2. Materials and methods 2.1. Plant

2. Materials and methods
2.1. Plant materials
Leenawaty Limantara et al. / Procedia Chemistry 14 ( 2015 ) 225 – 231
227
Green leafy vegetables were collected from three different supermarkets in Malang area (East Java, Indonesia).
All samples were purchased early in the morning, transported into laboratory and directly measured by in vivo
procedure for SPAD value and % N. Then, the samples were stored at -18 °C deep freezer for further in vitro
analysis. The whole experiment was accomplished during May 2014 until June 2014.
2.2. In vivo assay
The relative chlorophyll content (SPAD value) and % N were determined by means of SPAD-502 chlorophyll
meter (Konica Minolta, Japan) and nitrogen meter Agriexpert CCN 6000 (Satake, Japan), respectively. The adaxial
side of the leaves was always placed toward the emitting window of the instrument and major veins were avoided.
Each leaf, based on its total leaf area, was marked in five up to 14 representative points for in vivo measurements,
and
the average value was calculated. As for basil, due to its small size, seven leaves were used with two up to three
spots of measurement each. This method was i
ntended to overcome the influence of non-uniform distribution of
chlorophyll in the leaf, and hence producing more representative data.
2.3. In vitro assay
Liquid nitrogen was poured to accurately weighted 0.2 g of leaf samples, and then the frozen leaf was ground in a
porcelain
mortar and added with 3 mL methanol (Merck, Germany). The extraction was continued by using Vortex
f
or 10 s with inert atmosphere. After that, the extract was filtered (0.22 μm

–1
and detection was performed over the range
400 nm to 700 nm.
2.4. Data analysis
The figures were created from numeric data and plotted using Origin 7 Software (OriginLab) and Microsoft
Ex
cel 2013. The data were expressed as the mean ± standard error of the mean (SEM).
3. Results and discussion
Ten green leafy vegetables were successfully collected from three different supermarkets in Malang (Table 1),
ex
cept basil and sword-leaf lettuce which were not available in the third supermarket during this time of research.
Af
ter purchasing, samples were subsequently subjected to in vivo and in vitro measurement. All measurements were
co
nducted under the same light condition in order to eliminate data variation caused by difference of light
in
terference which may lead to pigment degradation or any disturbance in instrumentation. Identical in vitro
extraction and HPLC procedure was similarly employed for all samples.
Fig. 1 shows the SPAD values of ten green leafy vegetables purchased from three supermarkets in Malang. The
average o
f SPAD values ranges from the lowest 2.7 ± 0.8 of head cabbage (Kbs) up to the highest 52.4 ± 3.7 of
C
hinese cabbage pak-choi (Pch). The SPAD value is proportional to the relative amount of chlorophyll content and
co
nsistent with their colour appearance, in which the head cabbage has light green leaves, whereas Chinese cabbage
pak-choi has darker green foliage. Higher SPAD value signi
fies higher chlorophyll content. Three vegetables
showed low SPAD value (below 30), i.e. head cabbage (Kbs), green leaf lettuce (Sel), and sword-leaf lettuce (Sak).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 วัสดุพืช
Leenawaty Limantara et al, / Procedia เคมี 14 (2015) 225 - 231
227
ผักใบเขียวที่ถูกเก็บรวบรวมจากสามซูเปอร์มาร์เก็ตที่แตกต่างกันในพื้นที่มาลัง (ชวาตะวันออกอินโดนีเซีย).
ตัวอย่างทั้งหมดที่ซื้อมาในช่วงเช้าเคลื่อนย้ายเข้าไปในห้องปฏิบัติการและโดยตรงที่วัดโดยในร่างกาย
ขั้นตอนสำหรับการ ค่า SPAD และเอ็น% จากนั้นกลุ่มตัวอย่างที่ถูกเก็บไว้ที่ -18 องศาเซลเซียสแช่แข็งลึกต่อไปในหลอดทดลอง
การวิเคราะห์ การทดลองทั้งหมดก็ประสบความสำเร็จในช่วงพฤษภาคม 2014 จนถึงเดือนมิถุนายนปี 2014
2.2 ในการทดสอบร่างกาย
เนื้อหาญาติคลอโรฟิล (ค่า SPAD) และ% N ได้รับการพิจารณาโดยวิธีการของ SPAD-502 คลอโรฟิล
เมตร (Konica Minolta, ญี่ปุ่น) และไนโตรเจนเมตร Agriexpert CCN 6000 (Satake ญี่ปุ่น) ตามลำดับ adaxial
ด้านข้างของใบถูกวางเสมอไปทางหน้าต่างเปล่งแสงของตราสารและเมเจอร์เส้นเลือดเลี่ยง.
แต่ละใบขึ้นอยู่กับพื้นที่ใบของมันทั้งหมดถูกทำเครื่องหมายในห้าถึง 14 จุดตัวแทนสำหรับการตรวจวัดในร่างกาย
และ
ค่าเฉลี่ย ที่คำนวณได้ สำหรับโหระพาเนื่องจากขนาดที่เล็กของเจ็ดใบถูกนำมาใช้กับสองถึงสาม
จุดของการวัดแต่ละ วิธีการนี้คือผม
ntended ที่จะเอาชนะอิทธิพลของการกระจายไม่สม่ำเสมอของ
คลอโรฟิลในใบและด้วยเหตุนี้การผลิตข้อมูลตัวแทน.
2.3 ในการทดสอบในหลอดทดลอง
ไนโตรเจนเหลวถูกเทไปอย่างถูกต้องถ่วงน้ำหนัก 0.2 กรัมของตัวอย่างใบแล้วใบแช่แข็งพื้นดินใน
พอร์ซเลน
ปูนและเพิ่มเข้ามาด้วย 3 มลเมทานอล (เมอร์ค, เยอรมนี) สกัดได้อย่างต่อเนื่องโดยใช้ Vortex
F
หรือ 10 S กับบรรยากาศเฉื่อย หลังจากนั้นสารสกัดถูกกรอง (0.22 ไมครอน-1 และการตรวจสอบได้ดำเนินการมากกว่าช่วง400 นาโนเมตรถึง 700 นาโนเมตร. 2.4. การวิเคราะห์ข้อมูลตัวเลขที่ถูกสร้างขึ้นจากข้อมูลที่เป็นตัวเลขและพโดยใช้แหล่งกำเนิดสินค้า 7 ซอฟต์แวร์ (OriginLab) และ Microsoft Ex Cel 2013 . ข้อมูลแสดงเป็นค่าเฉลี่ย±ข้อผิดพลาดมาตรฐานของค่าเฉลี่ย (SEM). 3. ผลการทดลองและการอภิปรายสิบผักใบเขียวที่ถูกเก็บรวบรวมประสบความสำเร็จจากสามซูเปอร์มาร์เก็ตที่แตกต่างกันในมาลัง (ตารางที่ 1), อดีตโหระพา CEPT และผักกาดหอมใบดาบซึ่ง ไม่สามารถใช้ในซูเปอร์มาร์เก็ตที่สามในช่วงเวลาของการวิจัยครั้งนี้. Af ซื้อตรีตัวอย่างถูกยัดเยียดต่อมาในร่างกายและในการวัดหลอดทดลอง. วัดทั้งหมดได้ร่วมnducted ภายใต้สภาพแสงเดียวกันเพื่อที่จะกำจัดการเปลี่ยนแปลงข้อมูลที่เกิดจากความแตกต่างของแสงในterference ซึ่งอาจนำไปสู่การสลายตัวของเม็ดสีหรือสร้างความวุ่นวายใด ๆ ในวัด. เหมือนกันในหลอดทดลองสกัดและวิธี HPLC ถูกจ้างมาในทำนองเดียวกันสำหรับทุกตัวอย่าง. รูป. 1 แสดงค่า SPAD สิบผักใบเขียวที่ซื้อมาจากสามซูเปอร์มาร์เก็ตในมาลัง เฉลี่ย o F ค่า SPAD ช่วงจากต่ำสุด 2.7 ± 0.8 ของหัวกะหล่ำปลี (มขนาด) ขึ้นไปสูงสุด 52.4 ± 3.7 ของC hinese กะหล่ำปลีปาก Choi (PCH) ค่า SPAD เป็นสัดส่วนกับจำนวนเงินที่ญาติของคลอโรฟิลและร่วมnsistent มีลักษณะสีของพวกเขาซึ่งในกะหล่ำปลีหัวมีใบสีเขียวอ่อนในขณะที่ผักกาดขาวปลีปาก Choi มีใบสีเขียวเข้ม สูงกว่าค่า SPAD นัยสำคัญFIES เนื้อหาคลอโรฟิลที่สูงขึ้น สามผักแสดงให้เห็นว่าค่าต่ำ SPAD (ต่ำกว่า 30) คือหัวกะหล่ำปลี (มขนาด) ผักกาดหอมใบสีเขียว (Sel) และผักกาดหอมใบดาบ (สัก)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ2.1 . วัสดุพืชleenawaty limantara et al . / procedia เคมี 14 ( 2015 ) 225 – 231227ผักใบเขียว รวบรวมจากสามซูเปอร์มาร์เก็ตที่แตกต่างกันในพื้นที่ Malang ( ชวาตะวันออก ประเทศอินโดนีเซีย )ตัวอย่างทั้งหมดที่ซื้อมาตอนเช้า ส่งเข้าห้องปฏิบัติการ และวัดโดยตรงโดยในสัตว์ทดลองวิธีพิจารณาค่าสปาดและ % N . แล้วตัวอย่างที่อุณหภูมิ - 18 องศา C ตู้แช่ลึกต่อไปในหลอดทดลองการวิเคราะห์ การทดลองทั้งหมดที่ประสบความสำเร็จในช่วงเดือนพฤษภาคมจนถึงเดือนมิถุนายน 2014 20142.2 . โดยการทดสอบส่วนปริมาณสัมพัทธ์ ( ค่าสปาด ) และ % N ถูกกำหนดโดยวิธีการ spad-502 คลอโรฟิลล์เครื่องวัด ( Konica Minolta , ญี่ปุ่น ) และไนโตรเจน 4 เมตร agriexpert 6000 ( ซาตาเกะ ญี่ปุ่น ) ตามลำดับ การแก่ด้านข้างของใบมักอยู่ทางหน้าต่างเครื่องมือเปล่งและเส้นเลือดหลัก คือหลีกเลี่ยงแต่ละใบ ยึดพื้นที่ใบของมันทั้งหมด , เครื่องหมายห้าถึงจุด 14 ตัวแทนในตัววัด ,และค่าเฉลี่ยที่คำนวณได้ . สำหรับโหระพา เนื่องจากขนาดที่เล็กของ เจ็ดใบ ใช้ กับ สองถึง สามจุดในการวัดแต่ละ วิธีนี้ผมntended เอาชนะอิทธิพลของความไม่สม่ำเสมอของการกระจายของคลอโรฟิลล์ในใบไม้ ดังนั้นการผลิตข้อมูลตัวแทนมากขึ้น2.3 ในนอร์เวย์ไนโตรเจนเหลวถูกเทให้ถูกต้องหนัก 0.2 กรัมตัวอย่างใบแล้วแช่ใบพื้นดินในพอร์ซเลนครกเติมเมทานอล 3 ml ( Merck , เยอรมัน ) การสกัดได้ อย่างต่อเนื่อง โดยการใช้ .เอฟหรือ 10 บรรยากาศก๊าซเฉื่อย หลังจากนั้น สกัดถูกกรอง ( 0.22 μม.– 1และการกระทำมากกว่า ช่วง400 nm 700 นาโนเมตร2.4 . การวิเคราะห์ข้อมูลตัวเลขที่ถูกสร้างขึ้นจากข้อมูลตัวเลข และวางแผนการใช้ซอฟต์แวร์ที่มา 7 ( originlab ) และไมโครซอฟท์อดีตเซล 2013 ข้อมูลที่แสดงเป็นค่าเฉลี่ย±ความคลาดเคลื่อนมาตรฐานของค่าเฉลี่ย ( SEM )3 . ผลและการอภิปรายผักใบเขียวสิบเรียบร้อยแล้วจำนวนสามซูเปอร์มาร์เก็ตที่แตกต่างกันใน Malang ( ตารางที่ 1 )อดีตโหระพา CEPT และดาบใบผักกาดหอมซึ่งไม่สามารถใช้ได้ในซูเปอร์มาร์เก็ตที่สามในช่วงเวลานี้ของการวิจัยAFเธอซื้อตัวอย่าง ต่อมาภายใต้ชนิดของการวัดหลอด วัดทั้งหมดคือบริษัทnducted ภายใต้สภาพแสงเดียวกัน เพื่อขจัดข้อมูลการเปลี่ยนแปลงที่เกิดจากความแตกต่างของแสงในterference ซึ่งอาจนำไปสู่ความเสื่อมโทรมของเม็ดสี หรือรบกวนการใช้เครื่องมือวัด เหมือนกันในหลอดทดลองการสกัดและขั้นตอน HPLC ได้เหมือนกับในตัวอย่างเลยรูปที่ 1 แสดงสปาดคุณค่าของผักใบเขียวสิบซื้อจากซุปเปอร์มาร์เก็ตใน Malang . ที่โดยโอสปาดค่า F ช่วงต่ำสุด 2.7 ± 0.8 ของหัวกะหล่ำปลี ( KBS ) ขึ้นไปสูงสุด 52.4 ของ± 3.7ซีhinese กะหล่ำปลีผักฉ่อย ( pch ) ค่าสปาดเป็นสัดส่วนกับปริมาณสัมพัทธ์ของคลอโรฟิลล์และบริษัทnsistent มีลักษณะ สี ซึ่งในหัวกระหล่ำปลี มีสีเขียวอ่อน และผักกาดขาวปลีปากชอยมีเข้มเขียวใบไม้ signi สปาดสูงกว่าค่าfies ปริมาณคลอโรฟิลล์สูงขึ้น สามผักพบว่าค่าสปาดต่ำ ( ต่ำกว่า 30 ) คือหัวกะหล่ำปลี ( KBS ) , ผักใบเขียว ( SEL ) และผักกาดหอมใบดาบ ( ศักดิ์ )