Four larvae at stage G42 from contr

Four larvae at stage G42 from controls and nitrate treatments
were collected respectively. Tissues, including tail, hind-limb and
intestine, were obtained from larvae. Tissues were treated with liquid
nitrogen, and then stored at 80 C for extracting total RNA.
Total RNA from tissues were extracted using E.Z.N.A.TM tissue
RNA Kit (Omega). RNA quality was confirmed by the ratio of O.
D. absorbencies 260/280 nm and electrophoresis on a 1.5% agarose
gel with ethidium bromide-stained. RNA quantification was measured
through UV spectrophotometry at 260 nm using Nano
Drop instrument (Thermo). Approximately 2 lg RNA was reverse
transcribed into complementary DNA (cDNA) using the high capacity
cDNA reverse transcription kit (BioRT Two Step RT-PCR Kit). The
PCR amplifications were performed in 25 ll reaction mixture containing
100nM of dNTP mixture, 2 ll of cDNA solution as template,
10PCR buffer (Mg2+), specific primers, Taq mix DNA polymerase
(Takara) and also distilled water. PCR was carried out as the following
parameters: 94 C  3 min, 30 cycles of 94 C  30 s,
52 C  30 s, 72 C  1 min.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สี่ตัวอ่อนในระยะ G42 ควบคุมและบำบัดไนเตรตถูกรวบรวมไว้ตามลำดับ เนื้อเยื่อ รวมหาง เดนไฮนด์ขา และลำไส้ ได้รับมาจากตัวอ่อน เนื้อเยื่อได้รับการรักษา ด้วยของเหลวไนโตรเจน แล้ว เก็บไว้ที่ 80 C สำหรับแยกอาร์เอ็นเอทั้งหมดอาร์เอ็นเอรวมจากเนื้อเยื่อถูกสกัดโดยใช้เนื้อเยื่อ E.Z.N.A.TMชุดอาร์เอ็นเอ (โอเมก้า) อาร์เอ็นเอคุณภาพได้รับการยืนยัน โดยอัตราส่วนของโอD. absorbencies 260/280 nm และ electrophoresis ใน agarose 1.5%เจลอาบน้ำกับสีโบรไมด์ ethidium อาร์เอ็นเอนับเป็นวัดผ่าน UV spectrophotometry ที่ 260 nm ใช้นาโนปล่อยมือ (เทอร์โม) ประมาณ 2 แอลจีอาร์เอ็นเอถูกย้อนกลับทับศัพท์เป็นเสริมดีเอ็นเอ (cDNA) การใช้กำลังการผลิตสูงชุดการ transcription ย้อน cDNA (BioRT สองขั้นตอน RT-PCR Kit) ที่PCR amplifications ได้ดำเนินการใน 25 จะปฏิกิริยาผสมประกอบด้วย100nM dNTP ผสม 2 จะของ cDNA เป็นต้น10 PCR บัฟเฟอร์ (Mg2 +), เฉพาะไพรเมอร์ Taq ผสมดีเอ็นเอพอลิเมอเรส(Takara) และยัง กลั่นน้ำ PCR ได้รับการดำเนินการพารามิเตอร์: 94 C 3 นาที รอบ 30 ของ 94 C 30 sS C 30 52, C 1 72 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สี่ตัวอ่อนที่ G42
ขั้นตอนจากการควบคุมและการบำบัดไนเตรตที่ถูกเก็บรวบรวมตามลำดับ
เนื้อเยื่อรวมทั้งหางหลัง-แขนขาและลำไส้ที่ได้รับจากตัวอ่อน เนื้อเยื่อได้รับการรักษาด้วยของเหลวไนโตรเจนและเก็บไว้แล้วที่? 80? C สำหรับการสกัด RNA รวม. รวมอาร์เอ็นเอจากเนื้อเยื่อถูกสกัดโดยใช้เนื้อเยื่อ EZNATM RNA Kit (โอเมก้า) อาร์เอ็นเอที่มีคุณภาพได้รับการยืนยันโดยอัตราส่วนของทุมดี absorbencies 260/280 นาโนเมตรและอิเล็กบน 1.5% agarose เจลที่มี ethidium bromide เปื้อน ปริมาณ RNA วัดผ่านspectrophotometry รังสียูวีที่ 260 นาโนเมตรโดยใช้นาโนตราสารDrop (เทอร์โม) ประมาณ 2 จีอาร์เอ็นเอกลับถูกคัดลอกลงใน DNA ประกอบ (ยีน) ใช้ความจุสูงยีนชุดถอดความย้อนกลับ(BioRT สองขั้นตอน RT-PCR Kit) เครื่องขยายเสียง PCR ได้ดำเนินการใน 25 LL ผสมปฏิกิริยาที่มี100nm ผสม dNTP 2 LL ของการแก้ปัญหา cDNA เป็นแม่, 10 บัฟเฟอร์ PCR (Mg2 +), ไพรเมอร์ที่เฉพาะเจาะจง Taq ผสมดีเอ็นเอโพลิเมอร์(Takara) และน้ำกลั่น PCR ได้ดำเนินการดังต่อไปนี้พารามิเตอร์: 94 องศาเซลเซียส 3 นาที 30 รอบของ 94? C? 30 วินาที, 52 องศาเซลเซียส? 30 วินาที 72? C? 1 นาที.

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตัวอ่อนระยะที่ 4 g42 จากการควบคุมปริมาณการเก็บรักษา
ตามลำดับ เนื้อเยื่อ รวมทั้งหางและขาหลัง
ไส้ ที่ได้จากตัวอ่อน เนื้อเยื่อที่ได้รับการรักษาด้วยไนโตรเจนเหลว
แล้วเก็บไว้ที่  80  C สำหรับการสกัดอาร์เอ็นเอทั้งหมด .
อาร์เอ็นเอรวมจากเนื้อเยื่อที่ใช้ชุดนี้เนื้อเยื่อ
e.z.n.a.tm ( โอเมก้า ) คุณภาพซึ่งได้รับการยืนยันโดยอัตราส่วน O .
Dabsorbencies 260 / 280 nm และอิเลคโตรโฟรีซีสบน 1.5 % เจลโรส
กับทิเดียมโบรไมด์เปรอะเปื้อน ซึ่งปริมาณวัด
ผ่านวิธียูวีที่ 260 nm ใช้นาโน
วางเครื่องดนตรี ( ร้อน ) ประมาณ 2 LG RNA ถูกย้อนกลับเข้าไปเสริม
ถ่ายทอด DNA ( cDNA ) ใช้วิธี reverse transcription
ความจุสูงชุด ( biort สองขั้นตอนที่ 4 ชุด )
PCR amplifications จำนวน 25 จะเกิดปฏิกิริยาผสมที่มีส่วนผสมของ dntp
100nm 2 จะ cDNA โซลูชั่นที่เป็นแม่แบบ 
10 เทคนิคบัฟเฟอร์ ( mg2 ) , ไพรเมอร์จำเพาะ ทัค ผสม DNA polymerase
( ทาการะ ) และน้ำกลั่น ซึ่งก็เป็นไปตาม
พารามิเตอร์ต่อไปนี้ : 94  C  3 นาที 30 รอบ 94  C  30 S ,
c  52  30 S , 72  C  1 นาที