The insecticidal efficacy of B. bas

The insecticidal efficacy of B. bassiana (strain ESALQ1432)
blastospores produced under different glucose concentrations
were evaluated against the silverleaf whitefly, Bemisia tabaci
Gennadius (Hemiptera: Aleyrodidae) biotype B, also known
as Middle East-Asia Minor 1. The insect colony was
established with founders originally provided by University
of Florida, Apopka, FL. Insects were reared on cabbage cv.
‘Bravo’ (Brassica oleracea L.; Harris Seeds, Rochester, NY,
USA) and blue lake bush bean (Phaseolus vulgaris L.; Kelly
Seeds Co., Peoria, IL, USA) plants in a greenhouse. Bioassays
were performed using the ESALQ1432 isolate because the
efficacy of this fungus against whiteflies was tested in previous
studies (Mascarin et al. 2013, 2015). Samples used in
bioassays were air-dried blastospores harvested from highly
aerated liquid cultures (i.e., 50 mL liquid medium and
350 rpm) grown at different initial glucose concentrations
(40, 100, and 140 g L−1). Blastospores were assayed against
2nd instar B. tabaci nymphs feeding on the underside of primary
leaves of bean seedlings. Uniform-aged nymphs were
obtained by placing 14-day-old potted bean plants in a cage
containing the insect colony for 24 h to allow oviposition by
adults. Potted plants were removed from the colony and held
to allow nymphs to develop to the 2nd instar. Infested bean
leaves were excised from the plant and placed ventral side up
on water agar (2 %, w/v) in individual, ventilated-plastic Petri
dishes, as described in Mascarin et al. (2013, 2015). Groups of
60–70 nymphs per leaf were identified by marking them with
blue ink. Aqueous suspensions of blastospores at 1.25×107,
2.5×106, 5×105, and 2.5×105 blastospores mL−1 were prepared
in a 0.01%(v/v) Tween 80 solution and applied to insect
infested leaves to provide treatment dosages of: 2.7×104,
5.4×103, 1.1×103, and 2.2×102 blastospores cm−2, respectively.
Sprays were applied using a micro-sprayer device set
to 10 PSI (=68.95 kPa) using a 3-s application time. Control
batch of nymphs was included in each assay and sprayed with
0.01 % Tween 80 solution. Four infested leaves (replicates)
were treated with each blastospore concentration. Treated
leaves were incubated in a growth chamber set to 27±1 °C,
60–70 % RH and 14:10 h L/D photophase for 6 days prior to
assessing nymphal mortality. Nymphs killed by B. bassiana
infection were easily identified by a red pigment due to fungal
infection or by a shriveled and dehydrated appearance. The
entire experiment was repeated twice using different insect
cohorts and fungal batches freshly produced.
Appl Microbiol Biotechnol
In another experiment, we compared the speed of kill (median
survival time (ST50)) using blastospores from ESAL
Q1432 also produced in media containing 40, 100, or 140 g
glucose L−1. Blastospores from each glucose treatment were
tested on four replicate leaves. A single-dosage of 2.7×104
blastospores cm−2 was used for each treatment and then applied
to infested leaves and monitored daily throughout 6 days
incubation for mortality. This single-dosage experiment was
conducted three times using different insect cohorts and fungal
batches. Viability of blastospores were assessed before
spraying and resulted in 70–80 % germination in all cases,
after 7 h incubation in PD broth at 28 °C and 300 rpm.
Statistical analyses
All experiments were conducted using a completely randomized
design and repeated at least two times on different dates. A
linear mixed model was employed to fit experimental data for
the response variables: blastospore concentration and biomass
dry weight. Blastospore concentration was log-transformed prior
to analysis of variance to meet the normality assumptions of
the linear mixed model. In the model, the fixed effects
consisted of glucose concentration, speed of agitation, culture
medium volume, and combinations of these factors, according
to the experimental design, while the experimental repetitions
and shake flasks (experimental units repeatedly measured over
time) were included as random effects. Statistics for fixed effects
and their interaction terms were also determined by Wald
type III F test. Post-hoc pair-wise multiple comparisons were
performed using Tukey’s honestly significant difference (HSD)
test at P

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

The insecticidal efficacy of B. bassiana (strain ESALQ1432)blastospores produced under different glucose concentrationswere evaluated against the silverleaf whitefly, Bemisia tabaciGennadius (Hemiptera: Aleyrodidae) biotype B, also knownas Middle East-Asia Minor 1. The insect colony wasestablished with founders originally provided by Universityof Florida, Apopka, FL. Insects were reared on cabbage cv.‘Bravo’ (Brassica oleracea L.; Harris Seeds, Rochester, NY,USA) and blue lake bush bean (Phaseolus vulgaris L.; KellySeeds Co., Peoria, IL, USA) plants in a greenhouse. Bioassayswere performed using the ESALQ1432 isolate because theefficacy of this fungus against whiteflies was tested in previousstudies (Mascarin et al. 2013, 2015). Samples used inbioassays were air-dried blastospores harvested from highlyaerated liquid cultures (i.e., 50 mL liquid medium and350 rpm) grown at different initial glucose concentrations(40, 100, and 140 g L−1). Blastospores were assayed against2nd instar B. tabaci nymphs feeding on the underside of primaryleaves of bean seedlings. Uniform-aged nymphs wereobtained by placing 14-day-old potted bean plants in a cagecontaining the insect colony for 24 h to allow oviposition byadults. Potted plants were removed from the colony and heldto allow nymphs to develop to the 2nd instar. Infested beanleaves were excised from the plant and placed ventral side upon water agar (2 %, w/v) in individual, ventilated-plastic Petridishes, as described in Mascarin et al. (2013, 2015). Groups of60–70 nymphs per leaf were identified by marking them withblue ink. Aqueous suspensions of blastospores at 1.25×107,2.5×106, 5×105, and 2.5×105 blastospores mL−1 were preparedin a 0.01%(v/v) Tween 80 solution and applied to insectinfested leaves to provide treatment dosages of: 2.7×104,5.4×103, 1.1×103, and 2.2×102 blastospores cm−2, respectively.Sprays were applied using a micro-sprayer device setto 10 PSI (=68.95 kPa) using a 3-s application time. Controlbatch of nymphs was included in each assay and sprayed with0.01 % Tween 80 solution. Four infested leaves (replicates)were treated with each blastospore concentration. Treatedleaves were incubated in a growth chamber set to 27±1 °C,60–70 % RH and 14:10 h L/D photophase for 6 days prior toassessing nymphal mortality. Nymphs killed by B. bassianainfection were easily identified by a red pigment due to fungalinfection or by a shriveled and dehydrated appearance. Theentire experiment was repeated twice using different insectcohorts and fungal batches freshly produced.Appl Microbiol BiotechnolIn another experiment, we compared the speed of kill (mediansurvival time (ST50)) using blastospores from ESALQ1432 also produced in media containing 40, 100, or 140 gglucose L−1. Blastospores from each glucose treatment wereทดสอบบนใบไม้สี่ replicate ขนาดเดียวของ 2.7 × 104ใช้ในการรักษาแต่ละ และจากนั้น ใช้ blastospores cm−2การรบกวนออก และตรวจสอบทุกวันตลอด 6 วันคณะทันตแพทยศาสตร์สำหรับการตาย ทดลองขนาดเดียวนี้เป็นดำเนินการ 3 ครั้งใช้แตกต่างกัน cohorts แมลง และเชื้อราชุดงาน ชีวิตของ blastospores ถูกประเมินก่อนฉีดพ่น และทำให้เกิดการงอก 70 – 80% ในทุกกรณีหลังจากบ่ม 7 h ในซุป PD ที่ 28 ° C และ 300 rpmวิเคราะห์ทางสถิติการทดลองทั้งหมดได้ดำเนินการใช้ randomized สมบูรณ์ออกแบบและซ้ำน้อยสองครั้งในวันที่ต่าง ๆ Aแบบจำลองเชิงเส้นที่ผสมถูกจ้างให้เหมาะสมกับข้อมูลทดลองตัวแปรตอบสนอง: blastospore สมาธิและชีวมวลน้ำหนักแห้ง ความเข้มข้น blastospore ถูกแปลงล็อกก่อนการวิเคราะห์ผลต่างของการสมมติฐาน normality ของรุ่นผสมเชิง ในแบบจำลอง ผลกระทบถาวรประกอบด้วยน้ำตาลกลูโคสความเข้มข้น ความเร็วของอาการกังวลต่อ วัฒนธรรมระดับเสียงปานกลาง และชุดของปัจจัยเหล่านี้ ตามการทดลอง ในขณะที่การทดลองมีการทำซ้ำและเขย่าน้ำ (หน่วยทดลองซ้ำวัดเหนือเวลา) ถูกรวมเป็นลักษณะพิเศษที่สุ่ม สถิติผลถาวรและยังมีกำหนดเงื่อนไขการโต้ตอบถูก โดย Waldชนิดของการทดสอบ III F โพสต์ฮอค pair-wise เปรียบเทียบหลายดำเนินการโดยใช้ความแตกต่างของ Tukey สุจริตอย่างสำคัญ (HSD)test at P<0.05 for fixed effects and their interaction terms,while Student’s t test was used to compare only two groupsof means when necessary. These statistical analyses were performedusing the procedure MIXED in the Statistical AnalysisSystem v.9.2 (SAS Institute Inc., Cary, NC). To explain theimpact of glucose concentration on blastospore yield, empiricaldata were fitted to a logistic growth model (sigmoidal with fourparameters) according to the equation: y=y0+(a/(1+exp(−(x–x0)/b))), where y is the concentration (blastospore mL−1), x isthe glucose concentration (g L−1), and a, b, y0, and x0 areconstants estimated by the interactive analysis performed withthe software SigmaPlot 11.0 (Systat Software Inc., San Jose,CA,USA). Proportionmortality data for whitefly nymphs challengedwith strain ESALQ1432 were fitted to a logistic modelin PROBIT procedure of SAS to compute the median lethalconcentration (LC50) for each production media treatment.Mortalities for fungal treatments were automatically correctedfor control mortality in this analysis. The potency ratio test wasused to statistically compare the LC50 values at a 5 % probability(Wheeler et al. 2007). Concentration-mortality nonlinearregression curves from different glucose concentrations werestatistically compared through the sum-of-square reduction test,in which comparisons of nested models were performed bycontrasting their residual sums of squares at P<0.05 (PROC

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ประสิทธิภาพฆ่าแมลงของ B. bassiana (สายพันธุ์ ESALQ1432)
blastospores
ผลิตภายใต้ความเข้มข้นของน้ำตาลกลูโคสที่แตกต่างกันได้รับการประเมินเทียบกับแมลงหวี่ขาวsilverleaf ที่ Bemisia tabaci
Gennadius (Hemiptera: Aleyrodidae) B biotype
ยังเป็นที่รู้จักในฐานะตะวันออกกลางเอเชียไมเนอร์1.
อาณานิคมแมลงได้รับการจัดตั้งขึ้นให้กับผู้ก่อตั้งเดิมโดยมหาวิทยาลัยฟลอริด้า, โป, ฟลอริด้า
แมลงที่ถูกเลี้ยงในพันธุ์กะหล่ำปลี.
'ไชโย (Brassica oleracea L .; เมล็ดแฮร์ริสโรเชสเตอร์, นิวยอร์ก,
สหรัฐอเมริกา) และถั่วพุ่มไม้ทะเลสาบสีฟ้า (Phaseolus vulgaris L .;
เคลลี่เมล็ดพันธุ์จำกัด พีโอเรีย, อิลลินอยส์, สหรัฐอเมริกา) ในพืช เรือนกระจก bioassays
ถูกดำเนินการโดยใช้ ESALQ1432
แยกเพราะประสิทธิภาพของเชื้อรากับwhiteflies
นี้ได้รับการทดสอบก่อนหน้านี้ในการศึกษา(Mascarin et al. 2013, 2015) กลุ่มตัวอย่างที่ใช้ใน
bioassays ถูก blastospores
อากาศแห้งจากการเก็บเกี่ยวสูงวัฒนธรรมของเหลวมวลเบา(เช่น 50 มลอาหารเหลวและ
350 รอบต่อนาที) การเจริญเติบโตที่แตกต่างกันความเข้มข้นของน้ำตาลกลูโคสเริ่มต้น
(40, 100, และ 140 กรัม L-1) Blastospores ถูก assayed
กับวัย2 บีนางไม้ tabaci
กินล่างของหลักใบของต้นกล้าถั่ว นางไม้ชุดวัยถูกได้รับโดยการวาง 14 วันเก่าถั่วพืชไม้กระถางในกรงที่มีฝูงแมลงเป็นเวลา24 ชั่วโมงเพื่อให้การวางไข่โดยผู้ใหญ่ กระถางต้นไม้ที่ถูกถอดออกจากอาณานิคมและจัดขึ้นที่จะอนุญาตให้นางไม้ในการพัฒนาเพื่อวัยที่ 2 รบกวนถั่วใบถูกตัดทิ้งจากโรงงานและวางไว้หน้าท้องด้านข้างขึ้นบนวุ้นน้ำ(2% w / v) ในแต่ละการระบายอากาศพลาสติก Petri อาหารตามที่อธิบายไว้ใน Mascarin et al, (2013, 2015) กลุ่มของ60-70 นางไม้ต่อใบถูกระบุโดยการทำเครื่องหมายพวกเขาด้วยหมึกสีฟ้า สารแขวนลอยน้ำของ blastospores ที่ 1.25 × 107 2.5 × 106, 5 × 105 และ 2.5 × 105 blastospores mL-1 ได้จัดทำขึ้นใน0.01% (v / v) Tween 80 วิธีการแก้ปัญหาและนำไปใช้แมลงรบกวนใบเพื่อให้ปริมาณการรักษา: 2.7 × 104,. 5.4 × 103, 103 × 1.1 และ 2.2 × 102 ซม blastospores-2 ตามลำดับสเปรย์ถูกนำไปใช้ใช้อุปกรณ์ขนาดเล็กเครื่องพ่นสารเคมีตั้ง10 ปอนด์ต่อตารางนิ้ว (= 68.95 กิโลปาสคาล) โดยใช้เวลาในการประยุกต์ใช้ 3 s ควบคุมชุดของนางไม้ถูกรวมอยู่ในแต่ละการทดสอบและฉีดพ่นด้วย0.01% Tween 80 การแก้ปัญหา สี่ใบรบกวน (ซ้ำ) ได้รับการรักษาที่มีความเข้มข้น blastospore แต่ละ ได้รับการรักษาใบถูกบ่มในห้องตั้งเจริญเติบโตถึง 27 ± 1 องศาเซลเซียส 60-70% RH และ 14:10 ชั่วโมง L / D photophase 6 วันก่อนที่จะมีการประเมินการตายของตัวอ่อน นางไม้ฆ่าโดย B. bassiana การติดเชื้อที่ถูกระบุได้อย่างง่ายดายโดยสีแดงอันเนื่องมาจากเชื้อราติดเชื้อหรือโดยการปรากฏตัวและหดแห้ง ทดลองทั้งหมดถูกซ้ำกันสองครั้งโดยใช้แมลงที่แตกต่างกันผองเพื่อนและสำหรับกระบวนการเชื้อราสดผลิต. Appl Microbiol Biotechnol ในการทดลองอีกเราเมื่อเทียบกับความเร็วของการฆ่า (เฉลี่ยเวลาการอยู่รอด(ST50)) โดยใช้ blastospores จาก ESAL Q1432 ยังผลิตในสื่อที่มี 40, 100 หรือ 140 กรัมกลูโคสL-1 Blastospores จากกันรักษาระดับน้ำตาลได้รับการทดสอบในสี่ใบซ้ำ ปริมาณเดียว 2.7 × 104 blastospores ซม-2 ถูกนำมาใช้ในการรักษาแต่ละคนและนำไปใช้แล้วใบรบกวนและตรวจสอบทุกวันตลอด6 วันที่บ่มการเสียชีวิต การทดลองนี้ปริมาณเดียวได้รับการดำเนินการสามครั้งโดยใช้ผองเพื่อนแมลงและเชื้อราที่แตกต่างกันสำหรับกระบวนการ ชีวิตของ blastospores มีการประเมินก่อนที่จะฉีดพ่นและส่งผลให้เกิดการงอก70-80% ในทุกกรณีหลังจากการบ่ม7 ชั่วโมงในน้ำซุปพีวันที่ 28 ° C และ 300 รอบต่อนาที. สถิติวิเคราะห์การทดลองทั้งหมดถูกดำเนินการโดยใช้แบบสุ่มสมบูรณ์การออกแบบและการทำซ้ำอย่างน้อยสองครั้งในวันที่แตกต่างกัน รูปแบบผสมเชิงเส้นถูกจ้างมาเพื่อให้พอดีกับข้อมูลการทดลองสำหรับตัวแปรตอบสนองความเข้มข้น blastospore ชีวมวลและน้ำหนักแห้ง ความเข้มข้น Blastospore ถูกเปลี่ยนเข้าสู่ระบบก่อนที่จะวิเคราะห์ความแปรปรวนเพื่อตอบสนองสมมติฐานปกติของรูปแบบผสมเชิงเส้น ในรูปแบบผลกระทบคงที่ประกอบไปด้วยความเข้มข้นของกลูโคสความเร็วในการกวนวัฒนธรรมเสียงปานกลางและการรวมกันของปัจจัยเหล่านี้เป็นไปตามการออกแบบการทดลองในขณะที่การเกิดซ้ำการทดลองและเขย่าขวด(หน่วยทดลองวัดซ้ำแล้วซ้ำอีกในช่วงเวลา) ถูกรวมเป็น ผลกระทบแบบสุ่ม สถิติสำหรับผลกระทบคงที่และเงื่อนไขการทำงานร่วมกันของพวกเขาได้รับการพิจารณาโดย Wald ประเภทที่สามการทดสอบ F post-hoc คู่ฉลาดเปรียบเทียบหลายได้รับการดำเนินการโดยใช้ของTukey ความแตกต่างกันตรงไปตรงมา (HSD) การทดสอบที่ P <0.05 สำหรับผลกระทบและเงื่อนไขการปฏิสัมพันธ์คงที่ในขณะที่การทดสอบค่าทีนักศึกษาที่ถูกใช้ในการเปรียบเทียบเพียงสองกลุ่มหมายถึงเมื่อมีความจำเป็น การวิเคราะห์ทางสถิติเหล่านี้ได้ดำเนินการใช้วิธีการผสมในการวิเคราะห์ทางสถิติระบบv.9.2 (SAS Institute Inc. ซึ่งนิวเคลียส NC) ในการอธิบายผลกระทบของความเข้มข้นของกลูโคสต่อผลผลิต blastospore, เชิงประจักษ์ข้อมูลพอดีกับรูปแบบการเจริญเติบโตของโลจิสติก(sigmoidal กับสี่พารามิเตอร์) ตามสมการ Y = y0 + (ก / (1 ​​+ exp (- (x- x0) / b ))) โดยที่ y คือความเข้มข้น (blastospore mL-1) x มีความเข้มข้นของน้ำตาลกลูโคส(ช L-1) และ b, y0 และ x0 มีค่าคงที่ประมาณโดยการวิเคราะห์แบบโต้ตอบดำเนินการกับซอฟต์แวร์SigmaPlot 11.0 (ซิสแตทฟแวร์อิงค์, San Jose, CA, USA) ข้อมูล Proportionmortality สำหรับนางไม้แมลงหวี่ขาวท้าทายกับความเครียดESALQ1432 พอดีเป็นรูปแบบโลจิสติกในขั้นตอนprobit ของ SAS เพื่อคำนวณเฉลี่ยตายเข้มข้น(LC50) สำหรับการผลิตสื่อการรักษาแต่ละ. ตายสำหรับการรักษาเชื้อราได้รับการแก้ไขโดยอัตโนมัติสำหรับการตายการควบคุมในการวิเคราะห์นี้ การทดสอบอัตราส่วนแรงที่ถูกใช้ในการเปรียบเทียบทางสถิติค่า LC50 ที่น่าจะเป็น 5% (ล้อ et al. 2007) ความเข้มข้นการตายไม่เป็นเชิงเส้นโค้งการถดถอยจากความเข้มข้นของน้ำตาลกลูโคสที่แตกต่างกันเมื่อเทียบสถิติผ่านsum-of-ตารางการทดสอบลดลงซึ่งในการเปรียบเทียบของรุ่นที่ซ้อนกันดำเนินการโดยตัดกันจำนวนเงินที่เหลือของพวกเขาของสี่เหลี่ยมที่P <0.05 (PROC

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ประสิทธิภาพสารกำจัดแมลงของ bassiana ( สายพันธุ์ esalq1432 )
blastospores ผลิตภายใต้แตกต่างกันความเข้มข้นกลูโคส
ประเมินกับซิลเวอร์ลิฟแมลงเชื้อรา tabaci
gennadius ( อันดับ Hemiptera : aleyrodidae ) ไบโอไทป์ B ที่เรียกว่า
เป็นตะวันออกกลางเอเชียรอง 1 แมลงอาณานิคมถูกจัดตั้งขึ้นโดยผู้ก่อตั้งเดิม

ของมหาวิทยาลัยฟลอริดา apopka , ฟลอริด้า .แมลงกลุ่มพันธุ์กะหล่ำปลี .
'bravo ' ( Brassica oleracea L . ; แฮร์ริสเมล็ด , Rochester , NY ,
สหรัฐอเมริกา ) และถั่วพุ่มทะเลสาบสีฟ้า ( phaseolus vulgaris L ; เคลลี่
เมล็ด Co . , พีโอเรีย , IL , USA ) พืชในเรือนกระจก การใช้ esalq1432 ละเอียด

แยกเพราะประสิทธิภาพของเชื้อรานี้กับ whiteflies การทดสอบก่อนเรียน (
mascarin et al . 2013 2015 )
ตัวอย่างที่ใช้ในละเอียดแห้ง blastospores จากการเก็บเกี่ยวสูง
5 วัฒนธรรมของเหลว ( เช่น 50 ml อาหารเหลวและ
350 รอบต่อนาที ) ปลูกที่แตกต่างกันเริ่มต้น กลูโคสความเข้มข้น
( 40 , 100 , 140 g L − 1 ) blastospores ถูก assayed กับ
2 B . tabaci นางไม้วัยให้อาหารบนด้านล่างของประถม
ใบถั่ว ต้นกล้า เครื่องแบบอายุนางไม้เป็น
ได้โดยการวางกระถาง 14 วันเก่าถั่วพืชในกรง
ที่มีรังแมลงสำหรับ 24 ชั่วโมง เพื่อให้วางไข่โดย
ผู้ใหญ่ พืชในกระถางออกจากอาณานิคมและจัดขึ้น
ให้นางไม้พัฒนาถึงระยะที่ 2 เหม็นถั่ว
ใบตัดจากโรงงาน และวางไว้ข้างล่างขึ้นบนน้ำวุ้น ( 2
% w / v ) ในแต่ละจาน Petri
แกลลอนพลาสติกตามที่อธิบายไว้ใน mascarin et al . ( 2013 2015 ) กลุ่มของ
60 – 70 นางไม้ต่อใบนั้นระบุเครื่องหมาย
หมึกสีฟ้า แขวนลอยน้ำ blastospores 1.25 × 2 × 106 107 ,
5 × 105 2.5 × 105 blastospores ml − 1 เตรียม
ใน 0.01 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) Tween 80 และโซลูชั่นที่ใช้กับแมลง
รบกวนใบให้การรักษาขนาดของ : 2.7 × 104 ,
4 × 103 1.1 × 103 , และ 22 × 102 blastospores cm − 2 ตามลำดับ
สเปรย์ไปใช้กับอุปกรณ์ฉีดไมโครชุด
10 PSI ( = 68.95 kPa ) โดยใช้ 3-s โปรแกรมเวลา การควบคุม
ชุดนางไม้อยู่ในแต่ละการทดสอบ และฉีดพ่นด้วย
0.01 เปอร์เซ็นต์ Tween 80 วิธี 4 รบกวนใบ ( ซ้ำ )
) ทำให้แต่ละเป้าหมายความเข้มข้น ใบถือว่าอยู่ในช่วงบ่ม
ห้องตั้ง 27 ± 1 ° C ,
60 - 70 เปอร์เซ็นต์ และถ้ามี H L / D photophase 6 วันก่อน
การประเมินระยะตัวอ่อนทารกในครรภ์ นางไม้ฆ่าโดยการติดเชื้อ B . bassiana
ถูกได้อย่างง่ายดายระบุเป็นรงควัตถุสีแดงจากเชื้อรา
หรือโดยแห้งเหี่ยวและลักษณะขาดน้ำ
การทดลองทั้งหมดทำซ้ำสองครั้งโดยใช้แมลงและเชื้อราต่าง ๆผองเพื่อน

App ใหม่ๆ กระบวนการผลิต ธนิดา เหรียญทอง B Sc biotechnol
ในการทดลองอื่น