The extraction and determination of

The extraction and determination of the enzymatic activity of peroxidase were conducted through the method recommended by MATSUNO and URITANI (1972), where we took a sample of the leaves from each experimental unit, placed it in a refrigerated porcelain pot, because this analysis must be conducted at temperatures under 4ºC.The samples were macerated with 3.0 mL of buffer phosphate 0.05 M (pH 7) with more 0.005g of polyvinylpyrrolidone. The extract was conditioned in eppendorf tubes properly identified, which were taken to the centrifuge for 20 minutes at 4ºC and 5000
rpm. After the centrifugation, we removed 2.0 mL of the supernatant and placed it in identified test tubes, where there was a solution of 3.0 mL of buffer citrate (pH 5.0) plus 0.5 mL of hydrogen peroxide at 3%and more 0.5 mL of guaiacol 0.5%. The solution was stirred and placed for 15 minutes under Bain Marie at 30ºC and, after, 10 minutes in ice in order to stop the reactions. Finally, we added 0.5 mL of sodium bisulfite, stirred and made the reading at 450 nm through the spectrophotometer,obtaining thus the values of absorbance.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การสกัดและวิเคราะห์กิจกรรมเอนไซม์ของฮอสได้ดำเนินการผ่านวิธีการแนะนำ โดย MATSUNO และ URITANI (1972), ที่เราเอาตัวอย่างของใบจากแต่ละหน่วยทดลอง อยู่ในหม้อเครื่องเคลือบเย็น เนื่องจากการวิเคราะห์นี้ต้องดำเนินการที่อุณหภูมิภายใต้ 4ºC ตัวอย่างถูก macerated ด้วยฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 0.05 M (pH 7) 3.0 มิลลิลิตรเติม 0.005 กรัมของ polyvinylpyrrolidone สารสกัดถูกปรับในท่อ eppendorf ระบุอย่างถูกต้อง ซึ่งถ่ายให้เครื่องหมุนเหวี่ยงสำหรับ 20 นาที 4ºC และ 5000รอบต่อนาที หลังจากหมุนเหวี่ยง 2.0 mL ของ supernatant ถูกเอาออก และวางไว้ในหลอดทดสอบระบุ มี 3.0 mL ของสารละลาย บัฟเฟอร์ (pH 5.0) ซิเตรตบวก 0.5 mL ของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ 3% และเพิ่มเติม 0.5 mL ของ guaiacol 0.5% การแก้ปัญหากวน และวาง 15 นาทีภายใต้ Bain Marie 30ºC และ หลัง จาก 10 นาทีในน้ำแข็งเพื่อหยุดปฏิกิริยา ในที่สุด เราเพิ่ม 0.5 mL ของโซเดียมไบซัลไฟต์ กวน และทำการอ่านที่ 450 nm ผ่านสเปค ได้รับดังนั้นค่าของค่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การสกัดและความมุ่งมั่นของเอนไซม์ peroxidase ได้ดำเนินการผ่านวิธีการที่แนะนำโดย Matsuno และ URITANI (1972) ที่เราเอาตัวอย่างของใบจากแต่ละหน่วยทดลองวางมันลงในหม้อพอร์ซเลนในตู้เย็นเพราะการวิเคราะห์นี้จะต้องเป็น ดำเนินการภายใต้อุณหภูมิตัวอย่าง4ºC.Theถูกหมักกับ 3.0 มลฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 0.05 M (pH 7) ที่มีมากขึ้นของ 0.005g polyvinylpyrrolidone สารสกัดถูกปรับอากาศในหลอด Eppendorf ระบุอย่างถูกต้องซึ่งถูกนำไปแปะเป็นเวลา 20 นาทีที่4ºCและ 5000
รอบต่อนาที หลังจากการหมุนเหวี่ยงเราได้ลบ 2.0 มิลลิลิตรใสและวางมันลงในหลอดทดสอบระบุซึ่งมีวิธีการแก้ปัญหาของ 3.0 มลซิเตรทบัฟเฟอร์ (pH 5.0) บวก 0.5 มิลลิลิตรของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ที่ 3% และอื่น ๆ 0.5 มล guaiacol 0.5 % วิธีการแก้ปัญหาที่ถูกกวนและวางไว้เป็นเวลา 15 นาทีภายใต้ Bain Marie ที่ 30 องศาเซลเซียสและหลังจาก 10 นาทีในน้ำแข็งเพื่อหยุดปฏิกิริยา สุดท้ายเราเพิ่ม 0.5 มล bisulfite โซเดียมกวนและทำให้การอ่านที่ 450 นาโนเมตรผ่าน spectrophotometer ที่ได้รับจึงค่าดูดกลืนแสง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสกัดและการวิเคราะห์เอนไซม์ peroxidase จำนวนผ่านวิธีการแนะนำโดยมัตสึโนะ และ uritani ( 1972 ) ซึ่งเราเอาตัวอย่างของใบแต่ละหน่วยทดลอง วางไว้ในตู้เย็น หม้อเคลือบ เพราะการวิเคราะห์นี้จะต้องดำเนินการที่อุณหภูมิภายใต้ 4 ตัวอย่าง c . ºถูก macerated กับ 3.0 มิลลิลิตร 0.05 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( pH 7 ) กับ 0.005g เพิ่มเติมของพอลิวินิลไพร์โรลิโดน . สารสกัดที่เป็นเว็บไซด์ในเพนดอร์ฟหลอดระบุได้อย่างถูกต้อง ซึ่งนำไป centrifuge เป็นเวลา 20 นาทีที่ 4 º C และ 5000รอบต่อนาที หลังการปั่นเหวี่ยงเราออก 2.0 มิลลิลิตรของน่าน และวางไว้ในการระบุหลอดทดลองที่มีสารละลายบัฟเฟอร์ซิเตรต ( 3.0 มิลลิลิตร pH 5.0 ) บวก 0.5 ml ของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ที่ 3% และค่า 0.5 มิลลิลิตร 0.5% โซลูชั่นที่ถูกกวนและวางไว้ 15 นาทีภายใต้ Bain Marie ที่ 30 º C และหลังจาก 10 นาทีในน้ำแข็งเพื่อหยุดปฏิกิริยา สุดท้าย เราได้เพิ่ม 0.5 ml ของโซเดียมไบซัลไฟต์ , กวนและทำให้การอ่าน 450 nm ผ่านวัสดุที่ได้รับและค่าการดูดกลืนแสง .