The PCR reactions were performed in

The PCR reactions were performed in a final volume of 25 L,using 12.5 L of HotStarTaq Master Mix 2× (QIAGEN, Hilden,Germany), containing 2.5 unit of HotStarTaq DNA Polymerase,1.5 mM of MgCl2 and 200 L of each dNTP. Then, 1 M of eacholigonucleotide primer and 1 L of DNA were added. The amplification profile involved an initial denaturation step at 95◦C for 15 min,followed by 30 cycles at 94◦C for 30 s, 50◦C for 40 s and 72◦C for 60 s. The positive and negative controls for the extraction and PCR were included. The PCR reactions were processed in a Mastercycler Personal (Eppendorf, Milan, Italy). All reactions were performed in duplicate.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ปฏิกิริยา PCR ได้ดำเนินในปริมาตรสุดท้ายของ 25, L ใช้ 12.5 L ของหลัก HotStarTaq ผสม 2 × (QIAGEN, Hilden เยอรมนี), มี 2.5 หน่วยของ HotStarTaq ดีเอ็นเอพอลิเมอเรส 1.5 มม.ของ MgCl2 และ L 200 ของ dNTP แต่ละ , 1 M eacholigonucleotide พื้นและ 1 L ของดีเอ็นเอที่เพิ่มด้วย โพรไฟล์ขยายส่วนร่วมมีขั้นตอน denaturation เริ่มต้นที่ 95◦C สำหรับ 15 นาที ตาม ด้วย 30 รอบที่ 94◦C s, 50◦C 30 40 s และ 72◦C 60 s ควบคุมค่าบวก และค่าลบสำหรับการสกัดและ PCR รวมได้ ปฏิกิริยา PCR ถูกประมวลผลในส่วนบุคคล Mastercycler (Eppendorf มิลาน อิตาลี) ปฏิกิริยาทั้งหมดถูกทำสำเนา

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ปฏิกิริยา PCR ได้ดำเนินการในเล่มสุดท้าย 25? L ใช้ 12.5? ลิตร HotStarTaq โทผสม 2 × (QIAGEN, ฮิลเดน, เยอรมนี) ที่มี 2.5 หน่วยของดีเอ็นเอ HotStarTaq Polymerase 1.5 มิลลิของ MgCl2 และ 200? L ของแต่ละ dNTP จากนั้น 1 M ของไพรเมอร์ eacholigonucleotide และ 1 ลิตรดีเอ็นเอถูกเพิ่ม รายละเอียดที่เกี่ยวข้องกับการขยายขั้นตอน denaturation เริ่มต้นที่95◦Cนาน 15 นาทีตามด้วย 30 รอบที่94◦C 30 วินาที, 40 50◦Cและ72◦C 60 s การควบคุมบวกและลบสำหรับการสกัดและการ PCR ถูกรวม ปฏิกิริยา PCR ที่ถูกประมวลผลใน Mastercycler ส่วนบุคคล (Eppendorf, มิลาน, อิตาลี) ปฏิกิริยาทั้งหมดได้รับการดำเนินการในที่ซ้ำกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การตรวจปฏิกิริยาที่แสดงในเล่มสุดท้ายของ  25 ลิตร ใช้  12.5 ลิตร hotstartaq Master Mix 2 × ( QIAGEN Hilden , Germany ) ที่มี 2.5 หน่วยดีเอ็นเอพอลิเมอเรส hotstartaq 1.5 มม. ไอโซโทปและ 200  ผมของแต่ละ dntp . แล้ว 1  M ของไพรเมอร์ eacholigonucleotide 1  L ของดีเอ็นเอที่ถูกเพิ่ม โดยการเพิ่มรายละเอียดที่เกี่ยวข้องเริ่มต้น ( ขั้นตอนที่ 95 ◦ C เป็นเวลา 15 นาทีตามด้วย 30 รอบที่ 94 ◦ C 30 , 40 และ 50 องศาเซลเซียส◦ 72 ◦ C นาน 60 วินาที ควบคุมบวกและลบสำหรับการสกัดและทั้งหมดจะถูกรวม การตรวจปฏิกิริยาถูกประมวลผลใน mastercycler ส่วนบุคคล ( เพนดอร์ฟ , มิลาน , อิตาลี ) เกิดปฏิกิริยาได้ในที่ซ้ำกัน