของพวกเขามีความคล้ายคลึงกันมาก อย่างไรก็ตาม ปริมาณผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าประสิทธิภาพโดยรวม mirna การกู้คืนซึ่งวิธีดีกว่าว่าโดย TP ด้วย ซึ่งวิธีปฏิบัติที่ดีกว่า TP สำหรับการกู้คืนของนมเวย์ mirna เนื่องจากมีความสอดคล้องและที่ดีในการพบและขัดขวางในการกู้คืน mirna . นอกจากนี้ การวิเคราะห์เชิงปริมาณของการกู้คืนขัดขวางใน mirna อาจจะถูกต้องมากขึ้นสะท้อนให้เห็นถึงนมเวย์ mirna การกู้คืนประสิทธิภาพมากกว่าการใช้แบบดั้งเดิม ซึ่งการวิเคราะห์คุณภาพเครื่องมือ ( nanodrop หรือ bioanalyzer 2100 )