2.3 Secondary screening and product

2.3 Secondary screening and production
of cellulase enzyme:
The potential isolates were then evaluated for
enzyme productivity. Those isolates showing
maximum cellulase production were then
considered for the further study.
Universal Journal of Environmental Research and Technology
41
Shaikh et al.
2.3.1 Submerge Fermentation process:
For preparation of standard inoculum, those
isolates showed a maximum zone of hydrolysis
were cultured in 20 ml inoculum
medium[composition (g/l):
Carboxymethylcellulose (CMC) 5; Tryptone 2;
KH
2PO
4
4; Na
2HPO44; MgSO
4
.7H2O0.2; CaCl2
.2H2O
0.001; FeSO
4
.7H2O 0.004 and pH adjusted to 7]
individually and incubated at 37 ºC for 24 h where
an average viable count of 2-3.5x10
6
cells /ml
culture was obtained. This was used as inoculum
for the production medium.The composition of
production medium was same as of inoculum
medium except the concentration of
Carboxymethyl cellulose which was 1% instead of
0.5%.
Fermentation was carried out in 250 ml
Erlenmeyer flasks, each containing 100 ml sterile
production medium and inoculated with 5% of
standard inoculums (containing 2-3.5x10
6
cells
/ml). The flasks were incubated at 37
0
C on a rotary
shaker at 150 RPM for 72h.
2.3.2 Preparation of crude enzyme:
After incubation, the cultures were centrifuged at
1600 RPM for 20 min at 4°C and supernatant was
used as a source of crude enzyme. The crude
enzyme solution was utilized for determination of
enzyme activities.
2.4 Cellulase enzyme assay:
Carboxymethylcellulase( CMCase) activity was
estimated using a 1 % solution of
carboxymethlycellulose (CMC) in 0.05 M citrate
buffer (pH 4.8) as substrate. The reaction mixture
contained 1 ml citrate buffer, 0.5 ml of substrate
solution and 1ml of crude enzyme solution. The
reaction was carried out at 45°C for 30 min. The
amount of reducing sugar released in the
hydrolysis was measured by DNSA method.The
Enzyme unit (EU) was determine as the amount of
CMCase required to release 1μmole of reducing
sugar per ml per minute under above assay
condition.
2.5 Protein determination:
Protein concentrations in a crude sample were
determined by using a Folin Lowry method (Lowry
et.al.,1951) with bovine serum albumin (BSA) as a
standard.
2.6 Partial purification of cellulase
enzyme:
2.6.1 Ammonium sulfate precipitation:
About 20 ml of the crude enzyme solution was
saturated by solid ammonium sulfate and the
mixture was left overnight at 4
0
C for precipitation
(Lee et.al.,2008). The precipitates were collected
by centrifugation and dissolved in 10 ml of 50 mM
sodium acetate buffer (pH 5.5).
2.6.2 Dialysis:
For partial purification, enzyme collected after
ammonium sulfate precipitation was dialyzed
against 30mM sodium acetate buffer (pH-5.5) at
4ºC with three changes of buffer (Lee et.al.,2008).
The partially purified sample was assayed for
enzyme activity and protein content.
2.7 Identification of cellulase producing
bacteria:
Potential isolates were tentatively identified by
means of morphological, cultural and biochemical
characterization.
2.7.1 Morphological characterization:
For morphological characterization colonies were
stained by Gram’s staining technique and for
suspected isolates special staining was also
performed included capsule staining and
endospore staining. Motility test was also
performed.
2.7.2 Cultural characterization:
The pure culture of individual isolates were further
characterized, on the basis of their Gram’s
reactivity individual isolate was passed on Nutrient
agar and Mac Conkey’s agar plate and then on
special media. After incubation colony
characteristics were noted.
2.7.3 Biochemical characterization:
Different biochemical tests were analyzed included
Indole test, Methyl red test, Vogues-Proskauer
test, Citrate utilization test, starch hydrolysis,
gelatin liquefaction, nitrate reduction, Catalase
test, Oxidase test, phenylalanine deamination and
sugars fermentation test.
2.8 Optimization of cellulase production:
The optimum parameters were determined for
cellulase production from the efficient isolates.
The cellulase fermentation was carried out at
different ranges of parameters included
temperature, pH, incubation period, substrate
concentration and inoculums size. After
fermentation at different parameters the crude
enzyme sample was collected from each to check
the enzyme activity.
2.8.1 Effect of temperature:
To determine the optimum temperature for
cellulase production, fermentation was carried out
at various temperatures in the range of 25ºC,
35ºC, 45ºC, 55ºC and 65ºC.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3 รองคัดกรองและผลิต
ของเอนไซม์ cellulase:
แยกอาจเกิดขึ้นได้แล้วประเมิน
ผลิตเอนไซม์ ที่แยกแสดง
cellulase สูงผลิตได้แล้ว
พิจารณาสำหรับการศึกษาเพิ่มเติม
สมุดสากลวิจัยสิ่งแวดล้อมและเทคโนโลยี
41
เชค et al.
2.3.1 จมลงใต้น้ำหมัก:
สำหรับการเตรียม inoculum มาตรฐาน เหล่า
แยกแสดงโซนสูงสุดของไฮโตรไลซ์
มีอ่างใน 20 ml inoculum
กลาง [องค์ประกอบ (g/l):
Carboxymethylcellulose (CMC) 5 Tryptone 2
KH
2PO
4
4 นา
2HPO44 MgSO
4
.7H2O0.2 CaCl2
.2H2O
0.001 FeSO
4
.7H2O 0.004 และค่า pH ปรับปรุง 7]
ที และ incubated ที่ 37 ºC ใน 24 h ที่
การนับได้เฉลี่ย 2-3.5 x 10
6
เซลล์ /ml
วัฒนธรรมกล่าว นี้ใช้เป็น inoculum
สำหรับผลิตสื่อการองค์ประกอบของ
สื่อผลิตเดียวกัน ณ inoculum
ปานกลางยกเว้นความเข้มข้นของ
Carboxymethyl เซลลูโลสซึ่ง 1% แทน
0.5%
หมักถูกดำเนินใน 250 ml
Erlenmeyer น้ำ แต่ละที่มี 100 ml ใส่
ผลิตปานกลาง และ inoculated ด้วย 5%
inoculums มาตรฐาน (ประกอบด้วย 2-3.5 x 10
6
เซลล์
/ ml) น้ำมี incubated ที่ 37
0
C ในแบบโรตารี่
เชคเกอร์ที่ 150 RPM สำหรับ 72h
2.3.2 การเตรียมเอนไซม์ดิบ:
หลังจากบ่ม วัฒนธรรมถูก centrifuged ที่
1600 RPM สำหรับ 20 นาทีที่ 4° C และ supernatant ถูก
ใช้เป็นแหล่งของเอนไซม์ดิบ ดิบ
โซลูชันเอนไซม์ถูกใช้สำหรับการกำหนด
กิจกรรมเอนไซม์
วิเคราะห์เอนไซม์ Cellulase 2.4:
Carboxymethylcellulase (CMCase) กิจกรรมถูก
ประเมินโดยใช้โซลูชั่น 1% ของ
carboxymethlycellulose (CMC) ในซิเตรต 0.05 M
บัฟเฟอร์ (pH 4.8) เป็นพื้นผิว ผสมปฏิกิริยา
1 ml มีซิเตรตบัฟเฟอร์ 0.5 ml ของพื้นผิว
1ml ของเอนไซม์ดิบและแก้ปัญหา ใน
ปฏิกิริยาถูกดำเนินการที่ 45° C สำหรับ 30 นาที ใน
จำนวนลดน้ำตาลออกในการ
ไฮโตรไลซ์ถูกวัด โดยวิธี DNSAใน
หน่วยเอนไซม์ (EU) ถูกกำหนดเป็นจำนวน
CMCase ต้องปล่อย 1μmole ลด
น้ำตาลต่อ ml ต่อนาทีภายใต้เหนือวิเคราะห์
เงื่อนไข
2.5 กำหนดโปรตีน:
มีความเข้มข้นของโปรตีนในตัวอย่างน้ำมัน
กำหนดโดยวิธี Folin Lowry (Lowry
et.al.,1951) กับวัว serum albumin (บีเอสเอ) เป็นการ
มาตรฐาน
2ฟอก 6 บางส่วนของ cellulase
เอนไซม์:
2.6.1 แอมโมเนียมซัลเฟตฝน:
เกี่ยวกับ 20 ml ของเอนไซม์ดิบถูก
อิ่มตัว ด้วยของแข็งแอมโมเนียซัลเฟตและ
ส่วนผสมที่เหลือค้างคืนที่ 4
0
C สำหรับฝน
(Lee et.al.,2008) Precipitates ถูกเก็บรวบรวม
centrifugation และ ml ละลายใน 10 มม. 50
โซเดียม acetate บัฟเฟอร์ (pH 5.5)
หน่วย 2.6.2:
การทำให้บริสุทธิ์บางส่วน เอนไซม์เก็บหลังจาก
แอมโมเนียมซัลเฟตฝนถูก dialyzed
กับบัฟเฟอร์ acetate โซเดียม 30 มม. (pH 5.5) ที่
4ºC มีการเปลี่ยนแปลงสามบัฟเฟอร์ (Lee et.al.,2008)
ตัวอย่างบริสุทธิ์บางส่วนถูก assayed สำหรับ
เนื้อหากิจกรรมและโปรตีนของเอนไซม์
2.7 รหัส cellulase ผลิต
แบคทีเรีย:
แยกอาจเกิดขึ้นได้อย่างไม่แน่นอนระบุ
สัณฐาน วัฒนธรรม และชีวเคมี
จำแนก
จำแนกสัณฐาน 2.7.1:
สำหรับจำแนกสัณฐาน อาณานิคมถูก
สีเทคนิคการย้อมสีของกรัม และใน
สงสัยแยกย้อมสีพิเศษยังเป็น
ทำย้อมสีแคปซูลรวม และ
endospore ย้อมสี การทดสอบ motility ยัง
ทำ
จำแนกวัฒนธรรม 2.7.2:
วัฒนธรรมของแต่ละแยกบริสุทธิ์ได้เพิ่มเติม
ลักษณะ ตามกรัมของ
เกิดปฏิกิริยาแต่ละแยกถูกส่งผ่านในระบบ
agar และแผ่น Mac Conkey agar แล้วบน
สื่อพิเศษ หลังจากบ่มอาณานิคม
ลักษณะที่สังเกต
จำแนก 2.7.3 ชีวเคมี:
ทดสอบชีวเคมีต่าง ๆ ถูกวิเคราะห์รวม
ทดสอบอินโดล Methyl แดงทดสอบ Vogues Proskauer
ทดสอบ ทดสอบใช้ซิเตรต แป้งไฮโต รไลซ์,
ตุ๋น liquefaction ไนเตรตลด Catalase
ทดสอบ ทดสอบ Oxidase, phenylalanine deamination และ
ทดสอบหมักน้ำตาล
2.8 เพิ่มประสิทธิภาพผลิต cellulase:
พารามิเตอร์เหมาะสมถูกกำหนดสำหรับ
cellulase ผลิตจากแยกมีประสิทธิภาพ
หมัก cellulase ถูกดำเนินใน
ช่วงต่าง ๆ ของพารามิเตอร์รวม
อุณหภูมิ pH ระยะฟักตัว พื้นผิว
ขนาดความเข้มข้นและ inoculums หลังจาก
หมักที่แตกต่างกันพารามิเตอร์ดิบ
ตัวอย่างเอนไซม์รวบรวมจากการตรวจสอบ
กิจกรรมเอนไซม์
2.8.1 ผลของอุณหภูมิ:
เพื่อกำหนดอุณหภูมิเหมาะสมสำหรับ
cellulase ผลิต ทำออกหมัก
ที่อุณหภูมิต่าง ๆ ในช่วงของ 25ºC,
35ºC, 45ºC, 55ºC และ 65ºC

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 การคัดกรองมัธยมศึกษาและการผลิต
เอนไซม์เซลลูเลส:
สายพันธุ์ที่มีศักยภาพได้รับการประเมินแล้ว
การผลิตเอนไซม์ สายพันธุ์ที่แสดงให้เห็น
การผลิตเซลลูเลสสูงสุดได้แล้ว
การพิจารณาศึกษาต่อ
สากลวารสารวิจัยด้านสิ่งแวดล้อมและเทคโนโลยี
41
อีกฮ์และอัล
2.3.1 กระบวนการหมักแผ่นจม:
สำหรับการเตรียมความพร้อมของเชื้อมาตรฐานที่
แสดงให้เห็นว่าสายพันธุ์โซนสูงสุดของการย่อยสลาย
ได้ในการเพาะเลี้ยง 20 มล. เชื้อ
กลาง [องค์ประกอบ (g / l):
Carboxymethylcellulose (CMC) 5; Tryptone 2;
KH
2po
4
4; นา
2HPO44; MgSO
4
.7 H2O0.2; CaCl2
.2 H2O
0.001; FeSO
4
.7 H2O 0.004 และปรับ pH ให้ 7]
รายบุคคลและบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่
นับได้เฉลี่ยของ 2 3.5x10
6
เซลล์ / มล.
วัฒนธรรมที่ได้รับ นี้ถูกนำมาใช้เป็นหัวเชื้อ
ในการผลิตองค์ประกอบ medium.The ของ
การผลิตสื่อที่เป็นเช่นเดียวกับเชื้อของ
กลางยกเว้นความเข้มข้นของ
เซลลูโลสคาร์บอกซีซึ่งเป็น 1% แทน
0.5%
การหมักถูกหามออกใน 250 มล.
ขวด Erlenmeyer แต่ละที่มี 100 ml ผ่านการฆ่าเชื้อ
กลางการผลิตและเชื้อด้วย 5% ของ
หัวเชื้อแบคทีเรียมาตรฐาน (ที่มี 2 3.5x10
6
เซลล์
/ ml) ขวดบ่มที่อุณหภูมิ 37
0
C ที่หมุน
ปั่นที่ 150 รอบต่อนาทีเพื่อ 72h
2.3.2 การเตรียมเอนไซม์ดิบ:
หลังจากการบ่มวัฒนธรรมถูกหมุนเหวี่ยงที่
1,600 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาทีที่ 4 ° C และใสถูก
ใช้เป็นแหล่ง เอนไซม์ดิบ ดิบ
แก้ปัญหาเอนไซม์ถูกนำมาใช้ในการตรวจวัด
กิจกรรมเอนไซม์
2.4 ทดสอบเอนไซม์เซลลูเลส:
Carboxymethylcellulase (CMCase) กิจกรรมได้รับการ
คำนวณโดยใช้วิธีการแก้ปัญหาที่ 1% ของ
carboxymethlycellulose (CMC) ใน 0.05 M ซิเตรต
บัฟเฟอร์ (pH 4.8) เป็นสารตั้งต้น ผสมปฏิกิริยา
ที่มี 1 มล. บัฟเฟอร์ซิเตรต, 0.5 มล. ของพื้นผิว
และการแก้ปัญหาของการแก้ปัญหา 1ml เอนไซม์ดิบ
ปฏิกิริยาได้ดำเนินการที่ 45 ° C เป็นเวลา 30 นาที
จำนวนของการลดน้ำตาลปล่อยออกมาใน
การย่อยสลายโดยวัดจาก DNSA method.The
หน่วยเอนไซม์ (EU) ได้รับการตรวจสอบเป็นจำนวน
CMCase ต้องปล่อย1μmoleของการลด
น้ำตาลต่อมิลลิลิตรต่อนาทีภายใต้การวิเคราะห์ข้างต้น
สภาพ
โปรตีน 2.5 การกำหนด:
ความเข้มข้นของโปรตีน ในตัวอย่างดิบถูก
กำหนดโดยใช้วิธี Folin โลว์รีย์ (โลว์รีย์
et.al. , 1951) ที่มีซีรั่มอัลบูมิวัว (BSA) เป็น
มาตรฐาน
2.6 การทำให้บริสุทธิ์บางส่วนของเซลลูเลส
เอนไซม์:
แอมโมเนียมซัลเฟต 2.6.1 เร่งรัด:
ประมาณ 20 มิลลิลิตร การแก้ปัญหาเอนไซม์ดิบถูก
อิ่มตัวด้วยแอมโมเนียมซัลเฟตที่มั่นคงและ
ส่วนผสมที่ถูกทิ้งไว้ค้างคืนที่ 4
0
C นานฝน
(ลี et.al. , 2008) ตะกอนที่ถูกเก็บรวบรวม
โดยการหมุนเหวี่ยงและละลายใน 10 มล. 50 มิลลิ
บัฟเฟอร์โซเดียมอะซิเตท (pH 5.5)
2.6.2 การฟอกเลือด:
สำหรับการทำให้บริสุทธิ์บางส่วนของเอนไซม์ที่เก็บรวบรวมหลังจาก
แอมโมเนียมซัลเฟตฝนถูก dialyzed
กับกันชน acetate โซเดียม 30mm (pH-5.5) ที่
4 º C กับสามการเปลี่ยนแปลงของบัฟเฟอร์ (ลี et.al. , 2008)
ตัวอย่างบริสุทธิ์บางส่วนได้รับการวิเคราะห์การ
ทำงานของเอนไซม์และโปรตีน
2.7 บัตรประจำตัวของเซลลูเลสผลิต
แบคทีเรีย
สายพันธุ์ที่มีศักยภาพที่มีการระบุคร่าวโดย
วิธีการก้านวัฒนธรรมและทางชีวเคมี
ลักษณะ .
ลักษณะทางสัณฐานวิทยา 2.7.1:
สำหรับอาณานิคมลักษณะทางสัณฐานวิทยาที่ถูก
ย้อมด้วยเทคนิคการย้อมสีแกรมและ
ผู้ต้องสงสัยที่แยกการย้อมสีพิเศษก็ยัง
ดำเนินการรวมถึงการย้อมสีและแคปซูล
endospore การย้อมสี การทดสอบการเคลื่อนที่ก็ยัง
ดำเนินการ
2.7.2 ลักษณะวัฒนธรรม:
วัฒนธรรมของเชื้อบริสุทธิ์ถูกต่อไป
ที่โดดเด่นบนพื้นฐานของแกรมของ
การเกิดปฏิกิริยาแยกบุคคลที่ถูกส่งผ่านสารอาหารใน
อาหารเลี้ยงเชื้อและ Mac conkey ของจานเลี้ยงเชื้อและจากนั้นใน
สื่อพิเศษ หลังจากการบ่มอาณานิคม
ลักษณะตั้งข้อสังเกต
2.7.3 ลักษณะทางชีวเคมี:
การทดสอบทางชีวเคมีที่แตกต่างกันถูกนำมาวิเคราะห์รวมถึง
การทดสอบ Indole, Methyl ทดสอบสีแดง Vogues-Proskauer
การทดสอบการทดสอบการใช้ซิเตรต, การย่อยสลายแป้ง,
เจลาตินเหลวลดไนเตรต, คา
ทดสอบทดสอบเอนไซม์, deamination phenylalanine และ
ทดสอบการหมักน้ำตาล
2.8 การเพิ่มประสิทธิภาพของการผลิตเซลลูเลส:
พารามิเตอร์ที่เหมาะสมที่สุดได้รับการพิจารณาในการ
ผลิตเซลลูเลสจากแยกที่มีประสิทธิภาพ
การหมักเซลลูเลสได้รับการดำเนินการที่
แตกต่างกันช่วงของพารามิเตอร์รวมถึง
อุณหภูมิ, pH, ระยะเวลาการบ่มพื้นผิว
ความเข้มข้นและขนาดหัวเชื้อแบคทีเรีย . หลังจาก
การหมักที่พารามิเตอร์ที่แตกต่างกันมันดิบ
ตัวอย่างเอนไซม์ถูกเก็บรวบรวมจากกันในการตรวจสอบ
กิจกรรมของเอนไซม์
2.8.1 ผลของอุณหภูมิ:
ในการกำหนดอุณหภูมิที่เหมาะสมสำหรับ
การผลิตเซลลูเลสหมักถูกหามออก
ที่อุณหภูมิต่างๆในช่วง 25 º C,
35 º C, 45 º C, 55 º C และ 65 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 ระดับการผลิตเอนไซม์เซลลูเลสและคัดกรอง
:

แล้วการประเมินศักยภาพสายพันธุ์เป็นเอนไซม์ที่ผลิต พบว่าแบคทีเรียเซลลูเลสสูงสุดแล้วแสดง

ถือว่าเพื่อการศึกษาต่อไป
วารสารสากลของการวิจัยและเทคโนโลยีสิ่งแวดล้อม
0
เชค et al .
2.3.1 ากระบวนการหมัก :
สำหรับการเตรียมเชื้อเหล่านั้น
มาตรฐานไอโซเลตพบสูงสุดของการเพาะเลี้ยงในเขต
3
[ องค์ประกอบกลาง 20 ml ( กรัม / ลิตร ) :
ผู้ป่วยใน ( CMC ) 5 ; ทริพโทน 2 ;
4
4 2po KH

; นา
2hpo44 ; MgSO
4
7h2o0.2 ; CaCl2
. 2H2O-dx
0.001 ;
4 รัส

7h2o 0.004 และการปรับ pH 7 ]
เป็นรายบุคคลและบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ที่º
เป็นนับได้เฉลี่ย 2-3.5x10
6

เลี้ยงเซลล์ / มิลลิลิตร )นี้ถูกใช้เป็นกล้าเชื้อสำหรับอาหาร

กลางผลิต องค์ประกอบของการผลิตเช่นเดียวกับปริมาณปานกลาง ยกเว้นปริมาณ

คาร์บอกซีเมทิลเซลลูโลสซึ่งเป็น 1% แทน
0.5 %
หมักได้ดําเนินการใน 250 ml
เออร์เลนเมเยอร์ขวดแต่ละที่มี 100 ml เป็นหมัน
การผลิตขนาดกลางและหัวเชื้อ 5 %
18 ชั่วโมงมาตรฐาน ( ที่มี 2-3.5x10
6

เซลล์/ ml ) ขวดอุณหภูมิ 37
0
c บนเครื่องปั่นหมุนที่ความเร็ว 150 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 72h
.
2.3.2 การเตรียมเอนไซม์ :
หลังจากบ่ม , วัฒนธรรมที่เป็นระดับที่
1600 รอบต่อนาที 20 นาทีที่ 4 ° C และนำคือ
ใช้เป็นแหล่งของเอนไซม์ . โดย
สารละลายเอนไซม์ถูกนำมาใช้เพื่อกำหนดกิจกรรมของเอนไซม์เซลลูเลส
.
:
) และเอนไซม์carboxymethylcellulase ( CMCase ) กิจกรรม
วิธีสารละลาย 1 %
carboxymethlycellulose ( CMC ) ใน 0.05 M
ซิเตรตบัฟเฟอร์ pH 4.8 ) เป็นสับสเตรท ปฏิกิริยาผสม
มีบัฟเฟอร์ซิเทรต 1 มิลลิลิตรของสารละลายและ 0.5 มล. (
1ml ของสารละลายเอนไซม์ดิบ
ปฏิกิริยาดำเนินการที่ 45 ° C เป็นเวลา 30 นาที ปริมาณน้ำตาลรีดิวซ์

ปล่อยในการย่อยสลายถูกวัดโดยวิธี dnsa หน่วย
เอนไซม์ ( EU ) คือกำหนดเป็นจํานวน
23 ต้องปล่อย 1 μโมลลดน้ำตาลต่อมิลลิลิตรต่อนาที

ข้างบน ) ภายใต้เงื่อนไข 2.5 กำหนด :

โปรตีนความเข้มข้นของโปรตีนในตัวอย่างดิบถูก
กำหนดโดยใช้วิธี folin เบส ( เบส
และคณะ . 1951 ) อัลบูมิน ( BSA ) เป็นมาตรฐาน
.
2บางส่วนของเอนไซม์เซลลูเลสบริสุทธิ์ 6
: :

ดูแลแอมโมเนียมซัลเฟตตกตะกอนประมาณ 20 มิลลิลิตรเอนไซม์ในสารละลายแอมโมเนียมซัลเฟตอิ่มตัวด้วย

ผสมแข็งและถูกทิ้งไว้ค้างคืนที่ 4
0
C สำหรับการตกตะกอน
( ลี และคณะ , 2551 ) ที่รวบรวมโดยการเหวี่ยงแยกตะกอน
ละลายใน 10 มล. และ 50 mm
โซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ pH 5.5 ) ดาวน์โหลด :

ไตการทำให้บริสุทธิ์บางส่วนของเอนไซม์ภายหลังการเก็บตะกอนแอมโมเนียมซัลเฟตซิ

กับ 30mm โซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ ( ph-5.5 )
4 º C สามการเปลี่ยนแปลงของบัฟเฟอร์ ( ลี และคณะ , 2551 )

ตัวอย่างซีรั่มบริสุทธิ์บางส่วนสำหรับเอนไซม์และโปรตีน . 2.7 การผลิต

เซลแบคทีเรียไอโซเลทแน่นอน :

อาจระบุหมายถึงลักษณะทางวัฒนธรรมและทางชีวเคมี
ตัวละคร โดย :

การพักการศึกษาลักษณะทางสัณฐานวิทยาลักษณะสำหรับอาณานิคมถูก
คราบกรัมเป็นเทคนิคการย้อมสีและ
สงสัยสายพันธุ์พิเศษด้วยการย้อมติด

รวมแคปซูลเอนโดสปอร์ staining ทดสอบการเคลื่อนที่ยัง
แสดง คุณสมบัติ :

2.7.2 ทางวัฒนธรรมเชื้อบริสุทธิ์ของแต่ละไอโซเลท
ลักษณะเพิ่มเติมบนพื้นฐานของพวกเขาคือการแยกเป็นแต่ละกรัม

ส่งต่อ NUMB3RS และแมคค กี การ์จานแล้ว
สื่อพิเศษ หลังจากบ่มอาณานิคม
ลักษณะเป็นอักษรไทย
2.7.3 ชีวเคมีชีวเคมีที่แตกต่างกันการทดสอบคุณสมบัติ :

มาวิเคราะห์รวมทดสอบอินโดล , Methyl ทดสอบสีแดงโวเกส proskauer
ทดสอบ ใช้ทดสอบการย่อยแป้งซิ , , เจลาติน ,
, การลดไนเตรท , Catalase
ทดสอบโดยทดสอบ - ฟีนิลอะลานีนและ
น้ำตาลหมักทดสอบ
2.8 เพิ่มประสิทธิภาพการผลิตเซลลูเลส :

หาพารามิเตอร์ที่เหมาะสมสำหรับการผลิตเซลลูเลสจากประสิทธิภาพของเชื้อ

ถูกหามออกในการหมัก เซลลูเลสช่วงที่แตกต่างกันของพารามิเตอร์รวม
อุณหภูมิ , ระยะเวลาที่ pH , ความเข้มข้นของสารอาหาร
และขนาด 18 ชั่วโมง หลังจากหมักที่แตกต่างกันพารามิเตอร์ดิบ

จากการเก็บตัวอย่างจากแต่ละคนเพื่อตรวจสอบ
แอคติวิตีของเอนไซม์
2.8.1 ผลของอุณหภูมิ :

เพื่อหาอุณหภูมิที่เหมาะสมสำหรับการผลิตเซลลูเลส การหมักโดยใช้
ที่อุณหภูมิต่าง ๆ ในช่วง 25 º C ,
3 º C 45 º C 55 º c 65 º C