Determination of the anthocyanin pa

Determination of the anthocyanin pathway branches active in
Macaronesian Lotus
In order to further explore the activity of the anthocyanin pathway,
and its different branches in this group during flower color
transitions, we analyzed the expression of six structural genes of
the flavonoid pathway using semi-quantitative reverse transcriptase
PCR (RT-PCR). Gene expression comparisons in mature flowers
(stage 13) at two sampling points (prechange and postchange
when applicable) were carried out in five species: Lotus japonicus
(which does not change color), its close relative Lotus filicaulis (Lotus
section Lotus), L. sessilifolius var. pentaphyllus (section Pedrosia,
closely related to the putatively bird-pollinated group, and with
red postchange flowers), and two species from the putatively
bird-pollinated (“rhyncholotus group”): L. berthelotii (with red
flowers) and L. maculatus (yellow/orange flowers). For the focal
species, L. berthelotii, L. maculatus and L. sessilifolius, we analyzed
two replicates for each species from a pool of flowers from the
same individual. All flower tissue was collected between 9:00 am
and 11:00 am on the same day, immediately placed in liquid nitrogen
and stored in -80 ◦C until further RNA extraction. All plants
of the five species for this study were cultivated at the University
of British Columbia (UBC) experimental glasshouse under similar
conditions (20–25 ◦C) in pots of 10–20 cm in diameter and were
more than 6 weeks old when flowers were collected for analyses.
All species were propagated from seeds, except L. maculatus and
L. berthelotii, which were purchased from commercial nurseries
in Vancouver, Canada. They were grown under the same environmental
conditions as the three bee-pollinated species mentioned
above, except for the provision of a vernalization period of 30 days
in order to induce flowering. Seeds of L. sessilifolius var. pentaphyllus
were collected from the field in Playa San Juan Guía de Isora,
Tenerife in 2008. Flower material was also collected from cultivated
plants of L. berthelotii and L. maculatus in the “Jardin Canario
Viera y Clavijo” following the procedure described above. For those
species with a flower color change, RNA was extracted from the
same developmental stage (stage 13) when flowers are just open
and without color changes (prechange) and also just after flowers
commence visible color modification (postchange). Details of the
floral developmental stages are published elsewhere (Ojeda et al.,
2012a,b). Each type of petal (standard, wings, keel) was collected
and analyzed separately in all the five species described above.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ความมุ่งมั่นของสาขาทางเดิน anthocyanin ใช้งานใน

macaronesian บัวเพื่อต่อไปสำรวจการทำงานของทางเดิน anthocyanin,
และสาขาที่แตกต่างกันในกลุ่มนี้ในช่วงดอกไม้สี
เปลี่ยนเราวิเคราะห์การแสดงออกของยีนที่หกโครงสร้างของ
flavonoid ทางเดินโดยใช้ transcriptase
pcr กึ่งเชิงปริมาณย้อนกลับ (RT-PCR)การเปรียบเทียบการแสดงออกของยีนในดอกไม้ผู้ใหญ่
(ขั้นตอนที่ 13) ที่สองจุดเก็บตัวอย่าง (prechange และ postchange
เมื่อสามารถใช้งานได้) มีการดำเนินการในห้าชนิด: บัว japonicus
(ซึ่งไม่เปลี่ยนสี) ใกล้ filicaulis ญาติของบัว (บัว
ส่วน บัว) ลิตร sessilifolius var pentaphyllus (pedrosia ส่วน
เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดกับกลุ่มนกเรณูสมมุติและมี
ดอกไม้ postchange สีแดง) และทั้งสองสายพันธุ์จากสมมุติ
นกเรณู ("กลุ่ม rhyncholotus") ต่อลิตร berthelotii (มีสีแดง
ดอกไม้) และลิตร maculatus (ดอกไม้สีเหลือง / ส้ม) สำหรับโฟกัส
ชนิดลิตร berthelotii, ลิตร maculatus และลิตร sessilifolius เราวิเคราะห์
สองซ้ำสำหรับแต่ละสายพันธุ์จากสระว่ายน้ำของดอกไม้จาก
บุคคลเดียวกัน เนื้อเยื่อดอกไม้ทั้งหมดถูกเก็บรวบรวมระหว่าง 09:00
11:00 น. ในวันเดียวกันนั้นวางไว้ในไนโตรเจนเหลว
และเก็บไว้ในค -80 ◦จนการสกัดอาร์เอ็นเอต่อไป
พืชทั้งหมดของห้าชนิดสำหรับการศึกษานี้ได้รับการเพาะปลูกที่มหาวิทยาลัย
บริติชโคลัมเบีย (ยูบีซี) เรือนกระจกภายใต้การทดลองที่คล้ายกัน
เงื่อนไข (20-25 ◦ค) ในกระถาง 10-20 ซม. ในเส้นผ่าศูนย์กลางและ
เกิน 6 สัปดาห์เมื่อเก็บดอกไม้สำหรับการวิเคราะห์
.ทุกชนิดได้รับการขยายพันธุ์จากเมล็ดยกเว้นลิตร maculatus และ l
berthelotii ซึ่งถูกซื้อมาจากสถานรับเลี้ยงเด็กในเชิงพาณิชย์
ในแวนคูเวอร์ พวกเขาได้เติบโตขึ้นภายใต้สภาพแวดล้อม
เช่นเดียวกับสามชนิดผึ้งเรณูกล่าวถึง
ข้างต้นยกเว้นสำหรับการให้ระยะเวลา vernalization 30 วัน
เพื่อที่จะก่อให้เกิดการออกดอก เมล็ดพันธุ์แห่งลิตร sessilifolius var pentaphyllus
ถูกเก็บรวบรวมจากสนามใน playa san juan guía de Isora, เทเนรีฟ
ในปี 2008 วัสดุดอกไม้ยังเป็นที่เก็บรวบรวมมาจากการเพาะปลูกพืช
ลิตร berthelotii และลิตร maculatus ใน "jardin Canario
Viera Clavijo y" ตามขั้นตอนที่อธิบายข้างต้น สำหรับผู้ที่มีสายพันธุ์
เปลี่ยนสีดอกไม้, RNA ถูกสกัดจาก
เดียวกันขั้นตอนการพัฒนา (เวที 13) เมื่อดอกไม้เป็นเพียงเปิด
และไม่มีการเปลี่ยนแปลงสี (prechange) และยังหลังดอก
เริ่มการปรับเปลี่ยนสีที่มองเห็น (postchange) รายละเอียดของขั้นตอนการพัฒนา
ดอกไม้ที่ตีพิมพ์อื่น ๆ (โอเจเอตอัล.
2012a, b) ชนิดของกลีบ (มาตรฐานปีกกระดูกงู) แต่ละคนถูกเก็บรวบรวมและวิเคราะห์
แยกต่างหากในทุกห้าชนิดที่อธิบายข้างต้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กำหนดทางเดินมีโฟเลทสูงสาขางาน
Macaronesian Lotus
เพื่อสำรวจกิจกรรมของทางเดินมีโฟเลทสูง,
และสาขาอื่นในกลุ่มนี้ระหว่างดอกไม้สี
เปลี่ยน เราวิเคราะห์นิพจน์ของหกโครงสร้างยีนของ
ทางเดิน flavonoid ที่ใช้เชิงกึ่งปริมาณกลับ transcriptase
PCR (RT-PCR) ยีนเปรียบเทียบนิพจน์ใน
(stage 13) ดอกไม้ผู้ใหญ่จุดสุ่มตัวอย่างสอง (prechange และ postchange
เมื่อใช้) ได้ดำเนินการใน 5 ชนิด: japonicus โลตัส
(ที่ไม่เปลี่ยนสี), filicaulis บัวญาติของปิด (โลตัส
ส่วนโลตัส), L. sessilifolius เพียง pentaphyllus (ส่วน Pedrosia,
เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิด กับกลุ่ม putatively นก pollinated และด้วย
postchange ดอกไม้สีแดง), และชนิดที่สองจาก putatively
pollinated นก ("rhyncholotus กลุ่ม"): L. berthelotii (มีสีแดง
ดอกไม้) และ L. maculatus (ดอกไม้เหลือง) สำหรับการโฟกัส
พันธุ์ L. berthelotii, L. maculatus และ L. sessilifolius เราวิเคราะห์
2 เหมือนกับในแต่ละสายพันธุ์จากกลุ่มของดอกไม้จากการ
บุคคลเดียวกัน เนื้อเยื่อของดอกไม้ทั้งหมดรวบรวมไว้ระหว่าง 9:00 am
และ 11:00 น.ในวันเดียว วางไว้ในไนโตรเจนเหลวทันที
และเก็บไว้ใน-80 ◦C จนสกัดอาร์เอ็นเอเพิ่มเติม พืชทั้งหมด
พันธุ์ห้าสำหรับการศึกษานี้ได้ปลูกที่มหาวิทยาลัย
ของบริติชโคลัมเบีย (UBC) กลาสเฮ้าส์ทดลองภายใต้คล้าย
เงื่อนไข (20-25 ◦C) ในกระถางเส้นผ่าศูนย์กลาง 10–20 ซม. และถูก
มากกว่า 6 สัปดาห์เมื่อมีการเก็บรวบรวมดอกไม้สำหรับวิเคราะห์
สปีชีส์ทั้งหมดเผยแพร่จากเมล็ด ยกเว้น L. maculatus และ
L. berthelotii ซึ่งซื้อจากลอรี่ค้า
ในแวนคูเวอร์ แคนาดา พวกเขาถูกพัฒนาภายใต้เดียวกันสิ่งแวดล้อม
เงื่อนไขเป็นสายสาม pollinated ผึ้งพันธุ์กล่าวถึง
ยกเว้นข้างต้น สำหรับบทบัญญัติของ vernalization ระยะเวลา 30 วัน
เพื่อก่อให้เกิดดอก เมล็ดของ L. sessilifolius เพียง pentaphyllus
รวบรวมได้จากฟิลด์ในญ่าซานฮวน Guía de Isora,
ฟในปี 2008 ดอกไม้วัสดุยังรวบรวมไว้จาก cultivated
พืช L. berthelotii และ L. maculatus ใน " Canario จาร์ดีน
Viera y Clavijo " ขั้นตอนที่อธิบายไว้ข้างต้น สำหรับ
ชนิด มีการเปลี่ยนสีของดอกไม้ อาร์เอ็นเอที่สกัดจาก
ขั้นพัฒนาเดียวกัน (ขั้นตอนที่ 13) เมื่อมีการเปิดเพียงดอกไม้
และไม่มีสีเปลี่ยนแปลง (prechange) และยัง เพิ่งหลังดอกไม้
เริ่มปรับเปลี่ยนการมองเห็นสี (postchange) รายละเอียดของการ
ดอกไม้ขั้นพัฒนาเผยแพร่อื่น ๆ (Ojeda et al.,
2012a, b) รวบรวมไว้แต่ละชนิดของกลีบดอกไม้ (มาตรฐาน ปีก keel)
และวิเคราะห์แยกต่างหากในชนิดห้าทั้งหมดที่อธิบายข้างต้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การกำหนดเส้นทาง anthocyanin สาขาที่ใช้งานอยู่ใน
macaronesian Lotus Notes
ซึ่งจะช่วยในการสั่งซื้อเพื่อดูข้อมูลการทำงานของทางเดิน anthocyanin ที่
และสาขาอื่นในกลุ่มนี้ในระหว่างสีดอกไม้
การเปลี่ยนแปลงเราจะวิเคราะห์การแสดงออกของยีนโครงสร้างของทางเดิน flavonoid
ซึ่งจะช่วยให้การใช้ transcriptase แบบกึ่งในเชิงปริมาณย้อนกลับ
pcr ( RT - pcr )ยีนการแสดงการเปรียบเทียบในที่สุกงอมเต็มที่ดอกไม้
(เวที 13 )ที่สองการสุ่มตัวอย่างจุด( prechange และ postchange
เมื่อที่มีผลบังคับ)ได้ถูกออกมาใน 5 สายพันธุ์: Lotus japonicus
(ซึ่งจะไม่เปลี่ยนสี),ของโรงแรมที่อยู่ใกล้กับ Lotus filicaulis ( Lotus
มาตรา Lotus ),แอล sessilifolius var. pentaphyllus (มาตรา pedrosia ,
อย่างใกล้ชิดที่เกี่ยวข้องกับที่ลับๆนก - ปลูกพืชกลุ่มและพร้อมด้วย
สีแดง postchange ดอกไม้)และสองสายพันธุ์จากลับๆ
นก - ปลูกพืช("กลุ่ม rhyncholotus ”) L . berthelotii (พร้อมด้วยดอกไม้สีแดง
)และแอล. maculatus (ดอกไม้สีส้มสีเหลือง/). สำหรับจุดสำคัญ
สายพันธุ์แอลแอล berthelotii maculatus และแอล. sessilifolius ที่เราวิเคราะห์
สองหาดจอมเทียนสำหรับแต่ละสายพันธุ์จากสระน้ำของดอกไม้จากบุคคล
เดียวกัน เนื้อเยื่อดอกไม้ทั้งหมดถูกเก็บรวบรวมระหว่าง 09:00 น.
ตามมาตรฐานและ 11:00 น.ในวันเดียวกันทันทีวางไว้ในไนโตรเจนเหลว
และจัดเก็บไว้ใน -80 ◦c จนกว่าการขุด rna เพิ่มเติม ห้องพักทั้งหมดมีพันธุ์ไม้
ของที่ห้าสายพันธุ์เพื่อการศึกษานี้มีเนื้อที่ที่มหาวิทยาลัย
ของบริติชโคลัมเบีย(ยูบีซี)ทดลองรับชม Glasshouse ภายใต้ ความเหมือน
เงื่อนไข( 20 - 25 ◦c )ในหม้อของ 10 - 20 ซม.ในเส้นผ่านศูนย์กลางและ
ซึ่งจะช่วยได้มากกว่า 6 สัปดาห์เมื่อมีดอกไม้จัดเก็บสำหรับการวิเคราะห์.
สายพันธุ์ต่างๆทั้งหมดก็ถูกส่งไปจากเมล็ดพันธุ์ยกเว้น berthelotii
และ L maculatus แอลซึ่งได้ซื้อจากสถานรับเลี้ยง
ทางการค้าใน Vancouver , Canada พวกเขาได้เติบโต ภายใต้ เงื่อนไขเดียวกัน
ซึ่งจะช่วยรักษาสิ่งแวดล้อมที่เป็นสายพันธุ์สามผึ้ง - ปลูกพืชที่ได้กล่าวมาแล้วข้างต้น
ซึ่งจะช่วยยกเว้นสำหรับการจัดให้มีช่วงเวลา vernalization ของ 30 วันนับแต่วัน
ซึ่งจะช่วยในการทำให้ดอกไม้ เมล็ดพันธุ์ของแอล. sessilifolius pentaphyllus var.
จะถูกรวบรวมจากฟิลด์ที่อยู่ใน Playa San Juan de Isora อยู่บน guía
Tenerife ในปี 2008 วัสดุดอกไม้ถูกเก็บรวบรวมจากปลูกพันธุ์ไม้ต่างๆของ berthelotii
และ L . L maculatus ใน" Jardin canario Y clavijo
The Viera "ต่อไปนี้ตามขั้นตอนที่อธิบายไว้ข้างต้น สำหรับผู้ที่
สายพันธุ์พร้อมด้วยการเปลี่ยนสีดอกไม้ที่ rna ได้ถูกแยกออกมาจากเวที
เหมือนกับการพัฒนาการ(เวที 13 )เมื่อดอกไม้จะเปิดให้บริการเพียง
และไม่มีการเปลี่ยนแปลงสี( prechange )และนอกจากนั้นยังอยู่หลังจากการปรับเปลี่ยนเริ่มแสดงสีดอกไม้
( postchange ) รายละเอียดของขั้นตอนการพัฒนาการจัดดอกไม้ที่มี
ซึ่งจะช่วยเผยแพร่ในที่อื่นๆ( ojeda et al .
2012 B ) แต่ละ ประเภท ของรูปกลีบดอกไม้ห้ากลีบสัมผัส(แบบมาตรฐานปีกกระดูกงูเรือ)ถูกเก็บรวบรวม
และวิเคราะห์แยกต่างหากในห้าสายพันธุ์ที่ทั้งหมดที่อธิบายไว้ข้างต้น