Bacillus amyloliquefaciens E1PA is

Bacillus amyloliquefaciens E1PA is a lipase-producing strain that was originally isolated from lipid-rich food waste, and the production of its lipase was found to be induced by vegetable oils. The E1PA lipase was successfully expressed and secreted in a heterologous Escherichia coli host and was ultimately purified. The conserved pentapeptide motif Ala-His-Ser-Met-Gly was observed at positions 108–112. The purified recombinant lipase was stable over a pH range of 4.0–11.0 at 40 °C and exhibited maximal activity at pH 10. The recombinant E1PA lipase hydrolyzed a wide range of acyl esters (C4–C18). However, the highest activity (3.5 units mg−1) was observed when the p-nitrophenyl ester of myristate (C14) was used as a substrate. Compared to the lipases produced by Bacillus spp., the E1PA lipase displayed a structural molecular mass excluding the leader sequence (19.22 kDa) and a pI (9.82) that were similar to those reported for B. amyloliquefaciens lipases and lipase subfamily I.4 but that were quite distinct from those of lipase subfamily I.5 (approximately 43 kDa, pI 6). These results suggested that Bacillus lipases are closely related. Although the recombinant E1PA lipase digested only certain oils, the wild-type E1PA lipase degraded a variety of oils, including blended and re-used cooking oils. The recombinant and wild-type forms of the E1PA lipase were able to digest heterogeneous lipid-rich food waste at similar levels; this result suggests that this lipase can function even when it solely consists of its structural enzyme component. The enzyme exhibited lipid hydrolysis ability as either an intracellular domain of the recombinant protein or an extracellular domain secreted by the E1PA strain. However, the recombinant lipase showed higher activity than the wild-type E1PA lipase, indicating that the recombinant protein from E. coli possessed effective lipase activity. Thus, the inducible alkaline E1PA lipase exhibited the ability to act on a broad spectrum of substrates, and the effective form produced in the heterogeneous host can be further developed for several applications, such as biodiesel production and lipase production.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Bacillus amyloliquefaciens E1PA เป็นสายพันธุ์ผลิตเอนไซม์ไลเปสที่ถูกแยกมาจากอาหารที่อุดมด้วยไขมันของเสีย และการผลิตเอนไซม์ไลเปสของพบว่าจะเกิดจากน้ำมันพืช เอนไซม์ไลเปส E1PA แก้ไขเสร็จเรียบร้อยแสดง และหลั่งในโฮสต์ heterologous Escherichia coli และในที่สุดบริสุทธิ์ Motif pentapeptide ภัต Ala-พระ-Ser-พบ-Gly ถูกตรวจสอบที่ตำแหน่ง 108 – 112 เอนไซม์ไลเปสที่ recombinant บริสุทธิ์ได้มีเสถียรภาพในช่วง pH 4.0-11.0 ที่ 40 ° C และจัดแสดงกิจกรรมสูงสุดที่ pH 10 เอนไซม์ไลเปส E1PA recombinant hydrolyzed หลากหลายของ acyl esters (C4 – C18) อย่างไรก็ตาม กิจกรรมสูงสุด (3.5 หน่วย mg−1) พบว่า เมื่อใช้เอสพี nitrophenyl ของ myristate (C14) เป็นพื้นผิว เมื่อเทียบกับการผสมที่ผลิต โดยเชื้อออกซิเจน เอนไซม์ไลเปส E1PA แสดงมวลโมเลกุลเป็นโครงสร้างยกเว้นลำดับผู้นำ (19.22 kDa) และปี่ใน (9.82) ที่ได้คล้ายกับที่รายงานสำหรับผสม B. amyloliquefaciens และเอนไซม์ไลเปสวงศ์ย่อย I.4 แต่ที่ได้ค่อนข้างแตกต่างจากวงศ์ย่อยเอนไซม์ไลเปส I.5 (ประมาณ 43 kDa ผี 6) ผลลัพธ์เหล่านี้แนะนำว่า ผสมเชื้อมีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิด แม้ว่าเอนไซม์ไลเปส E1PA recombinant เจ่าน้ำมันบางตัวเท่านั้น เอนไซม์ไลเปส E1PA ป่าชนิดถูกลดความหลากหลายของน้ำมัน รวมทั้งผสม และใช้น้ำมันปรุงอาหารใหม่ แบบ recombinant และป่าชนิดของเอนไซม์ไลเปส E1PA มีความสามารถในการย่อยขยะอาหารที่อุดมด้วยไขมันแตกต่างกันที่ระดับคล้าย ผลนี้แสดงให้เห็นว่า เอนไซม์ไลเปสนี้สามารถทำงานได้แม้แต่เพียงผู้เดียวประกอบด้วยส่วนประกอบของโครงสร้างเอนไซม์ เอนไซม์นี้จัดแสดงความสามารถในการย่อยสลายไขมันเป็นโดเมนภายในเซลล์ของ recombinant โปรตีนหรือโดเมนที่มีสารที่หลั่งมาจากสายพันธุ์ E1PA อย่างไรก็ตาม เอนไซม์ไลเปส recombinant พบกิจกรรมสูงกว่าป่าชนิดเอนไซม์ไลเปส E1PA แสดงว่า recombinant โปรตีนจาก E. coli ครอบครองกิจกรรมเอนไซม์ไลเปสที่มีประสิทธิภาพ ดังนั้น เอนไซม์ไลเปส E1PA ด่าง inducible แสดงความสามารถในการดำเนินการกับหลากหลายของพื้นผิว และแบบฟอร์มที่มีประสิทธิภาพผลิตในโฮสต์แตกต่างกันสามารถพัฒนาเพิ่มเติมสำหรับการใช้งาน การผลิตไบโอดีเซลและการผลิตเอนไซม์ไลเปส

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Bacillus amyloliquefaciens E1PA เป็นสายพันธุ์ที่ผลิตเอนไซม์ไลเปสที่ถูกแยกออกพื้นเพมาจากเศษอาหารไขมันที่อุดมไปด้วยและการผลิตเอนไซม์ไลเปสที่ถูกพบว่าจะเกิดจากน้ำมันพืช E1PA เอนไซม์ไลเปสถูกแสดงที่ประสบความสำเร็จและหลั่งใน Host heterologous Escherichia coli และบริสุทธิ์ในท้ายที่สุด Pentapeptide แม่ลายอนุรักษ์ Ala-His-Ser-Met-Gly เป็นข้อสังเกตที่ตำแหน่ง 108-112 ไลเปส recombinant บริสุทธิ์มีเสถียรภาพในช่วงที่ค่า pH 4.0-11.0 ที่ 40 องศาเซลเซียสและมีฤทธิ์สูงสุดที่ pH 10. เอนไซม์ไลเปส E1PA recombinant ไฮโดรไลซ์ที่หลากหลายของเอสเทอ acyl (C4-C18) อย่างไรก็ตามกิจกรรมสูงสุด (3.5 หน่วย MG-1) พบว่าเมื่อเอสเตอร์ P-Nitrophenyl ของ myristate (C14) ถูกใช้เป็นสารตั้งต้น เมื่อเทียบกับเอนไซม์ไลเปสที่ผลิตโดยเชื้อ Bacillus spp. ไลเปส E1PA แสดงมวลโมเลกุลโครงสร้างไม่รวมลำดับผู้นำ (19.22 กิโลดาลตัน) และพี่ (9.82) ที่มีความคล้ายคลึงกับรายงาน B. amyloliquefaciens ไลเปสและเอนไซม์ไลเปสอนุวงศ์ I.4 แต่ ที่ค่อนข้างแตกต่างจากผู้เอนไซม์ไลเปสอนุวงศ์ I.5 (ประมาณ 43 กิโลดาลตันทาว์ 6) ผลการศึกษานี้ชี้ให้เห็นว่าเอนไซม์ไลเปส Bacillus เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิด แม้ว่าเอนไซม์ไลเปสย่อย E1PA recombinant น้ำมันบางอย่างเท่านั้นชนิดป่า E1PA เอนไซม์ไลเปสย่อยสลายความหลากหลายของน้ำมันรวมทั้งน้ำมันปรุงอาหารแบบผสมผสานและการใช้ซ้ำ recombinant และชนิดป่าในรูปแบบของเอนไซม์ไลเปส E1PA มีความสามารถในการย่อยเศษอาหารที่อุดมไปด้วยไขมันที่แตกต่างกันในระดับที่ใกล้เคียงกัน ผลนี้แสดงให้เห็นว่าเอนไซม์ไลเปสนี้สามารถทำงานได้แม้ในขณะที่มัน แต่เพียงผู้เดียวประกอบด้วยส่วนประกอบของเอนไซม์โครงสร้าง เอนไซม์ที่แสดงความสามารถในการย่อยสลายไขมันเป็นทั้งโดเมนภายในเซลล์ของโปรตีนหรือโดเมน extracellular ที่หลั่งมาจากสายพันธุ์ E1PA อย่างไรก็ตามเอนไซม์ไลเปส recombinant มีฤทธิ์สูงกว่าชนิดป่า E1PA เอนไซม์ไลเปสแสดงให้เห็นว่าโปรตีนจากเชื้อ E. coli ครอบครองกิจกรรมเอนไซม์ไลเปสที่มีประสิทธิภาพ ดังนั้นการกระตุ้นเอนไซม์ไลเปส E1PA ด่างแสดงความสามารถในการทำหน้าที่เกี่ยวกับคลื่นความถี่กว้างของพื้นผิวและรูปแบบที่มีประสิทธิภาพการผลิตในโฮสต์ที่แตกต่างกันสามารถที่จะพัฒนาต่อไปสำหรับการใช้งานต่างๆเช่นการผลิตไบโอดีเซลและการผลิตเอนไซม์ไลเปส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

บาซิลลัส amyloliquefaciens e1pa เป็นแบคทีเรียสายพันธุ์ที่แยกได้จากการผลิตเดิมของเศษอาหาร รวย และการผลิตของเอนไซม์ พบว่าเมื่อกระตุ้นด้วยน้ำมันพืช การ e1pa ไลเปสได้แสดง และเก็บไว้ในโฮสต์ชนิด Escherichia coli และในที่สุดความ การอดออมเพนตาเปปไทด์แม่ลายเอ๋เขาเซอร์เจอ GLY ) ที่ตำแหน่ง 108 - 112 . โปรตีนบริสุทธิ์เอนไซม์มีเสถียรภาพมากกว่าระดับ pH 4.0 – 11.0 ° C และ 40 มีกิจกรรมสูงสุดที่พีเอช 10 เอนไซม์สามารถไฮโดรไลซ์ e1pa หลากหลายของเอซิลเอสเทอร์ ( C4 ) c18 ) อย่างไรก็ตาม กิจกรรมสูงสุด ( 3.5 หน่วยมิลลิกรัม− 1 ) พบว่าเมื่อ p-nitrophenyl เอสเทอร์ของ 30 องศาเซล ( C14 ) ถูกใช้เป็นสาร เมื่อเทียบกับไลเปสที่ผลิตโดย Bacillus spp . , e1pa ไลเปสแสดงโครงสร้างโมเลกุลมวลรวม ผู้นำลำดับ ( 19.22 kDa ) และปี่ ( ช้าๆ ) ที่คล้ายคลึงกับรายงานพ. amyloliquefaciens เอนไซม์ไลเปส subfamily i.4 แต่ที่ค่อนข้างแตกต่างจากคน subfamily ( ประมาณ 43 กิโลดาลตัน เอนไซม์ i.5 ด 6 ) . ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า Bacillus ไลเปสจะเกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิด . แม้ว่าเอนไซม์ย่อยโปรตีน e1pa เฉพาะน้ำมันบาง ของ e1pa ไลเปสซึ่งความหลากหลายของน้ำมัน รวมทั้งผสมและใช้น้ำมันปรุงอาหาร รูปแบบการใช้ยาของ e1pa และเอนไซม์สามารถย่อยไขมัน อาหารที่อุดมไปด้วยข้อมูลขยะในระดับที่คล้ายกัน ; ผลนี้แสดงให้เห็นว่าเอนไซม์นี้สามารถทำงานได้เพียงเป็นส่วนประกอบของเอนไซม์ที่มีโครงสร้าง มีความสามารถในการย่อยสลายไขมันเอนไซม์เป็นการภายในโดเมนของโปรตีนรีคอมบิแนนท์หรือโดเมน extracellular หลั่งจาก e1pa สายพันธุ์ อย่างไรก็ตาม เอนไซม์ recombinant พบกิจกรรมของเอนไซม์สูงกว่า e1pa แสดงว่าโปรตีนรีคอมบิแนนท์จาก E . coli มีกิจกรรมเอนไซม์ที่มีประสิทธิภาพ ดังนั้น inducible ไลเปส e1pa ด่างมีความสามารถในการทำที่หลากหลายของพื้นผิวและมีประสิทธิภาพรูปแบบการผลิตในโฮสต์ที่แตกต่างกันสามารถพัฒนาต่อไปเพื่อใช้งานต่างๆเช่นการผลิตไบโอดีเซลและการผลิตไลเปส