The cleavage reaction was initiated at 25 °C by addition of 50 μl of MgCl2 in buffer for a final concentration of 0.6 mM. At appropriate times,aliquots of 35 μl (~400 ng of RNA) were withdrawn, the reaction was quenched with 35 μl of stop solution (50 mM EDTA, 7 M urea, 0.01% xylene cyanol) and the mixture was subjected to denaturing 15%PAGE. RNA bandswere revealed using ethidiumbromide and quantified with Image J (Rasband, W.S.,ImageJ, U.S. National Institutes of Health,Bethesda,Maryland, USA, http://imagej.nih.gov/ij/, 1997–2012).
ปฏิกิริยาความแตกแยกก็เริ่มที่ 25 ° C โดยนอกเหนือจาก 50 ไมโครลิตรของ MgCl2 ในบัฟเฟอร์สำหรับความเข้มข้นสุดท้ายของ 0.6 มิลลิ ในช่วงเวลาที่เหมาะสมในรูปส่วนลงตัวจาก 35 ไมโครลิตร (~ 400 เส้นทางของอาร์เอ็นเอ) ถูกถอนปฏิกิริยาถูกดับ 35 ไมโครลิตรของโซลูชั่นแบบครบวงจร (EDTA 50 มิลลิเมตร, 7 M ยูเรีย 0.01% cyanol ไซลีน) และส่วนผสมที่ถูกยัดเยียดให้ denaturing 15 % หน้า อาร์เอ็นเอ bandswere เปิดเผยโดยใช้ ethidiumbromide และวัดด้วยภาพ J (ราสแบนด์ WS, ImageJ สหรัฐสถาบันสุขภาพแห่งชาติ, Bethesda, Maryland, USA, http://imagej.nih.gov/ij/, 1997-2012)
การแปล กรุณารอสักครู่..
ปฏิกิริยาลึกเริ่มที่ 25 °องศาเซลเซียส โดยเพิ่ม 50 μ L ไอโซโทปในบัฟเฟอร์สำหรับความเข้มข้นสุดท้าย 0.6 มิลลิเมตร ในเวลาที่เหมาะสม ส่วนที่หารลงตัว 35 μ L ( ~ 400 นาโน RNA ) ถูกถอน ปฏิกิริยาก็ดับด้วย 35 μ l หยุดโซลูชั่น ( 50 mM EDTA , 7 M ยูเรีย , 0.01 % ไซลีน cyanol ) และส่วนผสมที่ถูกยัดเยียดให้ี่ 15 % หน้าอาร์เอ็นเอ bandswere เผยใช้ ethidiumbromide และ quantified กับภาพ J ( rasband W.S ImageJ , , , สหรัฐสถาบันสุขภาพแห่งชาติ Bethesda , Maryland , USA , http://imagej.nih.gov/ij/ , 1997 – 2012 )
การแปล กรุณารอสักครู่..