The gene of the non-structure prote

The gene of the non-structure protein 2 (NS2) was cloned by PCR from the genome of Bombyx mori densovirus Zhenjiang
strain (BmDNV-Z), inserted into prokaryotic expression vector pET28a to construct recombinant plasmid pET28a-NS2 and
then expressed in bacteria Escherichia coli BL21 (DE3). The expressed recombinant protein was identified by SDS-PAGE
and Western blot analysis. Then, the recombinant protein was purified by Ni-NTA column, renatured and tested for
enzyme activities. The purified NS2 protein exhibited a helicase activity unwinding double-stranded DNA substrates into
single-strand primers, and higher unwinding activity to polarity substrate. Similarly, the purified NS2 protein possessed
an ATPase activity and its enzyme activity was 0.276 μmol μg-1 h-1 in this study. The results indicated that the nonstructure
protein which encoded by the gene of BmDNV-Z NS2 possesses the biological activities of helicase and ATPase,
and the helicase prefers to polarity substrates. Based on these results, it is speculated that the gene of BmDNV-Z NS2
plays an important role in the viral DNA replication.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ยีนของโปรตีนที่ไม่มีโครงสร้าง 2 (NS2) เป็นโคลนโดยวิธี PCR จากจีโนมของไหม densovirus Zhenjiang
ความเครียด (BmDNV-Z) แทรกเข้าไปในการแสดงออกของโปรคาริโอเวกเตอร์ pET28a ที่จะสร้างพลาสมิด recombinant pET28a-NS2 และ
แสดงแล้วในแบคทีเรีย Escherichia coli BL21 (DE3) โปรตีนที่แสดงออกถูกระบุโดยวิธี SDS-PAGE
และการวิเคราะห์ดวงตะวัน จากนั้นโปรตีนบริสุทธิ์ตามคอลัมน์ Ni-NTA, ทีสกัดและทดสอบสำหรับ
การทำงานของเอนไซม์ โปรตีน NS2 บริสุทธิ์แสดงกิจกรรม helicase คลี่คลายเกลียวคู่ดีเอ็นเอพื้นผิวที่เป็น
ไพรสาระเดียวและกิจกรรมผ่อนคลายที่สูงขึ้นเพื่อพื้นผิวขั้ว ในทำนองเดียวกันโปรตีน NS2 บริสุทธิ์ครอบครอง
กิจกรรม ATPase และกิจกรรมของเอนไซม์ของมันคือ 0.276 ไมโครโมลไมโครกรัม-1 H-1 ในการศึกษานี้ ผลการศึกษาพบว่า nonstructure
โปรตีนซึ่งเข้ารหัสโดยยีนของ BmDNV-Z NS2 มีฤทธิ์ทางชีวภาพของ helicase และ ATPase,
helicase และชอบที่จะพื้นผิวขั้ว บนพื้นฐานของผลเหล่านี้เป็นที่คาดการณ์ว่ายีนของ BmDNV-Z NS2
มีบทบาทสำคัญในการคัดลอกดีเอ็นเอของเชื้อไวรัส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ยีนของโปรตีนโครงสร้างองค์กร 2 ( NS2 ) ถูกโคลนโดยวิธี PCR จากจีโนมของสายพันธุ์ ( Bombyx mori วิธี Zhenjiang
bmdnv-z ) แทรกอยู่ในโพรคาริโอติกการแสดงออก pet28a สร้าง recombinant plasmid เวกเตอร์ pet28a-ns2
แล้วและแสดงออกในแบคทีเรีย Escherichia coli BL21 ( DE3 ) แสดงแนนท์โปรตีนที่ถูกระบุว่าถูก
และการวิเคราะห์ Western blot . จากนั้นโปรตีนรีคอมบิแนนท์บริสุทธิ์โดยคอลัมน์ผมค้าขาย renatured ทดสอบ
, และกิจกรรมของเอนไซม์ และ NS2 โปรตีนมีโมเลกุลเพื่อกิจกรรมคู่เกลียวดีเอ็นเอพื้นผิวเป็นเส้นเดียว
ไพรเมอร์ และ สูง เพื่อกิจกรรมที่ขั้วพื้นผิว ส่วนโปรตีน NS2 สิง
กิจกรรม ATPase และกิจกรรมเอนไซม์ของ 0276 μโมลμ G-1 ส่วนในการศึกษานี้ ผลการศึกษา พบว่า nonstructure
โปรตีนซึ่งเข้ารหัสด้วยยีนของ bmdnv-z NS2 ครบถ้วนและฤทธิ์ทางชีวภาพของโปรตีนและโมเลกุล , โมเลกุล
ชอบขั้วพื้นผิว . ขึ้นอยู่กับผลลัพธ์เหล่านี้ ได้คาดการณ์ว่า ยีนของ bmdnv-z NS2
มีบทบาทสำคัญในการจำลองตัวเองของดีเอ็นเอไวรัส