Protease assay: The enzyme extract

Protease assay: The enzyme extract suitably diluted,
was mixed with 50mM glycine - NaOH buffer (pH 9) to
make 1 ml volume. 1ml of 1% casein (substrate) was added
and incubated for 10 min at 60°C. The reaction was stopped
by addition of 0.5 ml TCA (20%, w/v). The mixture was
allowed to stand at room temperature for 30 min and filtered.
1 ml of the filtrate was mixed with 5 ml of 0.5M Na2CO3
solution. 0.5 ml of Folin & Ciocalteu’s (phenol reagent)
reagent was added and kept in dark to develop the blue color.
It was estimated spectrophotometrically at 660nm against
tyrosine as standard. One unit of protease activity was
defined as the amount of enzyme required to liberate1 g
tyrosine per milliliter in 1 min under the experimental
conditions used.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โปรติเอส assay: เอนไซม์นี้สกัดเจือจางเหมาะสมถูกผสมกับ glycine 50 มม. - NaOH บัฟเฟอร์ (pH 9)ทำให้ปริมาตร 1 มิลลิลิตร เพิ่ม 1 มล.ของด้วย (พื้นผิว)และรับการกกที่ 60 องศาเซลเซียส 10 นาที หยุดปฏิกิริยาโดยเพิ่ม 0.5 ml TCA (20%, w/v) เป็นส่วนผสมอนุญาตให้ยืนที่อุณหภูมิห้อง 30 นาที และกรองข้อมูล1 ml ของการกรองถูกผสม ด้วย 5 ml ของ 0.5 M Na2CO3การแก้ปัญหา 0.5 ml ท่องและ Ciocalteu (สารฟีนอล)น้ำยาเพิ่ม และเก็บไว้ในที่มืดเพื่อพัฒนาสีฟ้ามันประมาณ spectrophotometrically 660nm กับไทโรซีนเป็นมาตรฐาน หนึ่งหน่วยกิจกรรมโปรติเอสได้กำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ที่จำเป็นต้อง liberate1 gไทโรซีนต่อมิลลิเมตรใน 1 นาทีภายใต้การทดลองเงื่อนไขที่ใช้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ทดสอบโปรติเอส: เอนไซม์สกัดเจือจางเหมาะสม
ผสมกับ glycine 50mm - NaOH บัฟเฟอร์ (pH 9)
ทำให้ปริมาณ 1 มิลลิลิตร 1ml 1% เคซีน (สารตั้งต้น) ถูกบันทึก
และบ่มเป็นเวลา 10 นาทีที่ 60 ° C ปฏิกิริยาก็หยุด
โดยนอกเหนือจาก 0.5 มล. TCA (20% w / v) ส่วนผสมที่ถูก
อนุญาตให้ยืนที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 นาทีและกรอง.
1 มิลลิลิตรกรองผสมกับ 5 มิลลิลิตร 0.5M Na2CO3
วิธีการแก้ปัญหา 0.5 มิลลิลิตร Folin & Ciocalteu ของ (ฟีนอลสาร)
น้ำยาถูกบันทึกและเก็บไว้ในที่มืดเพื่อพัฒนาสีฟ้า.
มันเป็นที่คาด spectrophotometrically ที่ 660nm กับ
ซายน์เป็นมาตรฐาน หนึ่งหน่วยของกิจกรรมโปรติเอสได้รับการ
กำหนดให้เป็นปริมาณของเอนไซม์ที่จำเป็นในการ liberate1 กรัม
ซายน์ต่อมิลลิลิตรใน 1 นาทีภายใต้การทดลอง
เงื่อนไขใช้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โดย : เอสเอนไซม์สกัดเจือจางที่เหมาะสม ,ผสมกับ 50mm Glycine - ใช้บัฟเฟอร์ pH 9 )1 มิลลิลิตร ปริมาณ 1ml 1% เคซีน ( Substrate ) คือเพิ่มบ่มเป็นเวลา 10 นาทีที่ 60 ° C . ปฏิกิริยาที่ถูกหยุดโดยนอกเหนือจาก TCA 0.5 มล. ( 20 % W / V ) ส่วนผสมคืออนุญาตให้ยืนที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 นาทีและกรอง1 มิลลิลิตรของกรองผสมกับ 5 ml ของ 0.5 Na2CO3โซลูชั่น 0.5 มิลลิลิตร folin & ciocalteu ( ฟีนอล 3 )รีเอเจนต์ถูกบันทึกและเก็บไว้ในที่มืดเพื่อพัฒนาสีฟ้าก็ประมาณนี้ที่ 660nm กับไทโรซีนเป็นมาตรฐาน หน่วยหนึ่งของกิจกรรมเอนไซม์โปรตีเอสคือหมายถึงปริมาณของเอนไซม์ ต้อง liberate1 กรัมไทโรซีนต่อมิลลิลิตรใน 1 นาทีภายใต้การทดลองเงื่อนไขการใช้