GABA contents in GBR were determine

GABA contents in GBR were determined by using colorimetry.
One gram of GBR flour of each sample was weighed into
a plastic tube and 5 mL deionized water were added. The
mixture was oscillated and extracted for 1 h, then filtered. Half
a millilitre of the filtrate was collected to which was added
0.2 mL of 0.2 mol L−1 borate buffer (pH 9.0), 1 mL of 6% phenol
and 0.4 mL of 9% sodium hypochlorite. After intensive oscillation,
the mixture was put in boiling water for 10 min, and
then put in an ice bath for 20 min, and continually oscillated
until a blue colour appeared. Finally, 2 mL of 60% ethanol were
added to the mixture, and the sample was analyzed colorimetrically
at 645 nm wavelength. GABA content of sample was
determined by a relationship between absorption value and
standard GABA content.
Standard relationship between absorption value and GABA
content was obtained by using standard reagent. Twenty milligrams
of GABA reagent were precisely weighed by electronic
balance (AY120, d = 0.1 mg, Shimadzu Co. Kyoto, Japan),
dissolved in 100 mL deionized water in a volumetric flask and
shaken up. Mixtures of 0, 2, 4, 6, 8, 10 mL were taken and put
in a test tube, respectively, adding deionized water to 10 mL.
GABA content in the test tubes was 0, 0.04, 0.08, 0.12, 0.16,
0.20 mg L−1, respectively. GABA content in test tubes was determined
absorbance by uv-visible spectrophotometer (UV-
4802, Unico, Melville,NY, USA) at 645 nm wavelength (maximum
GABA absorption wavelength), A linear regression was made
between absorption values and standard GABA contents:
y = 0.2154x + 0.0014 (R2 = 0.996).
For measurement of GAD activity, GBR (0.5 g) was ground
with 4 mL phosphate buffer (pH 5.8) in an ice bath for extraction
of the enzyme. The homogenate was centrifuged at
10,000 × g for 15 min at 4 °C by using refrigerated high speed
centrifuge (5810R, Eppendorf, SN, Germany). The resulting supernatant
was the crude GAD used for assay of the activity of
GAD. The reaction mixture which consisted of 0.1 mL of crude
enzyme liquid and 0.2 mL of substrate was incubated for 2 h
at 30 °C and then terminated by adding 0.2 mL of 0.2 mol L−1
borate buffer (pH 9.0) and 1 mL of 6% phenol and 0.4 mL of 9%
sodium hypochlorite. After intensive oscillation, the mixture
was put in boiling water for 10 min, then put in ice bath for
20 min.The mixture was analyzed colorimetric at 630 nm wavelength
to determine absorption value. The GAD activity was
defined with reference to a 1 mol of GABA produced at 30 °C
per min per unit dry weight (mol GABA min−1 g−1 DW).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

น้ำนมข้าวกล้องงอก GBR เนื้อหาถูกกำหนดโดย colorimetryหนึ่งกรัมของแป้ง GBR ของแต่ละอย่างมีน้ำหนักในมีเพิ่มท่อพลาสติกและน้ำ deionized มล. 5 ที่ส่วนผสมคือ oscillated และสกัดสำหรับ 1 h นั้นกรอง ครึ่งหนึ่งmillilitre ของสารกรองรวบรวมไว้เพื่อที่ถูกเพิ่มเข้ามามล 0.2 0.2 โมล L−1 borate บัฟเฟอร์ (pH 9.0), 1 mL ของวาง 6%และ 0.4 mL ของ 9% ฟอก หลังจากเร่งรัดสั่นส่วนผสมที่ใส่ในต้มน้ำ 10 นาที และย้ายแล้วน้ำแข็งในอ่างอาบน้ำสำหรับ 20 นาที และ oscillated อย่างต่อเนื่องจนกระทั่งสีน้ำเงินปรากฏ ในที่สุด 2 mL ของเอทานอล 60% ได้เพิ่มส่วนผสม และมีวิเคราะห์ตัวอย่าง colorimetricallyที่ 645 nm ความยาวคลื่น น้ำนมข้าวกล้องงอกเนื้อหาของตัวอย่างกำหนด โดยความสัมพันธ์ระหว่างค่าการดูดซึม และมาตรฐานน้ำนมข้าวกล้องงอกเนื้อหามาตรฐานความสัมพันธ์ระหว่างค่าการดูดซึมและสารกาบาเนื้อหาได้รับ โดยใช้รีเอเจนต์ที่มาตรฐาน Milligrams ยี่สิบของรีเอเจนต์น้ำนมข้าวกล้องงอกได้แม่นยำน้ำหนัก โดยอิเล็กทรอนิกส์ยอดดุล (AY120, d = 0.1 มิลลิกรัม Shimadzu บริษัทเกียวโต ญี่ปุ่น),ละลายในน้ำ 100 mL deionized หนาว volumetric และยนต์ค่า ผสม 0, 2, 4, 6, 8, 10 mL ขึ้นมา และใส่ในหลอดทดสอบ ตามลำดับ เพิ่มน้ำ deionized จะ 10 mLเนื้อหาของสารกาบาในหลอดทดสอบมี 0, 0.04, 0.08, 0.12, 0.160.20 มิลลิกรัม L−1 ตามลำดับ กำหนดเนื้อหาสารกาบาในหลอดทดสอบabsorbance โดยเครื่องทดสอบกรดด่างสามารถมองเห็นได้รังสียูวี (UV-4802 ยูนิโก้ Melville, NY, USA) ที่ 645 nm ความยาวคลื่น (สูงสุดน้ำนมข้าวกล้องงอกดูดซึมความยาวคลื่น), การถดถอยเชิงเส้นทำระหว่างค่าการดูดซึมและมาตรฐานน้ำนมข้าวกล้องงอกเนื้อหา:y = 0.2154 x + 0.0014 (R2 = 0.996)การวัดกิจกรรมกาด GBR (0.5 กรัม) ถูกพื้นดินกับ 4 mL ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 5.8) ในการอาบน้ำแข็งสำหรับสกัดของเอนไซม์ Homogenate ถูก centrifuged ที่ซื้อ 10000 g สำหรับ 15 นาทีที่ 4 ° C โดยใช้ความเร็วสูงพร้อมตู้เย็นเครื่องหมุนเหวี่ยง (5810R, Eppendorf, SN เยอรมนี) Supernatant ผลลัพธ์กาดดิบใช้สำหรับทดสอบการกาด ส่วนผสมปฏิกิริยาซึ่งประกอบด้วย 0.1 mL ของดิบของเหลวเอนไซม์และ 0.2 mL ของพื้นผิวถูก incubated สำหรับ 2 hที่ 30 ° C และยกเลิกแล้ว โดยเพิ่ม 0.2 mL ของ 0.2 โมล L−1borate บัฟเฟอร์ (pH 9.0) และ 1 มล. 6% วาง และ 0.4 mL 9%ฟอกขาว หลังจากเร่งรัดสั่น ส่วนผสมที่ใส่ในน้ำเดือด 10 นาที จาก นั้นใส่ในอ่างน้ำแข็งสำหรับ20 นาทีส่วนผสมถูกวิเคราะห์เทียบเคียงที่ 630 nm ความยาวคลื่นการกำหนดค่าการดูดซึม มีกิจกรรมกาดกำหนดโดยอ้างอิงโมล 1 ของสารกาบาในการผลิตที่ 30 ° Cต่อนาทีต่อหน่วยแห้งน้ำหนัก (โมลสารกาบา min−1 g−1 DW)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เนื้อหา GABA ใน GBR ได้รับการพิจารณาโดยใช้ colorimetry.
หนึ่งกรัมแป้ง GBR ของกลุ่มตัวอย่างแต่ละคนถูกชั่งใส่
หลอดพลาสติกและ 5 มิลลิลิตรน้ำกลั่นปราศจากไอออนถูกเพิ่ม
ส่วนผสมที่ถูกแกว่งและสกัดเป็นเวลา 1 ชั่วโมง, กรองแล้ว ครึ่ง
มิลลิลิตรกรองถูกเก็บรวบรวมที่ถูกเพิ่มเข้ามา
0.2 มิลลิลิตร 0.2 mol L-1 บัฟเฟอร์ borate (pH 9.0) 1 มิลลิลิตรของฟีนอล 6%
และ 0.4 มิลลิลิตร 9% โซเดียมไฮโปคลอไรต์ หลังจากการสั่นเข้มข้น
ส่วนผสมที่ถูกใส่ในน้ำเดือด 10 นาทีและ
จากนั้นใส่ในอ่างน้ำแข็งเป็นเวลา 20 นาทีและต่อเนื่องแกว่ง
จนถึงสีฟ้าปรากฏ สุดท้าย 2 มิลลิลิตรของเอทานอล 60% ได้รับการ
เพิ่มส่วนผสมและตัวอย่างมาวิเคราะห์ colorimetrically
ที่ความยาวคลื่น 645 นาโนเมตร เนื้อหา GABA ของกลุ่มตัวอย่างได้รับการ
กำหนดโดยความสัมพันธ์ระหว่างค่าการดูดซึมและ
เนื้อหา GABA มาตรฐาน.
มาตรฐานความสัมพันธ์ระหว่างมูลค่าการดูดซึมและ GABA
เนื้อหาที่ได้รับโดยใช้สารมาตรฐาน ยี่สิบมิลลิกรัม
ของสาร GABA ถูกชั่งน้ำหนักอย่างแม่นยำอิเล็กทรอนิกส์
สมดุล (AY120, D = 0.1 มิลลิกรัม Shimadzu จำกัด เกียวโตประเทศญี่ปุ่น)
ละลายใน 100 มล deionized น้ำในขวดปริมาตรและ
เขย่าขึ้น ส่วนผสมของ 0, 2, 4, 6, 8, 10 มลถูกนำและใส่
ในหลอดทดลองตามลำดับการเติมน้ำกลั่น 10 มล.
เนื้อหา GABA ในหลอดทดลองเป็น 0, 0.04, 0.08, 0.12, 0.16,
0.20 มก. L-1 ตามลำดับ เนื้อหา GABA ในหลอดทดลองถูกกำหนด
โดยการดูดกลืนแสง UV-Visible Spectrophotometer (UV-
4802 ยูนิโก้เมลวิลล์, นิวยอร์ก, สหรัฐอเมริกา) ที่ความยาวคลื่น 645 นาโนเมตร (สูงสุด
ความยาวคลื่นการดูดซึม GABA), การถดถอยเชิงเส้นที่ถูกสร้างขึ้น
ระหว่างค่าการดูดซึมและเนื้อหา GABA มาตรฐาน:
y = 0.2154x + 0.0014 (R2 = 0.996).
สำหรับการวัดของกิจกรรม GAD, GBR (0.5 กรัม) คือพื้นดิน
ที่มี 4 ฟอสเฟตบัฟเฟอร์มิลลิลิตร (pH 5.8) ในอ่างน้ำแข็งสำหรับการสกัด
ของเอนไซม์ homogenate ถูกหมุนเหวี่ยงที่
10,000 กรัม× 15 นาทีที่ 4 ° C โดยใช้ความเร็วสูงในตู้เย็น
centrifuge (5810R, Eppendorf, SN, เยอรมนี) สารละลายที่เกิด
ถูก GAD ดิบที่ใช้ในการทดสอบของกิจกรรมของ
GAD ผสมปฏิกิริยาซึ่งประกอบด้วย 0.1 มิลลิลิตรน้ำมันดิบ
ของเหลวเอนไซม์และ 0.2 มิลลิลิตรของพื้นผิวถูกบ่มเป็นเวลา 2 ชั่วโมง
ที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสและสิ้นสุดลงแล้วโดยการเพิ่ม 0.2 มิลลิลิตร 0.2 mol L-1
บัฟเฟอร์ borate (pH 9.0) และ 1 มิลลิลิตรของ 6 % ฟีนอลและ 0.4 มิลลิลิตร 9%
โซเดียมไฮโปคลอไรต์ หลังจากการสั่นเข้มข้นผสม
ถูกขังอยู่ในน้ำเดือด 10 นาทีแล้วใส่ในอ่างน้ำแข็ง
20 ส่วนผสม min.The ได้รับการวิเคราะห์สีที่ความยาวคลื่น 630 นาโนเมตร
ในการกำหนดมูลค่าการดูดซึม กิจกรรมเดินไปเดินมาถูก
กำหนดด้วยการอ้างอิงถึง 1? mol ของ GABA ผลิตที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส
ต่อนาทีต่อหน่วยน้ำหนักแห้ง (? mol GABA นาที 1 กรัม-1 DW)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เนื้อหาในงอก GABA วิเคราะห์โดยใช้เม็ด .
1 กรัมของแป้งแต่ละตัวอย่างถูกเพาะชั่งใส่
หลอดพลาสติกและ 5 น้ำคล้ายเนื้อเยื่อประสานมลกล่าว
ผสม oscillated และสกัดเป็นเวลา 1 ชั่วโมง แล้วกรอง ครึ่ง : มิลลิลิตรของการรวบรวมที่ถูกเพิ่มเข้ามา
0.2 ml 0.2 โมล L − 1 บอเรตบัฟเฟอร์ pH 9.0 ) 1 ml
ฟีนอล 6% และ 0.4 มล. 9 % โซเดียมไฮโป .หลังจากแสงเข้มข้น
ผสมใส่ในน้ำเดือด 10 นาที แล้วใส่ในน้ำแข็งและ
อาบน้ำ 20 นาที และยังคง oscillated
จนกว่าสีฟ้าปรากฏตัว ในที่สุด , 2 ml ของเอทานอลร้อยละ 60 ถูก
เพิ่มการผสมและตัวอย่าง วิเคราะห์ colorimetrically
ที่ 645 nm ความยาวคลื่น ปริมาณ GABA จำนวน
กำหนดโดยความสัมพันธ์ระหว่างค่าการดูดกลืนแสงและ
ปริมาณ GABA มาตรฐาน ความสัมพันธ์ระหว่างค่าการดูดกลืนแสงและมาตรฐาน

เนื้อหา GABA ได้โดยใช้สารเคมีมาตรฐาน 20 มิลลิกรัมของสารเคมีได้แน่นอนน่า

( ay120 ชั่งโดยเครื่องชั่ง , D = 0.1 มิลลิกรัม , Shimadzu Co . เกียวโต , ญี่ปุ่น ) ,
ละลายในน้ำ 100 มิลลิลิตร คล้ายเนื้อเยื่อประสานในขวดปริมาตรและ
หวั่นไหว . ผสม 0 , 2 , 4 , 6 , 8 , 10 ml ถ่ายและใส่
ในการทดสอบหลอดตามลำดับ การเพิ่มปริมาณ GABA คล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำ 10 ml .
ในหลอดทดลอง คือ 0 , 0.04 , 0.08 0.12 , 0.16 ,
0.20 mg L − 1 ตามลำดับ ปริมาณ GABA ในหลอดทดลองได้ถูกกำหนดโดยความเห็น
การดูดกลืนแสงยูวี ( UV -
4802 ยูนิโก้ , Melville , NY , USA ) ที่คุณ nm ความยาวคลื่น ( wavelength สูงสุด
GABA การดูดซึม , การถดถอยเชิงเส้นได้
ระหว่างค่าการดูดกลืนและเนื้อหาสารมาตรฐาน :
Y = 0.2154x 0.0014 ( R2 = โดย ) .
วัดกาดกิจกรรมเพาะ ( 0.5 กรัม ) คือพื้นดิน
4 ml ( ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 5.8 ) ในน้ำแข็งอาบน้ำสำหรับการสกัด
ของเอนไซม์ โดยแยกเป็นระดับที่
10 × G สำหรับ 15 นาทีที่ 4 องศา C โดยใช้ความเร็วสูง ( 5810r refrigerated centrifuge
เพนดอร์ฟ , SN , เยอรมัน ) ส่งผลให้น่าน
คือน้ำมันที่ใช้สำหรับการทดสอบของกาดกิจกรรม
กาด ปฏิกิริยาผสมซึ่งประกอบด้วยของเหลว 0.1 มิลลิลิตรเอนไซม์ดิบ
และ 0.2 มล ( ถูก ) 2 H
ที่ 30 ° C และสิ้นสุดลงโดยการเพิ่ม 0.2 มล. 0.2 mol − 1 L
บอเรตบัฟเฟอร์ pH 9.0 ) และ 1 มิลลิลิตรของฟีนอล 6% และ 0.4 มล. 9 %
โซเดียม ไฮโปคลอไรท์ . หลังจากคาบ เข้มข้น ผสม
ถูกใส่ในน้ำเดือด 10 นาทีแล้ววางน้ำแข็งในอ่าง
20 นาที ส่วนผสมที่ 630 nm ความยาวคลื่น Colorimetric วิเคราะห์
หาค่าการดูดซึม กิจกรรมที่กาด
นิยามอ้างอิง 1  โมลของกาบาผลิต 30 ° C
ต่อนาทีต่อหน่วยน้ำหนักแห้ง (  mol −− 1 GABA มิน 1 กรัม แห้ง )