2. Experimental2.1. Materials and r

2. Experimental
2.1. Materials and reagents
Different brands of soy sauce samples were purchased from
local supermarkets. Standards of benzoic acid (BA, 99.5%), sorbic
acid (SA, 99%) and cinnamic acid (CA, 99%) were purchased from Fluka (Shanghai, China). Sodium hydroxide (99%), ammonium
acetate (98%) and hydrochloric acid (12 mol/L) were obtained from
Hewei Chemical Co. (Shanghai, China). Methanol (HPLC grade) was
purchased from Zhengxin Chemical Co. (Shanghai, China).
2.2. Preparation and storage of standards
Standard stock solutions containing 1000 mg/L each of BA or SA
was prepared in water (Milli-Q). The mixture was shaken well until
a homogenous and clear solution formed. If necessary, a small
amount of methanol was added to help dissolution. The same
method was applied to prepare a 500 mg/L internal standard CA
stock solution. All stock solutions were covered with aluminum
foil, stored in a freezer (4 C) and away from light (ready for a
maximum usage of one month). Before each experiment, BA and
SA standard solutions were prepared in the same volumetric flask,
and then diluted to five different concentrations in the range 20–
100 mg/L at constant intervals, where 50 mg/L internal standard
(CA) was added to every diluted standard solution.
2.3. Sample preparation
2.3.1. Extraction procedure
Approximately 1 g of sample was accurately weighed in a 10 mL
capped test tube. A 0.5 mL aliquot of the internal standard CA stock
solution, 0.5 mL hydrochloric acid–water (1:1, v/v) and 5 mL
diethyl ether were then added successively. The mixture was then
sonicated for 1 min before being allowed to separate into layers.
The upper ether layer was quantitatively transferred by an injector
to another 10 mL capped test tube.
2.3.2. Back extraction procedure
A 1 mL aliquot of aqueous sodium hydroxide (0.1 M) was added
to the diethyl ether extracts. The resulting mixture was sonicated
for 1 min, and then allowed to separate into layers. The upper ether
layer was discarded, and the lower aqueous layer was placed in a
40 C water bath to evaporate any residual diethyl ether. Finally,
the residue was transferred to a 5 mL volumetric flask and diluted
with water to scale.
2.4. Chromatographic conditions
Analytical separation was carried out on an Agilent 1100 HPLC
unit using a Supelco 516 C18 column (25 cm  4.6 mm, 5 lm) at
room temperature. The detector used was an UV–vis spectrophotometer
set at 225 nm and the volume of sample injected was
20 lL. The mobile phase used was methanol–ammonium acetate
buffer (0.02 M) (30:70, v/v); the flow rate was 1 mL/min.
3. Results and discussion
3.1. Calibration curve and detection limit
The calibration curve was constructed by plotting the peak area
ratio of BA or SA and the internal standard CA against the concentration
of BA or SA. Excellent linearity was obtained within the
concentration range of 20–100 mg/L (the wavelength used to perform
the calibration was 225 nm), giving both samples a correlation
coefficient of 0.9996.
The detection limit of BA, SA and CA was found to be 0.2, 0.1 and
0.5 mg/L respectively in the final solution when the signal-to-noise
ratio was greater than 3:1.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. ทดลอง2.1. วัสดุและ reagentsซื้อจากยี่ห้ออื่นอย่างซอสถั่วเหลืองซูเปอร์มาร์เก็ตท้องถิ่น มาตรฐานของกรด benzoic (BA, 99.5%), sorbicกรด (SA, 99%) และกรดทรานส์-ซินนามิก (CA, 99%) ซื้อจาก Fluka (เซี่ยงไฮ้ ประเทศจีน) โซเดียมไฮดรอกไซด์ (99%) แอมโมเนียacetate (98%) และกรดไฮโดรคลอริก (12 โมล/L) ได้รับมาจากHewei เคมี จำกัด (เซี่ยงไฮ้ จีน) มีเมทานอล (HPLC เกรด)ซื้อจาก Zhengxin เคมี จำกัด (เซี่ยงไฮ้ จีน)2.2 การเตรียมและการจัดเก็บมาตรฐานแก้หุ้นประกอบด้วย 1000 mg/L แต่ละ BA หรือ SAถูกเตรียมในน้ำ (-Q) ส่วนผสมถูกเขย่ากันจนการแก้ปัญหาที่ชัดเจน และให้เกิดขึ้น ถ้าจำเป็น ขนาดเล็กมีเพิ่มปริมาณเมทานอลจะช่วยให้ยุบ เหมือนเดิมใช้วิธีการเตรียม 500 mg/L CA ภายในมาตรฐานแก้ปัญหาหุ้น โซลูชั่นหุ้นทั้งหมดถูกปกคลุม ด้วยอลูมิเนียมฟอยล์ เก็บไว้ ในตู้เย็น (4 C) และ อยู่ไฟ (พร้อมสำหรับการสูงสุดใช้หนึ่งเดือน) ก่อนที่แต่ละการทดลอง BA และโซลูชั่นมาตรฐาน SA ถูกเตรียมใน volumetric หนาวเหมือนกันและทำให้เจือจางให้ความเข้มข้นแตกต่างกันห้าในช่วง 20 –100 mg/L ในช่วงเวลาคง ที่ 50 mg/L ภายในมาตรฐาน(CA) ถูกเพิ่มเข้าไปทุกโซลูชั่นมาตรฐานที่แตกออก2.3. ตัวอย่าง2.3.1 การสกัดขั้นตอนประมาณ 1 กรัมของตัวอย่างมีน้ำหนักใน 10 mL อย่างถูกต้องร็อคกี้หลอดทดสอบ ส่วนลงตัว 0.5 mL ของหุ้นภายในมาตรฐาน CAโซลูชั่น 0.5 mL กรดไฮโดรคลอริกน้ำ (1:1, v/v) และ 5 mLdiethyl อีเทอร์ถูกเพิ่มติด ๆ กันด้วย ส่วนผสมได้แล้วsonicated ใน 1 นาทีก่อนจะอนุญาตให้แบ่งชั้นชั้นบนอีเทอร์ถูกโอนย้าย โดยการอัด quantitativelyไปอีก 10 mL ปรบมือหลอดทดสอบ2.3.2. กระบวนการแยกกลับเพิ่มส่วนลงตัว 1 mL ของอควีโซเดียมไฮดรอกไซด์ (0.1 M)การอีเทอร์ diethyl แยก ส่วนผสมได้ที่ sonicatedใน 1 นาที และสามารถแยกเป็นชั้น อีเทอร์ด้านบนชั้นถูกปฏิเสธ และชั้นอควีล่างถูกวางไว้ในอาบน้ำ 40 C การระเหยอีเทอร์ใด ๆ diethyl เหลือ สุดท้ายสารตกค้างถูกโอนย้ายไปหนาว volumetric 5 mL และผสมด้วยน้ำขนาด2.4. chromatographic เงื่อนไขแยกวิเคราะห์ถูกดำเนินการบนตัว 1100 Agilent HPLCหน่วยที่ใช้คอลัมน์ Supelco 516 C18 (25 ซม. 4.6 มม. 5 lm) ที่ที่อุณหภูมิห้อง ใช้เครื่องตรวจจับมี UV – vis เครื่องทดสอบกรดด่างตั้งอยู่ที่ 225 nm และปริมาตรของตัวอย่างที่ฉีด20 จะ ระยะเคลื่อนที่ใช้คือ เมทานอลแอมโมเนีย acetateบัฟเฟอร์ (0.02 M) (30:70, v/v); อัตราการไหล 1 mL/min3. ผลลัพธ์ และสนทนา3.1 การเทียบเส้นโค้งและการตรวจสอบวงเงินเทียบเส้นโค้งถูกสร้าง โดยการลงจุดพื้นที่สูงสุดอัตราส่วนของ BA หรือ SA และ CA มาตรฐานภายในกับความเข้มข้นBA หรือ SA แบบดอกไม้ที่ยอดเยี่ยมได้รับภายในช่วงความเข้มข้น 20 – 100 mg/L (ความยาวคลื่นใช้ในการดำเนินการการปรับเทียบ 225 nm), ให้ทั้งตัวอย่างความสัมพันธ์สัมประสิทธิ์ของ 0.9996ตรวจสอบจำนวน BA, SA และ CA พบได้ 0.2, 0.1 และ0.5 mg/L ตามลำดับในการแก้ปัญหาขั้นสุดท้ายเมื่อสัญญาณกับเสียงอัตราส่วนมากกว่า 3:1

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. การทดลอง
2.1 วัสดุและสารเคมี
แบรนด์ที่แตกต่างกันของกลุ่มตัวอย่างซอสถั่วเหลืองซื้อจาก
ซูเปอร์มาร์เก็ตในท้องถิ่น มาตรฐานของกรดเบนโซอิก (BA, 99.5%) ซอร์บิค
กรด (SA, 99%) และกรดซินนามิก (CA, 99%) ซื้อจาก Fluka (เซี่ยงไฮ้) โซดาไฟ (99%), แอมโมเนียม
อะซิเตท (98%) และกรดไฮโดรคลอริก (12 โมล / ลิตร) ที่ได้รับจาก
Hewei เคมิคอล จำกัด (เซี่ยงไฮ้) เมทานอล (เกรด HPLC) ถูก
ซื้อมาจาก Zhengxin เคมิคอล จำกัด (เซี่ยงไฮ้).
2.2 การจัดเตรียมและจัดเก็บข้อมูลของมาตรฐาน
มาตรฐานการแก้ปัญหาที่มีหุ้น 1,000 มิลลิกรัม / ลิตรแต่ละปริญญาตรีหรือ SA
ถูกจัดทำขึ้นในน้ำ (Milli-Q) ส่วนผสมที่ถูกเขย่าให้เข้ากันจน
เป็นเนื้อเดียวกันการแก้ปัญหาที่เกิดขึ้นและชัดเจน ถ้าจำเป็นขนาดเล็ก
ปริมาณของเมทานอลถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อช่วยให้สลายตัว เช่นเดียวกับ
วิธีการที่ถูกนำมาใช้เพื่อเตรียมความพร้อม 500 มิลลิกรัม / ลิตรภายในมาตรฐาน CA
แก้ปัญหาสต็อก ทั้งหมดโซลูชั่นหุ้นถูกปกคลุมไปด้วยอลูมิเนียม
ฟอยล์ที่เก็บไว้ในช่องแช่แข็ง (4 องศาเซลเซียส) และอยู่ห่างจากแสง (พร้อมสำหรับ
การใช้งานสูงสุดของหนึ่งเดือน) ก่อนการทดลองแต่ละปริญญาตรีและ
SA โซลูชั่นมาตรฐานที่เตรียมในขวดปริมาตรเดียวกัน
และเจือจางแล้วถึงห้าระดับความเข้มข้นที่แตกต่างกันในช่วง 20
100 มิลลิกรัม / ลิตรในช่วงเวลาคงที่ 50 มิลลิกรัม / ลิตรมาตรฐานภายใน
(CA) ได้ถูกเพิ่มเข้าไป ทุกสารละลายมาตรฐานเจือจาง.
2.3 เตรียมตัว
2.3.1 ขั้นตอนการสกัด
ประมาณ 1 กรัมของกลุ่มตัวอย่างได้รับการชั่งน้ำหนักอย่างถูกต้องใน 10 มิลลิลิตร
หลอดทดลองต่อยอด 0.5 มิลลิลิตร aliquot ของ CA มาตรฐานภายในหุ้น
วิธีการแก้ปัญหา 0.5 มิลลิลิตรไฮโดรคลอริกกรดน้ำ (1: 1, v / v) และ 5 มิลลิลิตร
อีเทอร์ถูกแล้วเพิ่มอย่างต่อเนื่อง ส่วนผสมก็
sonicated เวลา 1 นาทีก่อนที่จะได้รับอนุญาตให้แยกออกเป็นชั้น.
ชั้นบนอีเทอร์ถูกย้ายเชิงปริมาณโดยหัวฉีด
ไปยังอีกหลอดทดลอง 10 มิลลิลิตรต่อยอด.
2.3.2 ขั้นตอนการสกัดกลับ
aliquot มิลลิลิตร 1 จากโซดาไฟน้ำ (0.1 M) ถูกเพิ่มเข้ามา
ในการสกัดอีเทอร์ ส่วนผสมที่เกิดถูก sonicated
เวลา 1 นาทีและได้รับอนุญาตแล้วจะแยกเป็นชั้น อีเทอร์บน
ชั้นทิ้งและชั้นน้ำลดลงอยู่ใน
40? C อ่างน้ำจะระเหยอีเทอร์ตกค้างใด ๆ สุดท้าย
ที่เหลือถูกย้ายไป 5 มิลลิลิตรขวดปริมาตรและเจือจาง
กับน้ำขนาด.
2.4 เงื่อนไขโครมา
แยกวิเคราะห์ได้รับการดำเนินการเกี่ยวกับ Agilent 1100 HPLC
หน่วยใช้ Supelco 516 C18 คอลัมน์ (25 ซม.? 4.6 มม 5 LM) ที่
อุณหภูมิห้อง เครื่องตรวจจับที่ใช้เป็น spectrophotometer UV-Vis
ตั้งไว้ที่ 225 นาโนเมตรและปริมาณของตัวอย่างฉีดเป็น
20 LL ขั้นตอนการใช้โทรศัพท์มือถือเป็นเมทานอลแอมโมเนียมอะซิเตท-
บัฟเฟอร์ (0.02 M) (30:70, v / v); อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาที.
3 และการอภิปรายผล
3.1 เส้นโค้งการสอบเทียบและการตรวจสอบวงเงิน
กราฟมาตรฐานที่ถูกสร้างขึ้นโดยการวางแผนพื้นที่สูงสุด
อัตราส่วนของบริติชแอร์เวย์หรือ SA และ CA มาตรฐานภายในกับความเข้มข้น
ของบริติชแอร์เวย์หรือ SA เชิงเส้นที่ยอดเยี่ยมที่ได้รับใน
ช่วงความเข้มข้นของ 20-100 มิลลิกรัม / ลิตร (ความยาวคลื่นที่ใช้ในการดำเนินการ
สอบเทียบเป็น 225 นาโนเมตร) ทำให้กลุ่มตัวอย่างทั้งความสัมพันธ์
ของค่าสัมประสิทธิ์ 0.9996.
ขีด จำกัด ของการตรวจสอบของบริติชแอร์เวย์, SA และแคลิฟอร์เนียพบว่า 0.2, 0.1 และ
0.5 มิลลิกรัม / ลิตรตามลำดับในการแก้ปัญหาสุดท้ายเมื่อสัญญาณต่อเสียงรบกวน
อัตราส่วนสูงกว่า 3: 1

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . ทดลอง
2.1 . วัสดุและสารเคมี
แบรนด์ที่แตกต่างของซอสถั่วเหลืองจำนวนที่ซื้อจากซุปเปอร์มาร์เก็ตท้องถิ่น
. มาตรฐานของกรดเบนโซอิก ( BA , 99.5% ) , กรดซอร์บิค
( SA , 99% ) และกรดซินนามิก ( CA , 99% ) ซื้อจาก fluka ( เซี่ยงไฮ้ , จีน ) โซเดียม ไฮดรอกไซด์ ( 99% ) แอมโมเนีย
เทต ( 98% ) และกรดไฮโดรคลอริก ( 12 mol / L ) ได้จาก
hewei Chemical Co . ( เซี่ยงไฮ้ , จีน )เมทานอล ( ป. 2 ) คือ
ซื้อจาก zhengxin Chemical Co . ( เซี่ยงไฮ้ , จีน ) .
2.2 . การเตรียมและกระเป๋าของมาตรฐาน
มาตรฐานสินค้าโซลูชั่น 1000 mg / L แต่ละ BA หรือซา
เตรียมไว้ในน้ำ ( milli-q ) ส่วนผสมที่ถูกเขย่าจนเป็นเนื้อเดียว และชัดเจนดี
แก้ปัญหาที่เกิดขึ้น ถ้าจำเป็น เล็กน้อย
เมธาเพิ่มเพื่อช่วยในการละลาย เหมือนกัน
วิธีถูกนำมาใช้เพื่อเตรียม 500 ลิตรมาตรฐานภายใน CA
โซลูชั่นหุ้นมิลลิกรัม โซลูชั่นหุ้นทั้งหมดถูกปกคลุมด้วยอลูมิเนียม
ฟอยล์ , เก็บไว้ในช่องแช่แข็ง ( 4  C ) และอยู่ห่างจากแสง ( พร้อมสำหรับ
การใช้งานสูงสุดของหนึ่งเดือน ) ก่อนที่แต่ละการทดลองและ BA
ซาโซลูชั่นมาตรฐานที่เตรียมไว้ในขวดปริมาตรเดียวกัน
แล้วประมาณ 5 ระดับความเข้มข้นในช่วง 20 –
100 มิลลิกรัม / ลิตร ในช่วงเวลาคงที่ที่ 50 mg / l
มาตรฐานภายใน ( CA ) คือเพิ่มทุกมาตรฐานสารละลายเจือจาง .
2.3 ตัวอย่างการเตรียม
2.3.1 . ขั้นตอนการสกัด
ประมาณ 1 กรัมของน้ำหนักตัวอย่างถูกต้องใน 10 ml
ปรบมือหลอดทดสอบ 0.5 ml ส่วนลงตัวของมาตรฐานภายใน CA หุ้น
สารละลายกรด–น้ำ 0.5 มล. ( 1 : 1 v / v )
5 มล.อีเทอร์ แล้วเพิ่มไปเรื่อยๆ ผสมส่วนผสมแล้ว
sonicated 1 นาทีก่อนที่จะได้รับอนุญาตให้แยกเป็นชั้น ชั้นอีเทอร์
ชั้นบนหรือโอนโดยการฉีดไปยังอีก 10 ml ปกคลุม

หลอดทดสอบ 2.3.2 . กลับขั้นตอนการสกัด
1 มิลลิลิตรของสารละลายโซเดียม ไฮดรอกไซด์ ( ส่วนลงตัว 0.1 M ) เพิ่ม
กับ diethyl ether สารสกัด ผล sonicated
ผสม1 นาที และได้รับอนุญาตให้แยกเป็นชั้น ชั้นอีเทอร์
ด้านบนถูกทอดทิ้งและลดน้ำชั้นวางใน C
40  นํ้าระเหยไดเอทิลอีเธอร์ที่เหลือใด ๆ . ในที่สุด
กากถูกส่งไป 5 มล. ปริมาตรขวด แล้วเจือจางด้วยน้ำ )
.
2.4 . เมื่อวิเคราะห์แยกเป็นเงื่อนไข
ดําเนินการเกี่ยวกับ Agilent 1100 HPLC
หน่วยที่ใช้ supelco 516 คอลัมน์ C18 25 ซม.  4.6 มม. 5 กล. )
อุณหภูมิห้อง เครื่องตรวจจับที่ใช้เป็น UV Spectrophotometer ( 2
ตั้งไว้ที่ 225 นาโนเมตร และปริมาตรของตัวอย่างที่ฉีดคือ
20 จะ เฟสเคลื่อนที่ที่ใช้เมทานอลและแอมโมเนียมอะซิเตทบัฟเฟอร์ ( 0.02 M )
( 30 : 70 , v / v ) ; อัตราการไหลเท่ากับ 1 มิลลิลิตร / นาที
3 ผลและการอภิปราย
3.1 . เส้นโค้งสอบเทียบ และขีดจำกัดของ
มีรูปโค้งถูกสร้างขึ้นโดยวางแผนพื้นที่
ยอดอัตราส่วนของ BA หรือ SA และมาตรฐานภายใน CA กับสมาธิ
BA หรือซา เส้นตรงที่ยอดเยี่ยมได้ภายในช่วง 20 –
ความเข้มข้น 100 mg / l ( ความยาวคลื่นที่ใช้แสดง
สอบเทียบคือ 225 นาโนเมตร ) ให้ทั้งสองตัวอย่างความสัมพันธ์ของค่าสัมประสิทธิ์ 0.9996
.
ขีดจำกัดของบาซา และแคลิฟอร์เนีย พบว่า 0.2 0.1 และ 0.5 มก. / ล. ตามลำดับ
ในสารละลายเมื่ออัตราส่วน
มากกว่า 3 : 1 .