under the presence of extracts. Lower absorbance of the reaction
mixture indicates higher free RSA (Lee et al., 2003).
2.5. ABTS RSA
The determination of the ABTS RSAwas performed as described
by Muller (1985). Extracts (0.1 mL), potassium phosphate buffer
(0.1 mL, 0.1 mol/L, pH 5.0), and hydrogen peroxide (20 mL, 10 mmol/
L) were mixed and pre-incubated at 37 C for 5 min. After preincubation,
ABTS (30 mL, 1.25 mmol/L, in 0.05 mol/L phosphatecitrate
buffer, pH 5.0) and peroxidase (30 mL, 1 unit/mL) were
added to the mixture and then it was incubated at 37 C for 10 min.
The OD value of mixture was measured by a multiplate reader
(Sunrise RC/TS/TS Color-TC/TW/BC/6Filter, Tecan Austria GmbH,
Gr4dig, Austria) at 405 nm against a blank. L-ascorbic acid were
used as positive controls and all tests were carried out in triplicate,
and the ABTS RSA was calculated by the following formula:
ภายใต้สถานะของสารสกัดจาก Absorbance ล่างของปฏิกิริยาผสมบ่งชี้สูงฟรี RSA (Lee et al., 2003)2.5 การรเรียน RSAกำหนด RSAwas รเรียนทำดังที่โดยมูลเลอร์ (1985) สารสกัด (0.1 มล.), โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์(0.1 mL, 0.1 โมล/L ค่า pH 5.0), และไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ (20 mL, 10 mmol /L) ถูกผสม และ incubated ก่อนที่ 37 C สำหรับ 5 นาที หลังจาก preincubationรเรียน (30 mL, 1.25 mmol/L ใน 0.05 โมล/L phosphatecitrateบัฟเฟอร์ ค่า pH 5.0) และ peroxidase (30 mL, 1 หน่วย/มล)เพิ่มส่วนผสมแล้ว ก็มี incubated ที่ 37 C สำหรับ 10 นาทีมีวัดค่า OD ของส่วนผสม โดยอ่าน multiplate(พระอาทิตย์ขึ้น RC/TS/สี TS-TC/ผู้ ที่ ใช้/BC/6Filter, Tecan GmbH ประเทศออสเตรียGr4dig ออสเตรีย) ที่ 405 nm กับช่องว่าง มีกรดแอสคอร์บิค Lใช้เป็นตัวควบคุมบวกและทดสอบทั้งหมดได้ดำเนินการ triplicateและ RSA รเรียนถูกคำนวณ โดยใช้สูตรต่อไปนี้:
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภายใต้การปรากฏตัวของสารสกัดจาก การดูดกลืนแสงที่ลดลงของการเกิดปฏิกิริยา
ส่วนผสมบ่งชี้อาร์เอสฟรีที่สูงขึ้น (Lee et al., 2003).
2.5 ABTS อาร์เอส
มุ่งมั่นของ ABTS RSAwas ดำเนินการตามที่อธิบายไว้
โดยมุลเลอร์ (1985) สารสกัดจาก (0.1 มิลลิลิตร), ฟอสเฟตบัฟเฟอร์โพแทสเซียม
(0.1 มิลลิลิตร 0.1 โมล / ลิตรค่า pH 5.0) และไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ (20 มล, 10 mmol /
L) ได้รับการผสมและ pre-บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที หลังจาก preincubation,
ABTS (30 มิลลิลิตร 1.25 mmol / L ใน 0.05 mol / L phosphatecitrate
บัฟเฟอร์ pH 5.0) และ peroxidase (30 มิลลิลิตร 1 หน่วย / มิลลิลิตร) ได้
เพิ่มส่วนผสมและจากนั้นก็ถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสสำหรับ 10 นาที.
ค่า OD ของส่วนผสมที่ถูกวัดโดยผู้อ่าน multiplate
(Sunrise RC / TS / TS สี-TC / TW / BC / 6Filter, Tecan Austria GmbH,
Gr4dig, ออสเตรีย) ที่ 405 นาโนเมตรกับว่างเปล่า L-ascorbic acid ถูก
นำมาใช้เป็นตัวควบคุมในเชิงบวกและการทดสอบทั้งหมดได้ดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า
และ ABTS อาร์เอสที่คำนวณได้จากสูตรต่อไปนี้:
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภายใต้สถานะของสารสกัด ลดการดูดกลืนแสงของปฏิกิริยา
ผสมแสดงที่สูงฟรี RSA ( ลี et al . , 2003 ) .
2.5 Abbr RSA
ความตั้งใจของ Abbr rsawas ดำเนินการตามที่อธิบายไว้
โดย มุลเลอร์ ( 1985 ) สารสกัด ( 0.1 ml ) , โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์
( 0.1 ml 0.1 โมลต่อลิตร pH 5.0 ) และไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ ( 20 มิลลิลิตร , 10 mmol /
L ) ผสมก่อนบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที หลังจากพบ
,Abbr ( 30 ml 1.25 mmol / L , 0.05 mol / l phosphatecitrate
บัฟเฟอร์ pH 5.0 ) และเปอร์ออกซิเดส ( 30 มล. 1 หน่วย / มิลลิลิตร
เพิ่มการผสมแล้วมันก็บ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที
ค่า OD ของส่วนผสมที่ถูกวัดด้วยเครื่องอ่าน multiplate
( พระอาทิตย์ขึ้น RC / TS / TS สี TC / TW / พ.ศ. / 6filter TECAN Austria GmbH , ,
gr4dig ออสเตรีย ) ที่ 405 nm กับว่างเปล่า L-Ascorbic Acid คือ
ใช้เป็นตัวควบคุมบวกและการทดสอบทั้งหมดได้ดำเนินการทั้งสามใบ
, และ Abbr RSA ถูกคำนวณโดยสูตรต่อไปนี้ :
การแปล กรุณารอสักครู่..