1. Briefly vortex cysts directly af

1. Briefly vortex cysts directly after incubation in Stage 1 solution.
2. Sediment cysts for 5 min, room temperature, at 8000 g on tabletop centrifuge.
3. Discard supernatant and resuspend cysts
in 1.5 ml of pre-warmed Stage 2 excystation solution in the Eppendorf tube. Vortex
briefl y to resuspend parasites.
4. Incubate tubes at 37°C for 1 h. Vortex gently every 15 min.
5. Briefly vortex samples before sedimenting
cysts in tabletop centrifuge at 8000 g at
room temperature for 5 min.
6. Discard supernatant and resuspend parasites in 1.5 ml of pre-warmed complete
modified TYI-S-33 (made on the day of
excystation).
7. Incubate tubes at 37°C for 1 h with periodic agitation.
8. Concentrate excyzoites in tabletop centrifuge
at 8000g at room temperature for 5 min.
9. Aspirate all but ~100l of medium and resuspend before counting excyzoites.
10. Enumerate excyzoites on a hemocytometer. Excyzoites will have motility and
this will assist one to differentiate the excyzoites from the non-excysted cysts. See
Fig. 23.8E for an image of an excyzoite.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

1. สั้น ๆ vortex ซีสต์โดยตรงหลังจากฟักตัวในโซลูชันขั้น 12. ตะกอนซีสต์ใน 5 นาที อุณหภูมิห้อง ที่ 8000 g บน tabletop เครื่องหมุนเหวี่ยง3. ละทิ้ง supernatant และ resuspend ซีสต์ในมล 1.5 ของโซลูชั่น excystation 2 ขั้นก่อน warmed ใน Eppendorf หลอด Vortexy briefl การ resuspend กับ4. ฟักหลอดที่ 37° C สำหรับ 1 h. Vortex เบา ๆ ทุก 15 นาที5. ตัวอย่างสั้น ๆ vortex ก่อน sedimentingซีสต์ในเครื่องหมุนเหวี่ยง tabletop ที่ 8000 g ที่อุณหภูมิห้องสำหรับ 5 นาที6. ละทิ้ง supernatant และ resuspend ปรสิตใน 1.5 ml warmed ก่อนเสร็จสมบูรณ์แก้ไข TYI-S-33 (ทำในวันexcystation)7. ฟักหลอดที่ 37° C สำหรับ h 1 กับอาการกังวลต่องวด8. excyzoites เข้มข้นในเครื่องหมุนเหวี่ยง tabletopที่ g 8000 ที่อุณหภูมิห้องใน 5 นาที9. aspirate แต่ l ~ 100 ของกลางทั้งหมด และ resuspend ก่อนนับ excyzoites10. excyzoites บน hemocytometer ระบุ Excyzoites จะมี motility และนี้จะช่วยให้ excyzoites แตกต่างจากซีสต์ไม่ใช่ excysted ดูFig. 23.8E สำหรับรูป excyzoite

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

1. ถุงน้ำวนสั้น ๆ โดยตรงหลังจากบ่มในขั้นที่ 1 การแก้ปัญหา.
2 ซีสต์ตะกอนเป็นเวลา 5 นาที, อุณหภูมิห้องที่ 8000? กรัมแปะบนโต๊ะ.
3 ยกเลิกใสและซีสต์ resuspend
1.5 มิลลิลิตรเวทีก่อนอุ่น 2 excystation สารละลายในหลอด Eppendorf Vortex
briefl Y เพื่อ resuspend ปรสิต.
4 ฟักหลอดที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง Vortex เบา ๆ ทุก 15 นาที.
5 ตัวอย่างสั้น ๆ
ก่อนที่จะตกตะกอนน้ำวนซีสต์ในโต๊ะเครื่องหมุนเหวี่ยงที่8000? กรัมที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 นาที. 6 ยกเลิกใสและปรสิต resuspend 1.5 มิลลิลิตรก่อนอุ่นสมบูรณ์ปรับเปลี่ยน TYI-S-33 (ทำในวันที่ excystation). 7 ฟักหลอดที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมงกับการก่อกวนเป็นระยะ. 8 มีสมาธิในการหมุนเหวี่ยง excyzoites โต๊ะที่8000? กรัมที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 นาที. 9 สูดลมหายใจ แต่ ~ 100 ลิตรขนาดกลางและ resuspend ก่อนที่จะนับ excyzoites. 10 ระบุ excyzoites ใน hemocytometer Excyzoites จะมีการเคลื่อนไหวและการนี้จะช่วยหนึ่งที่จะแตกต่างexcyzoites จากซีสต์ที่ไม่ excysted ดูรูป 23.8E สำหรับภาพของ excyzoite เป็นนักการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

1 . สั้น Vortex ซีสต์โดยตรงหลังจากบ่มในขั้นที่ 1 โซลูชั่น .
2 ตะกอนเชื้อเป็นเวลา 5 นาที อุณหภูมิในห้องที่ 8000  g บนโต๊ะ .
3 ทิ้งและนำ resuspend ซีสต์
ในปริมาณ 1.5 ก่อนเปิด 2 เวที excystation สารละลายในหลอดเพนดอร์ฟ . ย่อวอร์
y resuspend ปรสิต .
4 บ่มที่ 37 ° C หลอด vortex เบา ๆเป็นเวลา 1 ชั่วโมงทุก 15 นาที
5สั้น Vortex ตัวอย่างก่อน sedimenting
ซีสต์ในโต๊ะเครื่อง 8000  G ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 นาที

6 ทิ้งและนำ resuspend ปรสิตใน 1.5 ml ก่อนอุ่นสมบูรณ์
แก้ไข tyi-s-33 ( ทำในวัน
excystation )
7 บ่มที่ 37 องศาท่อ C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ด้วยระยะเวลาการกวน .
8 สมาธิ excyzoites ในโต๊ะ centrifuge
ที่ 8 , 000  G ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 นาที
9หรือทั้งหมด แต่  ~ 100 ลิตรขนาดกลางและ resuspend ก่อนนับ excyzoites .
10 แจกแจง excyzoites บน hemocytometer . excyzoites จะมีการเคลื่อนที่และ
นี้จะช่วยหนึ่งที่จะแยกแยะ excyzoites จากไม่ excysted ขจัดเชื้อจุลินทรีย์ได้ เห็นรูปที่ 23.8e
สำหรับรูปภาพของ excyzoite .