Detecting single fl uorescent molecu

Detecting single fl uorescent molecules remains extremely challenging. Because some 5 percent are missed, more “reads” must be performed to fi ll in the resulting gap errors. That is why most groups fi rst copy, or amplify, the single DNA template of interest by a process called polymerase chain reaction (PCR). In this step, too, a variety of approaches have emerged that make the use of bacteria to generate DNA copies unnecessary. One cell-free amplifi cation method, developed by Eric Kawashima of the Serono Pharmaceutical Research Institute in Geneva, Alexander Chetverin of the Russian Academy of Sciences, and Mitra when he was at Harvard, creates individual colonies of polymerase—polonies—freely arrayed directly on the surface of a microscope slide or a layer of gel. A single template molecule undergoes PCR within each polony, producing millions of copies, which grow rather like a bacterial colony from the central original template. Because each resulting polony cluster is one micron wide and one femtoliter in volume, billions of them can fi t onto a single slide. A variation on this system fi rst produces polonies on tiny beads inside droplets within an emulsion. After the reaction millions of such beads, each bearing copies of a different template, can be placed in individual wells or immobilized by a gel where sequencing is performed on all of them simultaneously. These methods of template amplifi cation and of sequencing by base extension or by ligation are just a few representative examples of the approaches dozens of different academic and corporate research groups are taking to sequencing by synthesis. Still another technique, sequencing by hybridization, also uses fl uorescence to generate a visible signal and, like sequenc
SEQUENCING

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตรวจหาโมเลกุล uorescent flเดียวยังคงท้าทายมาก เนื่องจากบาง 5 เปอร์เซ็นต์ที่จะพลาด ต้องทำมากกว่า "อ่าน" เพื่อfiจะเกิดข้อผิดพลาดช่องว่างได้ นั่นคือ เหตุผลส่วนใหญ่กลุ่มfi rst คัดลอก หรือขยายข้อ ความ แบบดีเอ็นเอเดียวน่าสนใจโดยเป็นกระบวนการที่เรียกว่าปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR) ในขั้นตอนนี้ เกินไป หลากหลายวิธีได้เกิดที่ทำให้การใช้แบคทีเรียในการสร้างสำเนาดีเอ็นเอที่ไม่จำเป็น เซลล์ฟรี amplifi cation วิธีหนึ่ง พัฒนา โดย Eric Kawashima สถาบันโซยาวิจัยในเจนีวา อเล็กซานเดอร์ Chetverin ของสถาบันวิทยาศาสตร์แห่งรัสเซีย และมิตราเมื่อเขามาที่ฮาร์วาร์ด สร้างอาณานิคมแต่ละของพอลิเมอเรส — polonies — อิสระรำใส่เสื้อผ้าบนพื้นผิวของภาพนิ่งกล้องจุลทรรศน์หรือชั้นของเจ แม่เดี่ยวนโมเลกุลทนี้ PCR ภายในแต่ละ polony ผลิตล้านสำเนา การเติบโตค่อนข้างเช่นโคโลนีแบคทีเรียจากแบบเดิมที่เซ็นทรัล เนื่องจากแต่ละคลัสเตอร์ polony ผลลัพธ์ หนึ่งไมครอนกว้างและ femtoliter หนึ่งปริมาณ พันล้านของพวกเขาสามารถfi t บนภาพนิ่งเดียว การเปลี่ยนแปลงนี้ rst fiระบบสร้าง polonies บนลูกปัดเล็ก ๆ ภายในหยดภายในเป็นอิมัลชัน หลังจากปฏิกิริยาล้านเช่นลูกปัด แต่ละเรืองสำเนาของแม่แบบแตกต่างกัน สามารถวางในแต่ละบ่อ หรือหา โดยเจที่ลำดับดำเนินการในทั้งหมดพร้อมกัน วิธีการเหล่านี้ ของแม่ amplifi cation และจัดลำดับ โดยขยายฐาน หรือไข่เพียงตัวอย่างพนักงานของหลายสิบวิธีของวิชาการต่าง ๆ และกลุ่มวิจัยขององค์กรจะมีการจัดลำดับ โดยการสังเคราะห์ เทคนิคอื่นยังคง ลำดับเบส โดย hybridization ยังใช้fl uorescence การสร้างสัญญาณที่มองเห็นได้ ชอบ sequencจัดลำดับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตรวจจับโมเลกุล uorescent ชั้นเดียวยังคงเป็นความท้าทายอย่างมาก เพราะบางร้อยละ 5 จะพลาดมากขึ้น "อ่าน" จะต้องมีการดำเนินการเพื่อให้ไฟ LL ในช่องว่างข้อผิดพลาดที่เกิดขึ้น นั่นคือเหตุผลที่ส่วนใหญ่เป็นกลุ่มแรก fi คัดลอกหรือขยายแม่แบบดีเอ็นเอเดียวที่น่าสนใจโดยกระบวนการที่เรียกว่าโพลีเมอปฏิกิริยาลูกโซ่ (PCR) ในขั้นตอนนี้ด้วยความหลากหลายของวิธีการที่จะโผล่ออกมาที่ทำให้การใช้แบคทีเรียที่จะสร้างสำเนาดีเอ็นเอที่ไม่จำเป็น หนึ่งในมือถือฟรีวิธีไอออนบวกสาย ampli พัฒนาโดยเอริคชิม่าของโซโรโน่เภสัชกรรมสถาบันวิจัยในเจนีวา, อเล็กซานเด Chetverin ของรัสเซีย Academy of Sciences และ Mitra เมื่อเขาเป็นที่ฮาร์วาร์สร้างอาณานิคมของแต่ละโพลิเมอร์-polonies-ได้อย่างอิสระรบโดยตรง พื้นผิวของสไลด์กล้องจุลทรรศน์หรือชั้นของเจล โมเลกุลแม่แบบเดียวผ่าน PCR ภายใน polony แต่ละผลิตล้านเล่มซึ่งเติบโตค่อนข้างชอบเป็นอาณานิคมของแบคทีเรียจากแม่แบบเดิมกลาง เพราะแต่ละกลุ่ม polony ส่งผลให้เป็นหนึ่งไมครอนกว้างและเป็นหนึ่งใน femtoliter ปริมาณพันล้านของพวกเขาสามารถ fi เสื้อลงบนสไลด์เดียว การเปลี่ยนแปลงในสายแรกระบบนี้ผลิต polonies บนเม็ดเล็ก ๆ ภายในหยดภายในอิมัลชัน หลังจากที่ล้านปฏิกิริยาของลูกปัดดังกล่าวแต่ละแบกสำเนาของแม่แบบที่แตกต่างกันสามารถอยู่ในหลุมบุคคลหรือตรึงด้วยเจลที่จะดำเนินการจัดลำดับทั้งหมดของพวกเขาไปพร้อม ๆ กัน วิธีการเหล่านี้แม่แบบไอออนบวกและสาย ampli ลำดับโดยการขยายฐานหรือ ligation เป็นเพียงตัวอย่างไม่กี่ตัวแทนของวิธีการหลายสิบของกลุ่มวิจัยที่แตกต่างกันของนักวิชาการและองค์กรที่จะมีการจัดลำดับจากการสังเคราะห์ ยังคงเทคนิคลำดับโดยการผสมพันธุ์ยังใช้ชั้น uorescence เพื่อสร้างสัญญาณที่มองเห็นได้และเช่น sequenc
ลำดับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การตรวจจับโมเลกุลเดี่ยวfl uorescent ยังคงมีความท้าทายอย่างมาก เพราะบาง 5 เปอร์เซ็นต์ จะพลาดอีก " อ่าน " ต้องดำเนินการให้จึงจะอยู่ในช่องว่างที่เกิดข้อผิดพลาด นั่นคือเหตุผลที่กลุ่มมากที่สุดจึงตัดสินใจเดินทางไปถ่ายเอกสาร หรือขยาย เดี่ยวดีเอ็นเอแม่แบบที่น่าสนใจ โดยกระบวนการที่เรียกว่าปฏิกิริยาลูกโซ่ ( PCR ) ในขั้นตอนนี้ด้วยความหลากหลายของวิธีการที่ได้เกิดที่ทำให้การใช้แบคทีเรียเพื่อสร้างสำเนาดีเอ็นเอที่ไม่จำเป็น หนึ่งในวิธี ampli การสังเคราะห์จึงพัฒนาโดย อีริค คาวาชิม่า ของ serono เภสัชกรรมการวิจัยสถาบันในเจนีวา , อเล็กซานเดอร์ chetverin ของสถาบันวิทยาศาสตร์ และ Mitra เมื่อเขาอยู่ที่ฮาร์วาร์ดสร้างอาณานิคมของบุคคล polonies ได้อย่างอิสระใช้นุ่งห่มโดยตรงบนพื้นผิวของกล้องจุลทรรศน์ภาพนิ่งหรือชั้นของเจล โมเลกุลของแม่แบบเดี่ยวของ PCR ในแต่ละ polony ผลิตล้านเล่ม ซึ่งเติบโตมากกว่าอาณานิคมแบคทีเรียจากแม่แบบเดิมกลาง เพราะแต่ละกลุ่มที่เกิด polony เป็นหนึ่งไมครอน กว้างหนึ่ง femtoliter ในระดับเสียงพันล้านของพวกเขาจึงไม่สามารถลงบนภาพนิ่งเดียว การเปลี่ยนแปลงในระบบนี้จึงตัดสินใจเดินทางไปสร้าง polonies บนลูกปัดเล็ก ๆ ภายในหยดในอิมัลชัน หลังจากปฏิกิริยาล้านเช่นลูกปัดแต่ละเรือง ชุดของแม่แบบที่แตกต่างกันสามารถวางไว้ในหลุมบุคคล หรือตรึง โดยเจลที่ลำดับจะดำเนินการบนทั้งหมดของพวกเขาในเวลาเดียวกันวิธีการเหล่านี้ของแม่แบบ ampli จึงบวกและจัดลำดับโดยการขยายฐานหรือ Ligation เป็นเพียงไม่กี่ตัวอย่างของวิธีการหลายสิบตัวแทนของวิชาการที่แตกต่างกัน และกลุ่มงานวิจัยของ บริษัท จะต้องจัดลำดับโดยการสังเคราะห์ ยังมีเทคนิคอื่น ลำดับเบสโดยยังใช้fl uorescence เพื่อสร้างสัญญาณที่มองเห็นได้และชอบ sequenc
ลำดับ