The activity of enzymes was assayed

The activity of enzymes was assayed (Jung and Watkins, 2011).
For analysis of enzymatic activities, frozen peel tissues (2.0 g) from
eight fingers in each treatment were homogenized with 10 mL of
0.05 M sodium phosphate buffer (pH 7.0) containing 0.2 g PVPP
(Polyvinylpolypyrrolidone, Dingguo, Beijing, China) for POD, and
PPO measurement and centrifuged at 12,000
×g for 20 min (Sigma
Laborzenfrifugen, 3K15, Germany). The supernatants were used to
assay enzymatic activities. All steps in the preparation of extracts
were carried out at 4 ◦C.
PPO (EC 1.10.3.2) activity was measured by incubating 0.1 mL of
enzyme extract with 2.9 mL of buffered substrate (0.05 M sodium
phosphate, pH 7.0) containing 10 mM catechol, and then monitoring
the change in absorbance at 398 nm. The change in absorbance
at 398 nm was recorded every 30 s for 4 min by a spectrophotometer
(UVmini-1240, Shimadzu Corp., Japan). One unit of activity
of PPO was defined as the amount of enzyme causing 0.001
absorbance increase per minute under the assay conditions. The
specific PPO activity was expressed as U mg−1 protein.
POD (EC 1.11.1.7) activity was based on the determination of
guaiacol oxidation at 470 nm by H2O2. The 3 mL reaction buffer
contained 0.1 mL of 4.0% guaiacol, 0.1 mL of 0.46% H2O2 and 2.75 mL
of buffered substrate (0.05 M sodium phosphate, pH 7.0), and the
reaction was initiated by adding 0.05 mL of crude enzyme extract.
The change in absorbance at 470 nm was followed every 30 s for
4 min by a spectrophoto-meter (UVmini-1240, Shimadzu Corp.,
Japan). One unit of POD was defined as the amount of enzyme
causing a 0.01 absorbance increase per minute under assay the
conditions. The specific POD activity was expressed as U mg−1
protein.
Protein contents were measured according to the method of
Bradford (1976), using bovine serum albumin (BSA) as standard

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กิจกรรมของเอนไซม์ถูก assayed (Jung และเอมส์มิชชั้น 2011)สำหรับการวิเคราะห์ของกิจกรรมของเอนไซม์ในระบบ แช่แข็งเนื้อเยื่อเปลือก (2.0 g) จากเองในแต่ละทรีทเม้นต์ได้ homogenized เป็นกลุ่มกับ 10 mL ของ0.05 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.0) ประกอบด้วย 0.2 g PVPP(Polyvinylpolypyrrolidone, Dingguo ปักกิ่ง จีน) สำหรับ POD และวัด PPO และ centrifuged ที่ 12000ซื้อ g สำหรับ 20 นาที (ซิกมาLaborzenfrifugen, 3 K 15 เยอรมนี) Supernatants เคยใช้วิเคราะห์เอนไซม์ในระบบกิจกรรม ทุกขั้นตอนในการเตรียมสารสกัดจากได้ดำเนินการที่ 4 ◦Cกิจกรรม PPO (EC 1.10.3.2) ถูกวัด โดย incubating 0.1 mL ของเอนไซม์สกัดกับ 2.9 mL ของพื้นผิวถูกบัฟเฟอร์ (0.05 M โซเดียมฟอสเฟต pH 7.0) ประกอบด้วย catechol 10 มม. และตรวจสอบแล้วการเปลี่ยนแปลง absorbance ที่ 398 nm การเปลี่ยนแปลง absorbanceที่ 398 nm ถูกบันทึกทุก ๆ 30 s สำหรับ 4 นาทีโดยเครื่องทดสอบกรดด่าง(UVmini-1240, Shimadzu Corp. ญี่ปุ่น) หน่วยของกิจกรรมของ PPO ถูกกำหนดเป็นจำนวนเอนไซม์ที่ก่อให้เกิด 0.001เพิ่ม absorbance ต่อนาทีภายใต้เงื่อนไขการทดสอบ ที่กิจกรรม PPO ถูกแสดงเป็นโปรตีน mg−1 UPOD (EC 1.11.1.7) กิจกรรมเป็นไปตามที่กำหนดออกซิเดชัน guaiacol ที่ 470 nm โดย H2O2 บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา 3 mLอยู่ 0.1 mL ของ guaiacol 4.0%, 0.1 mL 0.46% H2O2 และ 2.75 mLของพื้นผิวถูกบัฟเฟอร์ (0.05 M โซเดียมฟอสเฟต pH 7.0), และเริ่มปฏิกิริยา โดยเพิ่ม 0.05 mL ของเอนไซม์ดิบสารสกัดการเปลี่ยนแปลง absorbance ที่ 470 nm ได้ตามทุก 30 s สำหรับ4 นาที โดยเป็น spectrophoto เมตร (UVmini 1240, Shimadzu Corp.ญี่ปุ่น) หนึ่งหน่วยเท่านั้นถูกกำหนดเป็นยอดของเอนไซม์ทำให้เกิดการเพิ่มขึ้น 0.01 absorbance ต่อนาทีภายใต้การวิเคราะห์การเงื่อนไขการ กิจกรรมเท่านั้นที่ถูกแสดงเป็น U mg−1โปรตีนโปรตีนเนื้อหาถูกวัดตามวิธีของแบรดฟอร์ด (1976), ใช้วัว serum albumin (บีเอสเอ) เป็นมาตรฐาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กิจกรรมของเอนไซม์ได้รับการวิเคราะห์ (จุงและวัตคินส์ 2011) ได้.
สำหรับการวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์แช่แข็งเนื้อเยื่อเปลือก (2.0 กรัม)
จากแปดนิ้วมือในการรักษาแต่ละหดหาย10 มิลลิลิตร
0.05 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.0) ที่มี 0.2 PVPP กรัม
(Polyvinylpolypyrrolidone, Dingguo, ปักกิ่ง, จีน) สำหรับ POD
และวัดPPO และหมุนเหวี่ยงที่ 12,000
×กรัมเป็นเวลา 20 นาที (ซิกม่า
Laborzenfrifugen, 3K15, เยอรมนี) supernatants ถูกนำมาใช้
assay กิจกรรมของเอนไซม์ ทุกขั้นตอนในการจัดทำสารสกัดได้ดำเนินการใน 4 ◦C. PPO (EC 1.10.3.2) กิจกรรมโดยวัดจากการบ่ม 0.1 มลสารสกัดเอนไซม์2.9 มิลลิลิตรของพื้นผิวบัฟเฟอร์ (0.05 M โซเดียมฟอสเฟตpH 7.0) ที่มี 10 มิลลิ catechol และจากนั้นการตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสงที่398 นาโนเมตร การเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสงที่ 398 นาโนเมตรได้รับการบันทึกทุก 30 วินาทีเป็นเวลา 4 นาทีโดยสเปก (UVmini-1240, Shimadzu คอร์ปญี่ปุ่น) หน่วยหนึ่งของกิจกรรมของ PPO ถูกกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ที่ก่อให้เกิด 0.001 เพิ่มขึ้นการดูดกลืนแสงต่อนาทีภายใต้เงื่อนไขการทดสอบ กิจกรรม PPO เฉพาะได้รับการแสดงเป็น U-1 มิลลิกรัมโปรตีน. POD (EC 1.11.1.7) กิจกรรมอยู่บนพื้นฐานของความมุ่งมั่นของการเกิดออกซิเดชันguaiacol ที่ 470 นาโนเมตรโดย H2O2 บัฟเฟอร์ 3 ปฏิกิริยามิลลิลิตรมี0.1 มิลลิลิตร guaiacol 4.0%, 0.1 มิลลิลิตร H2O2 0.46% และ 2.75 มิลลิลิตรของพื้นผิวบัฟเฟอร์(0.05 M โซเดียมฟอสเฟตค่า pH 7.0) และปฏิกิริยาที่ได้ริเริ่มขึ้นโดยการเพิ่ม0.05 มิลลิลิตรของสารสกัดเอนไซม์. การเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสงที่ 470 นาโนเมตรตามมาทุก 30 วินาทีสำหรับ4 นาทีโดย spectrophoto เมตร (UVmini-1240, Shimadzu คอร์ปญี่ปุ่น) หนึ่งหน่วยของ POD ถูกกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ที่ก่อให้เกิดการเพิ่มขึ้นของการดูดกลืนแสง0.01 ต่อนาทีภายใต้การทดสอบเงื่อนไข กิจกรรม POD เฉพาะได้รับการแสดงเป็น U-1 mg โปรตีน. เนื้อหาโปรตีนวัดตามวิธีการของแบรดฟอ (1976) โดยใช้ซีรั่มอัลบูมิวัว (BSA) เป็นมาตรฐาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กิจกรรมของเอนไซม์ในซีรั่ม ( จุง และ วัตกิ้นส์ , 2011 ) .
สำหรับการวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์เนื้อเยื่อเปลือกแข็ง ( 2.0 G )
8 นิ้วในแต่ละทรีทเมนต์มีโฮโมกับ 10 มล.
0.05 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0 ) ที่มี 0.2 กรัม pvpp
( polyvinylpolypyrrolidone dingguo , ปักกิ่ง , จีน ) สำหรับฝักและ PPO การวัดและระดับที่ 12

× G 20 นาที ( Sigma
laborzenfrifugen 3k15 , เยอรมนี ) การใช้เอนไซม์ supernatants

) กิจกรรม ขั้นตอนในการเตรียมสารสกัด
ทดลองที่ 4 ◦ C .
PPO ( EC 1.10.3.2 ) กิจกรรมวัด โดยการแช่ 0.1 มิลลิลิตรเอนไซม์สกัดกับ 2.9 กรัม
2 ( โซเดียมฟอสเฟต 0.05 m (
, pH 7.0 ) ที่มี แคติคอล 10 มม. และจากนั้นตรวจสอบ
เปลี่ยนค่าใน nm 398 .การเปลี่ยนแปลงในค่า
ที่ nm 398 ถูกบันทึกไว้ทุก 30 วินาที 4 นาทีโดย Spectrophotometer
( uvmini-1240 Shimadzu , คอร์ป , ญี่ปุ่น ) หน่วยหนึ่งของกิจกรรม
ของ PPO ถูกกำหนดไว้เป็นปริมาณของเอนไซม์ที่ก่อให้เกิด 0.001
ดูดกลืนเพิ่มขึ้นต่อนาทีภายใต้เงื่อนไขการทดสอบ
กิจกรรมของเอนไซม์ PPO ที่เฉพาะเจาะจงจะแสดงเป็นคุณ− 1 มิลลิกรัมโปรตีน .
ฝัก ( EC 1.11.1.7 ) กิจกรรมขึ้นอยู่กับการหา
ค่า 470 nm โดยการออกซิไดซ์ H2O2 . 3 มิลลิลิตรปฏิกิริยาบัฟเฟอร์
ที่มีอยู่ 0.1 มิลลิลิตร 4.0% ค่า 0.1 ml ของ H2O2 0.46 % และ 2.75 ml
ของพื้นผิว ( 0.05 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0 ) และได้ริเริ่มโดยการเพิ่ม
ปฏิกิริยา 0.05 มิลลิลิตรเอนไซม์สกัด
เปลี่ยนค่าการดูดกลืนแสงที่ 470 nm ตามทุก 30 S
4 นาทีโดย spectrophoto เมตร ( uvmini-1240 Shimadzu Corp . ,
, ญี่ปุ่น )หนึ่งหน่วยของฝักถูกกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ที่ก่อให้เกิด 0.01 ค่า

( เพิ่มต่อนาทีภายใต้เงื่อนไข กิจกรรมเฉพาะฝักจะแสดงเป็นคุณมก. − 1

เนื้อหาโปรตีน โปรตีน คือ วัด ตามวิธีการของ
แบรดฟอร์ด ( 1976 ) , การใช้อัลบูมิน ( BSA ) เป็นมาตรฐาน