Determination of cell survival usin

Determination of cell survival using the MTT assay. Chemosensitivity was measured in vitro using the MTT colorimetric assay, which was performed in 96‑well plates (18). To determine the effect of EGCg, A549 cells (2.5x103) in 90 μl culture medium were inoculated into each well. Following 24 h incubation, 10‑μl samples of various concentrations of EGCg and the vehicle were added and the plate was incubated for 72 h. Next, 0.5 mg/ml MTT (final concentration) was added to each well and the plate was incubated for a further 4 h at 37˚C. The resulting formazan was dissolved in 100 μl solubilization solution (10% SDS in 0.01 M HCl) and the plate was re‑incubated overnight at 37˚C. The optical density (OD) at 550 nm was determined using an ARVO SX model 1420 Multilabel Counter (PerkinElmer, Waltham, MA, USA). The control wells were set as zero absorbance. The percentage of cell survival was calculated using the background‑corrected absorbance as follows: Cell survival (%) = (ODexperiment/ODcontrol) x 100. The data represent the mean and standard deviation from triplicate determination.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การกำหนดความอยู่รอดของเซลล์ที่ใช้ทดสอบ MTT Chemosensitivity ถูกวัดในหลอดใช้ MTT เคียงวิเคราะห์ ซึ่งมีดำเนินการในแผ่น 96‑well (18) เพื่อดูผลของ EGCg เซลล์ A549 (2.5x103) ในสื่อวัฒนธรรม μl 90 ถูก inoculated ในแต่ละบ่อ ต่อคณะทันตแพทยศาสตร์ 24 ชม มีเพิ่มความเข้มข้นต่าง ๆ ของ EGCg และยานพาหนะตัวอย่าง 10‑μl และจานถูก incubated สำหรับ 72 h , 0.5 mg/ml MTT (ความเข้มข้นสุดท้าย) ถูกเพิ่มไปแต่ละดีและจานถูก incubated สำหรับ h 4 เพิ่มเติมที่ 37˚C Formazan ผลลัพธ์ถูกละลายในโซลูชันการ solubilization μl 100 (10% SDS ใน 0.01 M HCl) และจานถูก re‑incubated ค้างคืนที่ 37˚C ความหนาแน่นออปติคอล (OD) ที่ 550 nm กำหนดใช้การ ARVO SX รุ่น 1420 Multilabel เคาน์เตอร์ (PerkinElmer, Waltham, MA สหรัฐอเมริกา) บ่อควบคุมถูกกำหนดเป็นศูนย์ absorbance มีคำนวณเปอร์เซ็นต์การอยู่รอดของเซลล์ใช้ background‑corrected absorbance เป็นดังนี้: เซลล์รอด (%) = (ODexperiment/ODcontrol) x 100 ข้อมูลแสดงค่าเฉลี่ยและส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานจากเรื่อง triplicate

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความมุ่งมั่นของการอยู่รอดของเซลล์โดยใช้การวิเคราะห์ MTT Chemosensitivity วัดในหลอดทดลองโดยใช้การทดสอบสี MTT ซึ่งได้รับการดำเนินการในแผ่น 96 หลุม (18) การตรวจสอบผลกระทบของ EGCG เซลล์ A549 (2.5x103) ในอาหารเลี้ยงเชื้อ 90 ไมโครลิตรถูกเชื้อในแต่ละดี ต่อไปนี้การบ่ม 24 ชั่วโมงตัวอย่าง 10 ไมโครลิตรความเข้มข้นต่างๆของ EGCG และยานพาหนะมีการเพิ่มและแผ่นที่ถูกบ่มเป็นเวลา 72 ชั่วโมง ถัดไป 0.5 mg / ml MTT (ความเข้มข้นสุดท้าย) ถูกบันทึกอยู่ในแต่ละจานที่ดีและได้รับการบ่มเป็นเวลาอีก 4 ชั่วโมงที่ 37C formazan ส่งผลให้ถูกละลายใน 100 ไมโครลิตรวิธีการแก้ปัญหาการละลาย (10% SDS ใน 0.01 M HCl) และแผ่นเป็นอีกครั้งที่บ่มค้างคืนที่ 37C ความหนาแน่นของแสง (OD) ที่ 550 นาโนเมตรถูกกำหนดโดยใช้รูปแบบตอนบ่าย SX 1420 Multilabel เคาน์เตอร์ (PerkinElmer, เคมบริดจ์, สหรัฐอเมริกา) ควบคุมหลุมที่ถูกกำหนดให้เป็นศูนย์การดูดกลืนแสง ร้อยละของการอยู่รอดของเซลล์ที่คำนวณโดยใช้การดูดกลืนแสงพื้นหลังการแก้ไขดังต่อไปนี้: การอยู่รอดของเซลล์ (%) = (ODexperiment / ODcontrol) x 100 ข้อมูลที่เป็นตัวแทนของค่าเฉลี่ยและค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานจากความมุ่งมั่นที่เพิ่มขึ้นสามเท่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การวิเคราะห์การอยู่รอดของเซลล์ใช้ MTT assay พบ chemosensitivity วัดในหลอดทดลองโดยใช้วิธี MTT Colorimetric , ซึ่งแสดงใน 96 ‑ดีแผ่น ( 18 ) เพื่อศึกษาผลของ EGCG a549 , เซลล์ ( 2.5x103 ) ใน 90 μ l สื่อวัฒนธรรมเป็นเชื้อแต่ละครั้งได้อีกด้วย ต่อไปนี้ระยะเวลา 24 ชั่วโมง10 ‑μ l ตัวอย่างความเข้มข้นต่างๆของ EGCG และยานพาหนะเพิ่มจานบ่มสำหรับ 72 ชั่วโมงถัดไป , 0.5 mg / ml MTT ( ความเข้มข้นสุดท้าย ) ที่ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละอย่างดีและจานบ่มสำหรับอีก 4 ชั่วโมง 37 ˚ C ผลปฏิบัติการละลายในการสกัดสารละลาย ( 100 μ l 10% SDS ใน 0.01 M HCl ) และจานอีก‑บ่มค้างคืนที่ 37 ˚ Cความหนาแน่นของแสง ( OD ) ที่ 550 nm จึงตัดสินใจใช้ตอนบ่าย SX รุ่น 1420 multilabel เคาน์เตอร์ ( Perkinelmer Waltham , MA , USA , ) บ่อควบคุมมีตั้งเป็นศูนย์ค่า . เปอร์เซ็นต์การอยู่รอดของเซลล์ถูกคำนวณโดยใช้พื้นหลัง‑โมเลกุลมีขั้วดังนี้ รอดคุก ( % ) = ( odexperiment / odcontrol ) x 100ข้อมูล คือ ค่าเฉลี่ยและส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานจากการทำสำเนาสามฉบับ .