PCR analysis of transformed plantsG

PCR analysis of transformed plants
Genomic DNA was extracted from young
leaves of transformed rice plants and untransformed
control plants using modified CTAB method (Hwang
and Kim, 2000). The extracted DNA was subjected
to PCR methods using primers specific to OSB2
gene. The primers were OSB2cdsF: 5'-ATGGCATCT
GCTCCTCCAGTTCAGG-3' and OSB2cdsR: 5'-TTA
CGGCGCCTTCCCCTGTCC-3'. The PCR amplification
was carried out in a 20 l reaction mixture
containing GoTaq® Green Master Mix (Promega,
USA), 100 ng of DNA and 0.5 M of each primer.
The PCR profile was initially at 95 oC for 3 min,
followed by 35 cycles at 95 oC for 1 min, 68 oC for 1
min and 72 oC for 1.5 min and 5 min at 72 oC for
final extension. The expected PCR products of 1,356
bp were analyzed on a 1 % (w/v) agarose gel by
electrophoresis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

PCR การวิเคราะห์พืชการแปรรูปGenomic DNA ที่สกัดจากหนุ่มสาวของแปลงพืชข้าว และ untransformedพืชควบคุมที่ใช้ปรับเปลี่ยนวิธี CTAB (Hwangแล้ว คิม 2000) ดีเอ็นเอแยกถูกยัดเยียดกับวิธี PCR ที่ใช้ไพรเมอร์เฉพาะ OSB2ยีน ไพรเมอร์ที่ถูก OSB2cdsF: 5'-ATGGCATCTGCTCCTCCAGTTCAGG-3' และ OSB2cdsR: 5'-TTACGGCGCCTTCCCCTGTCC-3' ขยาย PCRได้ดำเนินการในส่วนผสมปฏิกิริยา 20 lประกอบด้วย GoTaq ®สีเขียวต้นแบบผสม (Promegaสหรัฐอเมริกา), 100 ng ของดีเอ็นเอและ M 0.5 แต่ละพื้นโพรไฟล์ PCR ถูกเริ่มต้นที่ 95 องศาเซลเซียสสำหรับ 3 นาทีตามรอบ 35 ที่ 95 องศาเซลเซียสใน 1 นาที 68 องศาเซลเซียส 1นาทีและ 72 องศาเซลเซียสสำหรับ 1.5 นาทีและ 5 นาทีที่ 72 องศาเซลเซียสสำหรับส่วนขยายสุดท้าย ผลิตภัณฑ์ PCR ที่คาด 1,356bp ได้วิเคราะห์บน agarose เจ 1% (w/v) โดยelectrophoresis

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การวิเคราะห์ PCR
ของพืชเปลี่ยนจีโนมดีเอ็นเอที่สกัดจากหนุ่มสาวใบของพืชข้าวและเปลี่ยน
untransformed
พืชควบคุมโดยใช้วิธี CTAB การปรับเปลี่ยน (Hwang
และคิม, 2000) ดีเอ็นเอที่สกัดได้ภายใต้วิธี PCR โดยใช้ไพรเมอร์ที่เฉพาะเจาะจงเพื่อ OSB2 ยีน ไพรเมอร์เป็น OSB2cdsF: 5'-ATGGCATCT GCTCCTCCAGTTCAGG-3 และ OSB2cdsR: 5'-TTA CGGCGCCTTCCCCTGTCC-3 ' ขยาย PCR ได้ดำเนินการในส่วนผสมปฏิกิริยาl 20 ที่มีสีเขียวGoTaq®โทผสม (Promega, USA) 100 นาโนกรัมของ DNA และ 0.5 Mของแต่ละไพรเมอร์. รายละเอียดวิธี PCR เป็นคนแรกที่ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 นาทีตาม35 รอบที่ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาที 68 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาทีและ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1.5 นาทีและ 5 นาทีที่ 72 องศาเซลเซียสสำหรับส่วนขยายสุดท้าย ผลิตภัณฑ์ PCR ที่คาดหวังของ 1,356 bp วิเคราะห์บน 1% (w / v) เจล agarose โดยอิ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การวิเคราะห์ดีเอ็นเอของแปลงพืช
genomic DNA ที่สกัดจากใบของหนุ่ม
เปลี่ยนข้าวพืชและพืช
ควบคุม untransformed ใช้ดัดแปลงวิธี ctab ( ฮวาง
และคิม , 2000 ) สกัดดีเอ็นเอด้วยวิธี PCR เพื่อภายใต้
ใช้ไพรเมอร์ที่เฉพาะเจาะจงเพื่อยีน osb2

ไพรเมอร์ถูก osb2cdsf : 5 ' - atggcatct
gctcctccagttcagg-3 ' และ osb2cdsr : 5 ' - 8
cggcgccttcccctgtcc-3 ' ร่วมขยาย
ดำเนินการใน 20  L ปฏิกิริยาผสม
ที่มี gotaq ®สีเขียวต้นแบบผสม ( promega
, USA ) , 100 กรัมของดีเอ็นเอ และ M ละ 0.5
PCR ไพรเมอร์ โปรไฟล์ก็เริ่มที่ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 นาที
ตามด้วย 35 รอบ 95 องศาเซลเซียสนาน 1 นาที 68 OC สำหรับ 1
มินและ 72 องศาเซลเซียสสำหรับ 1.5 นาทีและ 5 นาทีที่ 72 องศาเซลเซียสสำหรับ
นามสกุลสุดท้าย โดยคาดว่าผลิตภัณฑ์ 1 , 356
BP วิเคราะห์บน 1% ( w / v )
เจลโดยเรส