The protocol below is adapted for t

The protocol below is adapted for trout from Toleikis et al. (1997). The ventricle was cut in three to four pieces which were weighed (range: 10–25 mg) and placed in 1.5 ml of ice-cold buffer (ATP: 1 mM, PCr: 2 mM, Dithiothreitol: 0.5 mM EDTA: 5.5 mM, MgCl2: 2.5 mM, Imidazole: 10.0 mM, HEPES: 20.0 mM, KCl: 70.0 mM; pH 7.4) during less than 10 min to eliminate all traces of blood. Pieces of ventricle were then moved into 1.5 ml of chilled buffer with saponin (50 mg/ml) and collagenase (1.5 mg/ml). After 30 min, tissue fragments were then rinsed twice in cold buffer (10 min per rinse).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โพรโทคอด้านล่างจะปรับสำหรับเทราต์จาก Toleikis et al. (1997) อวัยวะกลวงถูกตัด 3-4 ชิ้นซึ่งมีน้ำหนัก (ช่วง: 10 – 25 มิลลิกรัม) และวางใน 1.5 ml บัฟเฟอร์ฉ่ำ (ATP: 1 mM, PCr: 2 มม. Dithiothreitol: 0.5 mM EDTA: 5.5 มม. MgCl2: 2.5 มม. อิมิดาโซล: 10.0 มม. HEPES: 20.0 mM, KCl: 70.0 มม. pH 7.4) ระหว่างน้อยกว่า 10 นาทีในการกำจัดร่องรอยทั้งหมดของเลือด ชิ้นส่วนของอวัยวะกลวงแล้วได้ถูกย้ายไปยัง 1.5 ml บัฟเฟอร์เย็น saponin (50 mg/ml) และ collagenase (1.5 mg/ml) หลังจาก 30 นาที เนื้อเยื่อชิ้นส่วนถูกแล้ว rinsed สองในบัฟเฟอร์เย็น (ต่อล้าง 10 นาที)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โปรโตคอลด้านล่างนี้เหมาะสำหรับปลาเทราท์จาก Toleikis et al, (1997) ช่องถูกตัดใน 3-4 ชิ้นที่ได้รับการชั่งน้ำหนัก (ช่วง: 10-25 มก.) และวางไว้ใน 1.5 มล. ของ buffer เย็น (ATP: 1 มิลลิ, PCR: 2 มิลลิ, dithiothreitol: EDTA 0.5 มิลลิ: 5.5 มิลลิ, MgCl2: 2.5 มิลลิ Imidazole: 10.0 มิลลิ HEPES: 20.0 มิลลิ, KCl: 70.0 มิลลิ; ค่า pH 7.4) ในระหว่างการน้อยกว่า 10 นาทีเพื่อขจัดร่องรอยของเลือด ชิ้นส่วนของช่องอยู่แล้วย้ายเข้ามา 1.5 มล. ของ buffer เย็นกับซาโปนิน (50 mg / ml) และคอลลา (1.5 mg / ml) หลังจาก 30 นาทีเศษเนื้อเยื่อถูกล้างแล้วสองครั้งในบัฟเฟอร์เย็น (10 นาทีล้างออกต่อ)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โพรโทคอลด้านล่างเหมาะสำหรับปลาเทราท์จาก toleikis et al . ( 1997 ) โพรงที่ถูกตัดในสามสี่ชิ้น ซึ่งมีน้ำหนัก ( ช่วง 10 – 25 มิลลิกรัม ) และวางไว้ใน 1.5 มิลลิลิตร น้ำแข็งเย็น บัฟเฟอร์ ( ATP 1 มม. , PCR 2 มม. บัตรแข็ง 0.5 mM EDTA : 5.5 มม. , MgCl2 : 2.5 มิลลิเมตร จิบะ มาโมรุ : 10.0 มม. ฮีเปส : 20.0 มม. โพแทสเซียม : 70.0 มม. ; pH 7.4 ) ในน้อยกว่า 10 นาทีเพื่อขจัดทุกร่องรอยของเลือดชิ้นส่วนของหัวใจห้องล่าง แล้วย้ายเข้าไป 1.5 ml แช่เย็นบัฟเฟอร์ด้วยซาโปนิน ( 50 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ) และคอลลาเจน ( 1.5 มก. / มล. ) หลังจาก 30 นาทีเศษทิชชู่ แล้วล้างสองครั้งในเย็นบัฟเฟอร์ ( 10 นาทีต่อล้าง )