2.2. Sample handling and lipid analysis
About 400–800 g of the food sample were homogenised. A portion of the homogenised duplicate samples was extracted with methanol:chloroform according to Folch, Lees, and Solane-Stanley (1957). The lipid extract was converted into fatty acid methyl esters (FAME) by incubation with 0.01 M sodium hydroxide in methanol at 60–65 °C, for 30 min, followed by collection of the FAME dissolved in hexane. The FAME were separated with a GC (Agilent 6890) equipped with a polar fused capillary column, split injector (split ratio: 50 ml/min) and flame ionisation detector (FID). The temperature programme started at 100 °C for 1 min, and increased at 15 °C/min up to 160 °C, thereafter at 4 °C/min up to 210 °C and held at 210 °C for 12 min. The carrier gas was helium (initial pressure 80 kPa) and the makeup gas was nitrogen. Individual fatty acids were identified with an external standard (68A or St-85 Nu Check, Minnesota, USA) and retention times. Injector and detector temperature were set to 275 and 250 °C, respectively. In addition, the TFA that was detected in 2006 and 2007 was separated on a 100 m CP SIL-88 fused silica capillary column, with a temperature programme started at 175 °C for 60 min, increased at 10 °C/min up to 210 °C and kept at 210 °C for 51 min. The carrier gas was helium (initial pressure 180 kPa and split ratio 40 ml/min). Individual TFAs were identified by external standard (K 110 Alltech-Applied Science Labs, USA) and retention times. All FAs were expressed as % of total FA. The method used for analyses of fatty acid has been accredited (ISO/IEC) since 1995 by SWEDAC (Swedish Board for Accreditation and Conformity Assessment). The quality of the analytical work is ensured continuously in the form of blank samples, control samples and analysing certified reference materials. The detection limit was 0.03%. The Chemistry Division 2 at the NFA coordinated the fat content analyses, which were sent for external analysis. The fat content analyses in 2001 and 2006 were done by the National Veterinary Institute in Uppsala. The total fat content was analysed gravimetrically by the EU-method (EG Directive 98/64/EG method-B). Samples analysed in 2007 were sent to ALcontrol Laboratories, (ALcontrol AB, accredited laboratory) in Linköping. The total fat content was analysed by the gravimetric method NMKL 131, fat, determination by SBR in meat (NMKL, 1989). In intermediate time, samples were stored at −20 °C.
2.2 การจัดการและการวิเคราะห์ตัวอย่างไขมันเกี่ยวกับ 400-800 กรัมของตัวอย่างอาหารที่ถูก homogenised ส่วนหนึ่งของกลุ่มตัวอย่างที่ซ้ำกัน homogenised ถูกสกัดด้วยเมทานอล: คลอโรฟอร์มตาม Folch กากและ Solane-สแตนลี่ย์ (1957) สารสกัดจากไขมันถูกดัดแปลงเป็นเอสเทอกรดไขมันโอเมธิล (FAME) โดยการบ่มด้วย 0.01 M โซดาไฟในเมทานอลที่ 60-65 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาทีตามด้วยคอลเลกชันของชื่อเสียงที่ละลายในเฮกเซน ชื่อเสียงถูกแยกออกด้วย GC (Agilent 6890) พร้อมกับขั้วโลกคอลัมน์หลอมรวมของเส้นเลือดฝอย, แยกหัวฉีด (อัตราส่วนแยก: 50 มล. / นาที) และตรวจจับเปลวไฟ Ionisation (FID) โปรแกรมอุณหภูมิเริ่มต้นที่ 100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาทีและเพิ่มขึ้นที่ 15 ° C / นาทีถึง 160 องศาเซลเซียสหลังจากนั้นที่ 4 ° C / นาทีขึ้นถึง 210 องศาเซลเซียสและจัดขึ้นที่ 210 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 12 นาที ก๊าซฮีเลียมเป็นผู้ให้บริการ (ความดันเริ่มต้น 80 ปาสคาล) และก๊าซแต่งหน้าเป็นไนโตรเจน กรดไขมันของแต่ละบุคคลที่ถูกระบุด้วยมาตรฐานภายนอก (68A หรือ St-85 Nu เช็ค, Minnesota, USA) และเวลาการเก็บรักษา หัวฉีดและเครื่องตรวจจับอุณหภูมิถูกกำหนดให้ 275 และ 250 ° C ตามลำดับ นอกจากนี้ TFA ที่ถูกตรวจพบในปี 2006 และ 2007 ถูกแยกออกบน 100 เมตร CP SIL-88 คอลัมน์ซิลิกาเส้นเลือดฝอยผสมกับโปรแกรมอุณหภูมิเริ่มต้นที่ 175 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60 นาทีเพิ่มขึ้นอยู่ที่ 10 ° C / นาทีขึ้นไป 210 องศาเซลเซียสและเก็บไว้ที่ 210 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 51 นาที ก๊าซฮีเลียมเป็นผู้ให้บริการ (ความดันเริ่มต้น 180 กิโลปาสคาลและ 40 อัตราส่วนแยกมล. / นาที) TFAS บุคคลที่ถูกระบุโดยมาตรฐานภายนอก (K-110 ออลเทควิทยาศาสตร์ประยุกต์ Labs, สหรัฐอเมริกา) และเวลาการเก็บรักษา FAs ทั้งหมดถูกแสดงเป็น% จากทั้งหมดเอฟเอ วิธีการที่ใช้ในการวิเคราะห์ของกรดไขมันที่ได้รับการรับรอง (ISO / IEC) ตั้งแต่ปี 1995 โดย SWEDAC (คณะสวีเดนได้รับการรับรองและการประเมินความสอดคล้อง) คุณภาพของการทำงานการวิเคราะห์จะมั่นใจได้อย่างต่อเนื่องในรูปแบบของกลุ่มตัวอย่างที่ว่างเปล่าตัวอย่างควบคุมและวิเคราะห์วัสดุอ้างอิงรับรอง ขีด จำกัด การตรวจสอบเป็น 0.03% เคมีส่วนที่ 2 ที่ NFA ประสานงานปริมาณไขมันวิเคราะห์ซึ่งถูกส่งสำหรับการวิเคราะห์ภายนอก การวิเคราะห์ปริมาณไขมันในปี 2001 และ 2006 ทำโดยสถาบันสัตวแพทย์แห่งชาติใน Uppsala ปริมาณไขมันทั้งหมดได้รับการวิเคราะห์โดย gravimetrically EU-วิธี (เช่น Directive 98/64 / EG วิธี-B) วิเคราะห์ตัวอย่างในปี 2007 ถูกส่งไปยังห้องปฏิบัติการ ALcontrol (ALcontrol AB, ได้รับการรับรองห้องปฏิบัติการ) ในLinköping ปริมาณไขมันทั้งหมดได้รับการวิเคราะห์โดยวิธี gravimetric NMKL 131, ไขมัน, ความมุ่งมั่นโดย SBR ในเนื้อสัตว์ (NMKL, 1989) ในเวลากลางตัวอย่างที่ถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียส
การแปล กรุณารอสักครู่..