Extraction of proteins from MBM was performed according to the method described by Garcia and Phillips (2009) with a slight modification. For the preparation of MBM protein, MBM was treated with five volumes of 0.1 mol/L NaCl solution for 30 min. The mixture was then homogenized using a homogenizer (IKA, Ultra-Turrax T25, Staufan, Germany) at 10,000 rpm for 30 min and a sonicator (Model-GE 750, Sonics & Materials, Newtown, CT, USA) for 15 min. The soluble fraction was obtained by heating the sample at 60 °C for 3 h, followed by centrifugation and precipitation with 70% ammonium sulfate. The solution was dialyzed using regenerated cellulose dialysis tubing (MWCO, 3.5 kDa, Spectrum Laboratories, Inc., Rancho Dominguez, CA, USA) and lyophilized.
การสกัดโปรตีนจากความที่ดำเนินการตามวิธีการอธิบายไว้ โดยการ์เซียและไขควง (2009) มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย สำหรับการจัดเตรียมโปรตีนความ ความถูกรักษา ด้วยวอลุ่มห้าของโมล 0.1 L NaCl โซลูชันสำหรับ 30 นาที ส่วนผสมได้แล้ว homogenized เป็นกลุ่มใช้ homogenizer (IKA, T25 Ultra-Turrax, Staufan เยอรมนี) ที่ 10000 rpm 30 นาทีและ sonicator (750 รุ่น GE, Sonics และวัสดุ Newtown, CT สหรัฐอเมริกา) ใน 15 นาที เศษส่วนละลายกล่าว ด้วยความร้อนอย่างที่ 60 ° C สำหรับ 3 h ตาม centrifugation และฝนกับ 70% แอมโมเนียซัลเฟต โซลูชันถูก dialyzed โดยใช้ท่อหน่วยสร้างเซลลูโลส (MWCO, 3.5 kDa ปฏิบัติ Inc. ของสเปกตรัม Rancho Dominguez, CA, USA) และ lyophilized
การแปล กรุณารอสักครู่..
การสกัดโปรตีนจาก MBM ได้ดำเนินการตามวิธีการที่อธิบายไว้โดยการ์เซียและฟิลลิป (2009) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย สำหรับการเตรียมความพร้อมของโปรตีน MBM ที่ MBM รับการรักษาด้วยห้าเล่ม 0.1 โมล / ลิตรแก้ปัญหาโซเดียมคลอไรด์เป็นเวลา 30 นาที ส่วนผสมที่ถูกปั่นจากนั้นใช้โฮโมจีไน (IKA, อัลตร้า Turrax T25, Staufan, เยอรมนี) ที่ 10,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 นาทีและคลื่นเสียง (Model-GE 750, Sonics และวัสดุนิวทาวน์, CT, USA) เป็นเวลา 15 นาที ส่วนที่ละลายน้ำได้ด้วยความร้อนตัวอย่างที่ 60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 ชั่วโมงตามด้วยการหมุนเหวี่ยงและฝนที่มีแอมโมเนียมซัลเฟต 70% วิธีการแก้ปัญหาที่ถูกสร้างขึ้นใหม่โดยใช้ dialyzed ท่อล้างไตเซลลูโลส (MWCO 3.5 กิโลดาลตันสเปกตรัม Laboratories, Inc Rancho Dominguez, CA, USA) และแห้ง
การแปล กรุณารอสักครู่..
การสกัดโปรตีนจาก MBM มีการปฏิบัติตามวิธีการที่อธิบายโดยการ์เซียและ Phillips ( 2009 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย สำหรับการเตรียมการของโปรตีน MBM , MBM ได้รับการห้าเล่ม 0.1 mol / L NaCl สารละลายเป็นเวลา 30 นาที ผสมแล้วใช้เครื่องปั่นบด ( Ika ultra turrax t25 staufan , เยอรมัน , ที่ 10 , 000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 นาทีและเครื่องเขย่าแบบเสียง ( รุ่น GE 750 ,sonics &วัสดุ , Newtown , CT , สหรัฐอเมริกา ) นาน 15 นาที ส่วนที่ละลายน้ำได้ โดยความร้อนที่ 60 ° C ตัวอย่าง 3 H , ตามด้วยการปั่นเหวี่ยงและการตกตะกอนด้วยแอมโมเนียมซัลเฟต 70 % . สารละลายที่ผ่านการใช้อาการฟกช้ำไต ท่อ ( mwco 3.5 กิโล สเปกตรัมห้องปฏิบัติการ , Inc , Rancho Dominguez , CA , USA ) และแห้ง .
การแปล กรุณารอสักครู่..