การประเมินเนื้อเยื่อ epididymis apoptosis โดยการทดสอบ TUNEL ตัวอย่างได้รับการแก้ไขในสารละลาย paraformaldehyde 4% ฝังอยู่ในพาราฟินและแบ่งส่วนที่ 7 μm ทุกส่วนสิบถูกย้อมสีสําหรับขั้ว deoxynucleotidyl transferase-ไกล่เกลี่ย dUTP นิคสิ้นสุดการติดฉลาก (TUNEL; ชุด ApopTag, อินเตอร์เจน, ซื้อ, NY)ส่วนที่ถูก deparaffinized ในการไล่ระดับสีแอลกอฮอล์ตามด้วยไซลีน, แล้วล้างสองครั้งในบัฟเฟอร์ทริส (0.05 M Trizma-ฐาน, 0.15 M NaCl, pH 7.6). ส่วนที่ถูกบ่มด้วยบัฟเฟอร์สมดุลในชุด ApopTag เป็นเวลา 5 นาทีและตอบสนองในบัฟเฟอร์ปฏิกิริยากับ 10 U TdT และ 1 นาโนเมตรของ dUTP-digoxigenin เป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่ 37 ° C  ปฏิกิริยาถูกยกเลิกโดยการเพิ่มบัฟเฟอร์หยุด / ล้างและล้างสองครั้งด้วยบัฟเฟอร์ Tris Antidigoxigenin-HRP ถูกเพิ่มและตอบสนองเป็นเวลา 30 นาทีที่ 37 ° C  หลังจากล้างด้วยน้ํากลั่นนิวเคลียสถูกตอบโต้ด้วย hematoxylin และสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์แสงในการประเมิน apoptosis ของเซลล์เยื่อบุผิวในส่วนเริ่มต้นของเนื้อเยื่อ epididymis พื้นที่ TUNEL บวกของเนื้อเยื่อ epididymis ถูกวัดโดยใช้โปรแกรมวิเคราะห์ภาพ Scion (Scion Corporation, Frederick, MA) และเปรียบเทียบกับพื้นที่ทั้งหมดของเนื้อเยื่อ epididymis ในสไลด์
การแปล กรุณารอสักครู่..
