2.2. Preparation of spores and cont

2.2. Preparation of spores and contaminated milk powder
The Duncan and Strong medium (DS) (Duncan and Strong, 1968) was used to obtain spores from strains ATCC 13124, D10, 82049, 82100, WU99118, and WU01150 using a 10% overnight inoculum from a fluid thioglycolate (FTG) culture. From strains WU00128, WU00129, WU00130, WU00131, WU00132, WU00134, and WU00135, spores were obtained using DS medium with a 20% overnight inoculum from a FTG culture, and peptone–bile–theophylline–starch medium (Ushijima et al., 1987) was used to generate spores from strains WU90103, WU88105, WU90111, and WU01147 (5% overnight FTG inoculum). Spores were concentrated and washed by centrifugation (12,000_g), and stored at 4 jC in distilled water.
For the collaborative trial, spores of strain D10 were concentrated by centrifugation (12,000_g), suspended in pasteurized skim milk, homogenized, and subsequently spray-dried in a Stork pilot plant spray dryer at an inlet temperature of 150 jC and an outlet temperature of 85 jC. The resulting highly contaminated milk (HCM) powder was stored at 5 jC. This HCM was mixed in a stepwise manner in a mortar with equal volumes (wt/wt; Veld et al., 1999) of g-irradiated milk product 17 (Nestle´, Amsterdam, The Netherlands) to obtain two lower levels of contaminated milk powder (LCM) with approximately 4_105 cfu/g (LCM1) and 4_103 cfu/g (LCM2), respectively. Both LCMs were distributed in size one white/white gelatin capsules (Elanco Qualicaps, Fegersheim, France) using an aluminum filling apparatus in a laminar air flow cabinet; 15.6 g of LCM was distributed into 60 capsules (0.26 g of LCM per capsule). Capsules were stored at _20 jC with desiccant (silica gel), and mailed at room temperature. To minimize deviations due to storage conditions, all laboratories conducted the trial at the same time.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2 การเตรียมเพาะเฟิร์นและนมผงปนเปื้อนสื่อดันแคนและแข็งแกร่ง (DS) (ดันแคนและแข็ง 1968) ใช้รับเพาะเฟิร์นจากสายพันธุ์ ATCC 13124, D10, 82049, 82100, WU99118 และ WU01150 inoculum ค้างคืนเป็น 10% จากวัฒนธรรมของเหลว thioglycolate (FTG) จากสายพันธุ์ WU00128, WU00129, WU00130, WU00131, WU00132, WU00134 และ WU00135 เพาะเฟิร์นได้รับปานกลาง DS ด้วย inoculum ค้างคืน 20% จากวัฒนธรรม FTG และ peptone-น้ำดี-theophylline – แป้งปานกลาง (Ushijima et al., 1987) ถูกใช้เพื่อสร้างเพาะเฟิร์นจากสายพันธุ์ WU90103, WU88105, WU90111 และ WU01147 (5% ค้างคืน FTG inoculum) เพาะเฟิร์นได้เข้มข้น และล้าง โดย centrifugation (12, 000_g), และจัดเก็บที่ 4 เจซีในน้ำกลั่นการทดลองร่วมกัน เพาะเฟิร์นต้องใช้ D10 เข้มข้น โดย centrifugation (12, 000_g), หยุดชั่วคราวใน skim นมพาสเจอร์ไรส์ homogenized เป็นกลุ่ม และต่อมาสเปรย์แห้งในนกกระสาโรงงานนำร่องกิ่งเป่าที่อุณหภูมิทางเข้าของเจซี 150 และอุณหภูมิร้านเจซี 85 ผงนมปนเปื้อนสูง(เด็ด ๆ เกี่ยวกับโรงแรม) ได้ถูกเก็บไว้ที่เจซี 5 เด็ด ๆ เกี่ยวกับโรงแรมนี้ถูกผสมด้วยวิธี stepwise ในครกด้วยวอลุ่มเท่า (wt/wt Veld et al., 1999) ของผลิตภัณฑ์นม g irradiated 17 (Nestle´ อัมสเตอร์ดัม ประเทศเนเธอร์แลนด์) รับสองลดระดับการปนเปื้อนในนมผง (LCM) ประมาณ 4_105 cfu/g (LCM1) และ 4_103 cfu/g (LCM2), ตามลำดับ นำเสนอทั้งในรูปที่กระจายในขนาดหนึ่งขาว/ขาวตุ๋นแคปซูล (Elanco Qualicaps, Fegersheim ฝรั่งเศส) ใช้อลูมิเนียมบรรจุเครื่องในตู้การไหลของอากาศ laminar ไม่เกิน 15.6 g ของ LCM ถูกกระจายเป็น 60 แคปซูล (0.26 กรัมของ LCM ต่อแคปซูล) แคปซูลถูกเก็บที่เจซี _20 กับชื้น (ซิลิก้าเจล), และส่งที่อุณหภูมิห้อง เพื่อลดความแตกต่างจากสภาพการจัดเก็บ ห้องปฏิบัติการทั้งหมดดำเนินการทดลองในเวลาเดียวกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 เตรียมความพร้อมของสปอร์และนมผงปนเปื้อน
ดันแคนและขนาดกลางที่แข็งแกร่ง (DS) (ดันแคนและแข็งแรง 1968) ถูกนำมาใช้เพื่อให้ได้สปอร์จากสายพันธุ์ ATCC 13124, D10, 82049, 82100, WU99118 และ WU01150 โดยใช้หัวเชื้อชั่วข้ามคืน 10% ของเหลว thioglycolate (FTG) วัฒนธรรม จากสายพันธุ์ WU00128, WU00129, WU00130, WU00131, WU00132, WU00134 และ WU00135 สปอร์ที่ได้รับโดยใช้สื่อ DS กับเชื้อชั่วข้ามคืน 20% จากวัฒนธรรม FTG และเปปโตน-น้ำดี-theophylline แป้งกลาง (Ushijima et al., 1987 ) ถูกนำมาใช้ในการสร้างสปอร์จากสายพันธุ์ WU90103, WU88105, WU90111 และ WU01147 (5% เมื่อคืนเชื้อ FTG) สปอร์มีความเข้มข้นและล้างโดยการหมุนเหวี่ยง (12,000_g) และเก็บไว้ที่ 4 JC ในน้ำกลั่น.
สำหรับการทดลองการทำงานร่วมกันของสปอร์สายพันธุ์ D10 มีความเข้มข้นโดยการหมุนเหวี่ยง (12,000_g) ที่ลอยอยู่ในนมพร่องมันเนยพาสเจอร์ไรส์, หดหายและต่อมาสเปรย์ อบแห้งในเครื่องเป่านำร่องพืชนกกระสาสเปรย์ที่อุณหภูมิ 150 JC และอุณหภูมิที่ออกจาก 85 JC ผลนมปนเปื้อนสูง (HCM) ผงถูกเก็บไว้ที่ 5 JC HCM นี้ได้รับการผสมในลักษณะแบบขั้นตอนในครกมีปริมาณเท่ากับ (น้ำหนัก / น้ำหนัก; Veld et al, 1999.) ของผลิตภัณฑ์นม G-17 การฉายรังสี (Nestle', อัมสเตอร์ดัม, เนเธอร์แลนด์) เพื่อให้ได้สองระดับที่ต่ำกว่าของนมปนเปื้อน ผง (LCM) มีประมาณ 4_105 cfu / g (LCM1) และ 4_103 cfu / g (LCM2) ตามลำดับ ทั้ง LCMs มีการกระจายในขนาดหนึ่งขาว / แคปซูลเจลาตินสีขาว (Elanco Qualicaps, Fegersheim, ฝรั่งเศส) โดยใช้อลูมิเนียมบรรจุอุปกรณ์ในตู้ไหลของอากาศราบเรียบ; 15.6 กรัม LCM ถูกกระจายไป 60 แคปซูล (0.26 กรัมต่อแคปซูล LCM) แคปซูลถูกเก็บไว้ที่ _20 JC กับสารดูดความชื้น (ซิลิกาเจล) และจัดส่งทางไปรษณีย์ที่อุณหภูมิห้อง เพื่อลดการเบี่ยงเบนเนื่องจากสภาพการเก็บรักษาในห้องทดลองทั้งหมดนี้ดำเนินการพิจารณาคดีในเวลาเดียวกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . การเตรียมและนมผงที่ปนเปื้อนสปอร์
ดันแคนและแข็งแรงปานกลาง ( DS ) ( ดันแคนและแข็งแรง , 1968 ) ถูกใช้เพื่อขอรับสปอร์จากสายพันธุ์ ATCC 13124 D10 82049 82100 , , , , wu99118 และ wu01150 ใช้ 10 % เชื้อชั่วข้ามคืนจากไทโอไกลโคเลตของไหล ( ftg ) วัฒนธรรม จากสายพันธุ์ wu00128 wu00129 wu00130 wu00131 , , , wu00132 wu00134 และ wu00135 , , ,สปอร์ที่ได้มาใช้ DS ขนาดกลางกับ 20% ค้างคืนเชื้อจาก ftg วัฒนธรรม และเปปโตน–––แป้งน้ำดีในกลาง ( ushijima et al . , 1987 ) ถูกใช้เพื่อสร้างสปอร์จากสายพันธุ์ wu90103 wu88105 wu90111 , , , และ wu01147 ( 5% ftg เชื้อชั่วข้ามคืน ) สปอร์มีความเข้มข้น และล้างโดยการเหวี่ยงแยก ( 12000_g ) และเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 JC ในน้ำกลั่น
เพื่อร่วมกันพิจารณา สปอร์ของเชื้อ D10 มีความเข้มข้นโดยการเหวี่ยงแยก ( 12000_g ) ที่แขวนลอยในพาสเจอร์ไรส์ Skim milk , บด , และต่อมาสเปรย์แห้งในโรงงานนำร่องนกกระสาเครื่องอบแห้งแบบพ่นฝอยที่อุณหภูมิ 150 JC และอุณหภูมิ 85 JC ทำให้ปนเปื้อนสูงนม ( HCM ) ผงที่เก็บรักษาที่อุณหภูมิ 5 JCข้อมูลนี้ถูกผสมในลักษณะแบบในครกมีปริมาณเท่ากับ ( wt / wt ; เวลด์ et al . , 1999 ) g-irradiated ผลิตภัณฑ์นม 17 ( เนสท์เล่ใหม่ , อัมสเตอร์ดัม , เนเธอร์แลนด์ ) ที่จะได้รับสองระดับล่างของนมผงปนเปื้อน ( LCM ) ที่มีประมาณ 4_105 cfu / g ( lcm1 ) และ 4_103 ฟยู / g ( lcm2 ) ตามลำดับ หรือ มีการกระจายทั้งในแคปซูล สีขาว / สีขาวขนาด qualicaps เจลาติน ( อีแลนโค ,fegersheim , ฝรั่งเศส ) โดยใช้อลูมิเนียมบรรจุเครื่องมือในการไหลของอากาศตู้ ; 15.6 กรัมของ LCM กระจายไป 60 แคปซูล ( 0.26 กรัมของ LCM ต่อแคปซูล ) แคปซูลที่ถูกเก็บไว้ใน _20 JC ด้วยสารดูดความชื้น ( ซิลิกาเจล และส่งที่อุณหภูมิห้อง เพื่อลดความคลาดเคลื่อนเนื่องจากสภาพกระเป๋าทุกห้องปฏิบัติการดำเนินการพิจารณาคดีในเวลาเดียวกัน