2. Experimental Section2. 1. Prepar

2. Experimental Section
2. 1. Preparation of Silver Nanoparticles
The silver nanoparticles used in this study were
prepared by chemical reduction of silver compounds,
following a method used by Link et al. (1999) with a minor
modification. 0.0043 g silver nitrate (AgNO3, from SigmaAldrich,
ACS reagent) was dissolved in 95 mL de-ionised
water (Millipore, 18 MΩ-cm). The resulting solution was
heated by a hot plate to boiling point whereupon 5 mL of
sodium citrate (1% w/v, from BDH Chemicals) was added.
The solution was then refluxed for 30 minutes and turned
into the AgNP suspension. After the suspension temperature
decreased to room temperature, it was stored in the dark at
4-8 0C before use. AgNPs produced by this method were
found to have a lateral size in the range of 5-35 nm,
determined from the images from a high resolution
transmission electron microscope (HRTEM) (JEOL 2100F
FGETEM) at Durham University.
2. 2. Preparation of Sea Urchin Specimens
Sperm and eggs (Gametes) were collected from adult sea
urchins (Paracentrotus lividus) inhabiting the Adriatic Sea at
Limski kanal, Croatia. Fertilization, using 0.5 M KCl injection
to induce spawning of gametes, was carried out in natural
seawater filtered through a 0.22 µm membrane filter. For
AgNP-exposed samples (in contrast to the control), about 2 h
after fertilization, AgNPs were added to the sea urchin larvae
at a concentration of 0.3 mg/L. In both cases, the larvae were
collected at 51 h after fertilization by fixing with 100%
ethanol. The samples were washed with DI water several
times before any measurements.
2. 3. XANES and FTIR
XANES and FTIR measurements were performed at
beamline ID21 of the European Synchrotron Radiation
Facility (ESRF), Grenoble, France. XANES spectra were
collected in fluorescence mode on selected points of the
sample with the beam size of 0.2 µm x 0.8 µm. Measurements
were made using X-rays with tuneable energy in the range
from 3.32 to 3.47 keV, with a 0.225 eV energy step and 0.1 s
dwell time.
FTIR spectra were collected in transmission mode, with
a resolution of 4 cm-1. The beam size was 6 µm x 6 µm,
imprinting on specimens deposited on 0.2 mm thickness BaF2
windows. Specimens were scanned with steps of 4 µm in both
directions. For each spectrum, 64 scans were accumulated
from 4000 to 500 cm-1 and averaged. Background spectra
were collected every 30 minutes.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2 การส่วนที่ทดลอง2. 1 เตรียมเก็บกักเงินเก็บกักเงินที่ใช้ในการศึกษานี้ได้โดยการลดสารเคมีสารเงินต่อวิธีการที่ใช้โดยเชื่อมโยง et al. (1999) กับผู้เยาว์ปรับเปลี่ยน 0.0043 g ซิลเวอร์ไนเตรท (AgNO3 จาก SigmaAldrichรีเอเจนต์ ACS) ละลายใน 95 mL กรองสะอาดน้ำ (มิลลิพอร์ 18 MΩ-ซม.) โซลูชั่นได้ร้อน ด้วยจานร้อนถึงจุดเดือดครั้น 5 มล.โซเดียมซิเตรต (1% w/v จากเคมี BDH) ถูกเพิ่มการแก้ไขปัญหาแล้ว refluxed 30 นาที และเปิดในการระงับ AgNP หลังจากอุณหภูมิระงับลดอุณหภูมิห้อง มันถูกเก็บไว้ในมืดที่4-8 0 C ก่อนใช้ AgNPs ที่ผลิต โดยวิธีนี้ได้พบว่ามีขนาดข้างในช่วง 5-35 nmพิจารณาจากรูปภาพจากความละเอียดสูงส่งอิเล็กตรอน (HRTEM) (JEOL 2100FFGETEM) มหาวิทยาลัย Durham2. 2 การเตรียมตัวอย่างปลิงทะเลสเปิร์มและไข่ (ระยะ) ถูกเก็บรวบรวมจากทะเลผู้ใหญ่urchins (Paracentrotus lividus) ที่อาศัยอยู่ทะเลเอเดรียติกที่Kanal ที่ Limski โครเอเชีย ปฏิสนธิ ใช้ฉีด KCl 0.5 ม.ก่อให้เกิดการวางไข่ของระยะ การดำเนินการในธรรมชาติน้ำทะเลกรองผ่านตัวกรองเมมเบรน µm 0.22 สำหรับตัวอย่างเปิดเผย AgNP (ตรงข้ามกับตัวควบคุม) ประมาณ 2 ชั่วโมงหลังจากปฏิสนธิ AgNPs ถูกเพิ่มไปยังตัวอ่อนของเม่นทะเลที่ความเข้มข้น 0.3 มิลลิกรัม/ลิตร ในทั้งสองกรณี ตัวอ่อนได้เก็บที่ 51 ชั่วโมงหลังจากปฏิสนธิ โดยการแก้ไข 100%เอทานอล ตัวอย่างจะถูกล้าง ด้วยน้ำ DI หลายครั้งก่อนการประเมินใด ๆ2. 3 XANES และ FTIRวัด XANES และ FTIR ดำเนินการที่beamline ID21 ของรังสี Synchrotron ยุโรปสินเชื่อ (ESRF), เกรอน็อบล์ ฝรั่งเศส ถูกสเป็ค XANESเก็บรวบรวมในโหมดเรืองแสงในจุดเลือกของการตัวอย่าง มีขนาดลำแสงขนาด 0.2 µm x 0.8 µm. วัดทำโดยใช้รังสีเอกซ์พลังงาน tuneable ในช่วงจาก 3.32 การ 3.47 keV ขั้นตอนพลังงาน 0.225 eV และ 0.1 sซีเควนซ์ครั้งFTIR สเป็คถูกจัดเก็บในโหมดการส่ง พร้อมความละเอียด 4 ซม.-1 ขนาดลำแสงได้ 6 µm x 6 µmimprinting บนตัวอย่างฝากความหนา 0.2 มม. BaF2windows ตัวอย่างแกน ด้วยขั้นตอน 4 µm ในทั้งสองแนวทางการ สำหรับสเปกตรัมแต่ละ สแกน 64 ถูกสะสมจาก 4000-500 ซม.-1 และเฉลี่ย พื้นหลังมุมได้รวบรวมทุก ๆ 30 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

มาตรา 2 การทดลอง
2 1. การเตรียมการของซิลเวอร์นาโน
อนุภาคนาโนเงินที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ถูก
จัดทำขึ้นโดยการลดลงของสารเคมีเงิน
ตามวิธีที่ใช้โดยการเชื่อมโยง et al, (1999) กับผู้เยาว์
การปรับเปลี่ยน 0.0043 กรัมเงินไนเตรต (AgNO3 จาก SigmaAldrich,
ACS น้ำยา) ถูกละลายใน 95 มล de-ionised
น้ำ (ค 18 MΩซม) วิธีการแก้ปัญหาที่เกิดขึ้นได้รับ
ความร้อนจากจานร้อนจุดเดือดครั้นแล้ว 5 มล
โซเดียมซิเตรต (1% w / v จาก BDH Chemicals) ถูกบันทึก.
วิธีแก้คือ refluxed แล้วเป็นเวลา 30 นาทีและหัน
เข้าสู่การระงับ AgNP หลังจากที่อุณหภูมิระงับ
ลดลงไปที่อุณหภูมิห้องมันถูกเก็บไว้ในที่มืดที่
4-8 0C ก่อนการใช้งาน AgNPs ผลิตโดยวิธีการนี้ถูก
พบว่ามีขนาดด้านข้างในช่วง 5-35 นาโนเมตรที่
กำหนดจากภาพจากความละเอียดสูง
การส่งผ่านกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (HRTEM) (JEOL 2100F
FGETEM) ที่มหาวิทยาลัยเดอร์แฮม.
2 2. การเตรียมความพร้อมของเม่นทะเลตัวอย่าง
สเปิร์มและไข่ (gametes) ที่ถูกเก็บรวบรวมจากทะเลผู้ใหญ่
เม่นทะเล (Paracentrotus lividus) ที่อาศัยอยู่ในทะเลเอเดรียติกที่
Limski คาแนล, โครเอเชีย ปฏิสนธิโดยใช้ฉีด 0.5 M KCl
ที่จะทำให้เกิดการวางไข่ของเซลล์สืบพันธุ์ได้รับการดำเนินการในธรรมชาติ
น้ำทะเลกรองผ่านตัวกรอง 0.22 ไมโครเมตรเมมเบรน สำหรับ
ตัวอย่าง AgNP สัมผัส (ตรงกันข้ามกับควบคุม) ประมาณ 2 ชั่วโมง
หลังจากการปฏิสนธิ, AgNPs ถูกเพิ่มเข้าไปในตัวอ่อนเม่นทะเล
ที่ความเข้มข้น 0.3 มิลลิกรัม / ลิตร ในทั้งสองกรณีตัวอ่อนที่ถูก
เก็บใน 51 ชั่วโมงหลังจากการปฏิสนธิโดยการแก้ไขด้วย 100%
เอทานอล กลุ่มตัวอย่างถูกล้างด้วยน้ำ DI หลาย
ครั้งก่อนที่วัดใด ๆ .
2 3. XANES และ FTIR
XANES และ FTIR วัดได้ดำเนินการที่
ID21 beamline ของยุโรปซินโครรังสี
สิ่งอำนวยความสะดวก (ESRF) Grenoble, ฝรั่งเศส XANES spectra ถูก
เก็บไว้ในโหมดการเรืองแสงในจุดที่เลือกของ
กลุ่มตัวอย่างที่มีขนาดลำแสงของ 0.2 ไมครอน x 0.8 ไมโครเมตร วัด
ถูกสร้างขึ้นมาโดยใช้รังสีเอกซ์พลังงาน tuneable ในช่วง
3.32-3.47 เคฟกับขั้นตอนการใช้พลังงาน 0.225 EV และ 0.1 s
อาศัยเวลา.
FTIR สเปกตรัมถูกเก็บไว้ในโหมดการส่งผ่านด้วย
ความละเอียดของ 4 ซม. 1 ขนาดลำแสง 6 x 6 ไมโครเมตรไมโครเมตร
ประทับบนชิ้นงานที่ฝากไว้ใน 0.2 มิลลิเมตรความหนา BaF2
หน้าต่าง ตัวอย่างที่ถูกสแกนด้วยขั้นตอน 4 ไมโครเมตรทั้งสอง
ทิศทาง สำหรับแต่ละสเปกตรัม 64 สแกนสะสม
4000-500 ซม-1 และเฉลี่ย สเปกตรัมพื้นหลัง
ที่ถูกเก็บรวบรวมทุก 30 นาที